油脂很重的器皿应先将油脂擦去.doc

油脂很重的器皿应先将油脂擦去。粘有煤膏、焦油及树脂一类的物质，可用浓硫酸或40%氢氧化钠或用洗涤液浸泡；沾有腊或油漆物，可加热使之融熔后揩去，或用有机溶剂（苯、二甲苯、汽油、丙酮。松节油等）揩去。 载玻片或盖玻片，先揩去油垢，再放入5%肥皂水中煮分钟，立即用清水冲洗，以后放在稀的洗液中浸泡2小时，再用清水洗干净，最后用蒸馏水冲洗，干后浸于95%酒精中保存备用。洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀湿润面无条纹和水珠。器皿包扎要灭菌 后的器皿仍能保持无菌状态，需在灭菌 前进行包扎。培养皿 洗净的培养皿烘干后每10套（或根据需要而定）叠在一起，用牢固的纸卷成一筒，或装入特制的铁筒中，然后进行灭菌。吸管 洗净、烘干后吸管，在吸口的一头塞入少许脱脂棉花，以防在使用时造成污染，塞入的棉花量要适宜，多余的棉花可用酒精灯火焰烧掉。每支吸管用一条宽约45cm的纸条，以3045的角度螺旋形卷起来，吸管的尖端在头部，另一端用剩余的纸条，打成一结，以防散开，标上容量，若干支吸管包扎成一束进行灭菌。使用时，从吸管事间拧断纸条，抽出吸管。试管和三角瓶 试管和三角瓶都需要做合适的棉塞，棉塞可起过滤作用，避免空气中的微生物进入容器，制作棉塞时，要求棉花紧贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，松紧适宜。过紧易挤破管口和不易塞入；过松易脱落和污染。棉塞的长度不小于管口直径的2倍，约2/3塞进管口。 目前，国内已开始采用塑料试管塞，可根据所用的试管的规格和实验要求来选择和采用合适的塑料试管塞。 若干支试管用绳扎在一起，在棉花塞部分外包裹油纸或牛皮纸，再用绳扎紧。三角瓶加棉塞后单个用油纸包扎。3、灭菌把要灭菌的物品放在箱内，堆积时要留入空隙，勿使接触器壁、铁壳，关闭箱门。接通电源，把位于箱顶的通气孔适当打开，使箱内湿空气能逸出，至箱内温度达到100时关闭。调节温度控制器旋扭，直至箱内温度达到所需要温度为止，观察温度是否恒定。若不稳定，再进行调节，稳定后不可再拨动调节旋扭和通气孔，保持140160，23h。灭菌结束后切断电源，待箱内温度降至60时，才能打开箱门取出灭菌物品。同时，应将温度调节旋扭调到零点，并打开通气孔。高压蒸汽灭菌锅的操作过程：使用前，先在灭菌锅内加入适量的水，然后把要灭菌的物品放入锅内，盖上锅盖，对称地拧紧螺栓，以防漏气。在灭菌锅底部加热，同时打开排气阀，待自排气阀冒热气35min后关闭。至压力表所示压力升至所需压力时开始计时。通过调整热源，而维持一定的压力。达到灭菌时间后，停止加热。待锅内蒸气全部排完后，方可打开排气阀，打开锅盖，取出灭菌物品。使用完后，应及时将锅内的放去，以防生锈。高压蒸汽灭菌锅种类规格很多，以上操作步骤适用于手提式高压蒸汽灭菌锅。其它种类的灭菌锅，它在使用时应严格按操作说明书操作。1、 根据要求清洗各玻璃器皿，并进行包扎。2、 用电热干燥箱对玻璃器皿进行干热灭菌。3、 用高压蒸汽灭菌锅对玻璃器皿进行蒸汽灭菌。实验报告：1、 在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题，为什么？答：物品不要摆放太挤，以免妨碍空气流通。灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板，以防包装纸烤焦起火。灭菌时人不能离开。灭菌结束后不能忘记关掉电源。待温度降到60度以下再打开，否则冷热空气交替，玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故。2、为什么干热灭菌比湿热灭菌所需要的温度要高，时间要长？答：在湿热条件下，有水蒸汽的作用：高温水蒸汽导热比干空气要快；高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜，直接进入细胞内破坏细胞；高温水蒸汽能水解一部分细胞结构，加速导热。3、高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀，开盖取物？答：在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低，二是湿热的穿透力比干热大；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100时，由气态变为液态时可放出226kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。 在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。4、 在使用高压蒸汽灭菌锅时，怎样杜绝一切不安全的因素？答：步奏正确，密封要好。一、高压灭菌锅使用前要水加到水位线；二、将需灭菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入灭菌锅内，关闭锅盖，检查排气阀、安全阀状态，三、打开电源，检查参数设置是否正确，然后按下“work”键，灭菌锅开始工作；自动派冷气，到105时，底部排气阀门自动关闭，然后压力开始上升；四、压力升至 0.15MPa（121）时，灭菌锅再次自动放气，然后开始记时，一般培养基灭菌20min，蒸馏水灭菌30min；五、达到规定的灭菌时间后，关闭电源，打开放气阀缓慢放气；当压力指针降至 0.00MPa时，放气阀无蒸汽排除时，方可开启锅盖。5、灭菌在微生物实验操作中有何重要意义？答：防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果。6、 黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的孢子对热的抗性