「液相色谱-质谱-核磁共振联用技术及其在药物代谢与结构鉴定中的应用【严选内容】」.doc

液相色谱质谱核磁共振联用技术及其在药物代谢与结构鉴定中的应用 学院：海洋港口学院 班级：14制药工程 学号：1423014113 姓名：何倩 时间：2015年1月6日【前言】液相色谱质谱核磁共振（）联用技术早期 发展十分缓慢，主要受制于 仪的灵敏度、溶剂峰抑制 问题和与联机系统等问题1。近年来，随着波谱仪磁场强度的提高、专用探头的设计及溶剂峰 抑制技术的发展，解决了动态变化、灵敏度及溶剂抑制（尤其 是梯度系统）的问题，从而促进了联用技术的 迅速发展。技术的快速发展在分析方面具有 突出的优点，目前本技术以为主要分析手段，它集液 相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度于一体，被广泛应用 于实验研究中，如药物代谢研究2、药动学研究3、药物多组 分含量测定4等。虽然可以提供化合物的分子离子峰 和碎片离子峰进行分析，但是却不能明确地鉴定一 些未知的具有光学和几何异构体的化合物结构。而且，一些 不易离子化的化合物响应很低，生物基质的抑制也影响 化合物的离子化。因此，在某些研究中需要利用 来研 究化合物的结构信息。在这种情况下，种技 术在线联合使用形成在线系统，它是进行药物 代谢、结构鉴定等方面研究的强有力工具，目前该技术已在 多个领域应用广泛。【正文】一、 在药物代谢中的应用年，等5使用 系统从混合物中分离并鉴定 出一个有着个相连三唑环结构的氟化物，其后 等6将，苯并呋喃（）经大鼠腹腔给药后收集尿液，鉴 别其代谢产物。 系统应用较成功的是对乙酰 氨基酚的代谢研究：早期，等7通过双向体系反向梯度洗脱，经阳离子检测，对对乙酰氨基 酚在人尿液中代谢物进行研究，不仅检测到传统产物外，还 发现了其他内源性代谢物。其后，等8采用溶 剂峰抑制进行了相似实验，流动相：乙腈（溶剂）和 含 （）三氟醋酸（溶剂），梯度洗脱，开始 到 线性增加到 ，流速 ，检测波长 9。等10采用冷冻探针仍对对乙酰氨基酚进行 研究，灵敏度提高了倍。另外等1用 研究了异环磷酰胺的毒性和代谢物，观察尿液中各种 指标的变化，并结合 谱，鉴定出个代谢物。而将 固相萃取技术加入 系统后，2利用和低温探头技术研究了人尿中对乙酰 氨基酚的代谢物，并鉴定了一种微量的新代谢产物 。当检测物浓度较低 时加入是最有效的分析手段之一。二、 在结构鉴定中的应用、 在天然产物结构鉴定中的应用 所提 供的大量、 信息，对分析结构复杂、混合成分 多的天然产物具有重要作用。王映红等3在对垂子买麻藤 茎化学成分的研究过程中，应用 技术实现了该药 材提取混合物的分离、鉴定。等4应用该技术结 合活性分析实现了粗提取物中新型活性成分的靶向分离筛 选，初步获得潜在活性的成分，大幅提高了筛选效率。年15报道应用联用技术鉴定中的脂苷异构体，将粉碎后的南非钩麻根茎以甲醇提取， 粗提取物经硅胶柱色谱分离后用高速逆流色谱法（）纯化，然后应用分析，以线性梯度洗脱 成功鉴别出种化合物16。刘影等17以 谱学方法为核心手段，进行了连翘提取物中相关成分 的同步结构分析研究。通过从混合物谱中挖掘相关性的 和 谱数据并实现可视化，简化了复杂混合 物的分离分析过程。、 在有关物质结构鉴定中的应用 同样 系统的高分辨能力还被应用于杂质检查、药物构型研究、生 化药物和微生物代谢物等的研究。等18用 与 结合确定了氟替卡松丙酸盐个已知的 二聚体杂质，杂质存在水平为；等19采用毛细管研究了氨基酸类化合物。现今 出现的（傅立叶红外）（飞行时间质谱） 多重联机系统19将 的分析能力进一步 提高，其增加了检测器的种类，将流动相进行多次分流进入 不同的检测器，产生大量分析数据，应用于样品中主成分或 杂质检查，使分析更加快速准确。、 在药物构型研究中的应用 等20 用 和 在线联合技术进行菠菜和视网膜 中的叶黄素和玉米黄质立体异构体的分离和测定，检测浓度 可精确至毫微克浓度，并充分体现了 的立体区分能 力。21应用联用技术鉴定南 非钩麻（ ）中的脂苷异构体.等21应用该技术成功研究了葡糖苷酸与药物伊 索克酸的种缀合物的位置异构体。【总结】联用的历史及在分析领域的应用历史还 很短，但其具有如下优势22：（） 对化合物进行快速扫描， 提供初步的结构信息；而 进行详细的结构解析，形成 了一种在线复合矩阵分析的模式20；（） 硫酸化、磷酸化、氮 氧化等结合产生的代谢产物需要通过、等多重数 据分析才能得出结构；（） 许多内源性、分析难度较大的代谢 产物也可通过该系统进行检测。目前的技术 原理已经日趋成熟，主要问题已得到基本解决，应用领域已 经非常广泛。另外，从色谱的角度来看，在线富集技术在毛 细管分离上的应用，也会促进 联用技术的发 展。毛细管分离与 和及结合的广 泛应用可能会在药物代谢与结构鉴定方面取得突破，这种发 展势必会大大加速新型药物的研究与开发。【参考文献】1李忠红，沈文斌.HPLC-NMR联用技术及其在药物研究中的应用J.国外医学药学分册，2001，28(1)： 47-50.2Yazen MA，Melinda KS，Chuan C，et al.Influence of Pheno-barbital on Morphine Metabolism and Disposition ： LC-MS/MS Determination of Morphine (M) and Morphine-3-Glucuronide(M3G) in Wistar-Kyoto Rat Serum, Bile，and UrineJ. 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