「TQD质谱操作规程」.doc

国家城市供水水质监测网滨海监测站仪器操作维护规程文件编号 BS/ZY 506第B版 第0次修订标题：Waters TQD液质联仪 共5页 第1页颁布日期 2008年7月7日1 使用条件1.1 环境温度：20-25恒温。1.2 湿度：50-70%。1.3 电源电压为：220V配置稳压电源防止意外停电。2 操作步骤2.1开机 确定MS及其它仪器电源电缆已连接.打开PC电源-打开2777控制电源-打开CM电源-打开BSM电源-打QSM电源-打开Detector电源-打开MS电源-等待5min-打开Masslynx, pumping,等1晚上，开氮气、开高压、准备液相色谱2.2 前期准备要求2.2.1用0.22um的膜过滤缓冲液，所有的缓冲液和超纯水都要新配制，2.2.2超纯水和缓冲液使用不得超过二天。2.2.3缓冲盐一定要是可挥发的，而且浓度不要大于10mM。2.2.4有机相要使用原装进口的色谱纯。2.2.5 测试样品溶于水，并用0.22um的膜过滤。 2.2.6推荐溶剂：QSM online SPE用溶剂如下,体积为4LA: 2%NH4OH in WaterB: 2%Formic acid in WaterC: MeOHD: MeOH:acetone:hexane=1:1:1Seal wash: 10%MeOH in WaterBSM UPLC分析梯度用溶剂,体积为1LA1: 0.5%formic acid in water B1: 0.5%formic acid in ACN/MeOH(9/1)A2: 0.5%NH4OH in waterB2: 0.5%NH4OH in ACN/MeOH(9/1)Seal wash: 10%MeOH in Water 2777自动进样器洗针溶液 Wash1:10%MeOH in Water Wash2: MeOH 注 :以上溶剂可根据实际应用进行更改.2.3 UPLC初始化2.3.1湿灌注BSM泵在质谱控制台上点击左边Binary Solvent Manager ,选择CONTROLPrime A/B solvent ，选择A1/B1或A2/B2 输入时间3min,按start。 2.3.2湿灌注QSM泵 在质谱控制台上点击左边Quaternary Solvent Manager ,选择CONTROLPrime solvents， 选择选择A,B,C,D,时间为时间为3min，按，按start 。2.3.3湿灌注自动进样器用2777操作小键盘执行，选择 F1 Menu （菜单） F2 Clean Syr （清洁注射器）。选择 Wash1 或 Wash2，然后按 Enter。选择注射器的灌注输送次数（建议5次以上）按Enter。2.4建立新的项目2.4.1从Masslynx主窗口选择FileProject Wizard yes 输入ProjectName,以及项目所在的目录(建议在C盘下) Next选择使用一个已经存在的项目作为模板来创建新项目 ，点击 “browse”，选择Online SPE System Installation T点击 “Finish” 。2.5准备质谱2.5.1点击MS Tune，打开氮气，待分析器仪表和碰撞器仪表显示1.3e-5，打开高压（红色表示高压已关，绿色表示高压已开）。2.5.2点击 ES+ Source. 输入以下各参数 : Capi ary (kV): 3 Cone (V): 30 Source Temp (C): 140 Desolvation Temp (C): 380 Desolvation (L/hr): 800 Cone (L/Hr): 50 以下参数最好直接使用以下参数最好直接使用inteinte istart istart 自动校正仪器质量数时自动生的参数自动校正仪器质量数时自动生的参数 LM Resolution 1: 15 HM Resolution 1: 15 Ion Energy 1: 0.5 Entrance: 50 Co ision: 2 Exit: 50 LM Resolution 2: 15 HM Resolution 2: 15 Ion Energy 2: 0.5点击FileSave As,输入文件名,把此调谐文件保存。2.6 ESI调谐2.6.1把调谐液放入B号位(注 :浓度在0.2-0.5ppm之间，根据实际的灵敏度调整样品浓度)2.6.2点击Tune界面下的Fluidics，选择flowe State（直接进样、混合进样、液相进样、废液）。调谐ESI参数。2.6.3调出目标化合物的最佳调出目标化合物的最佳MRM质谱参数点击Mass Console质谱控制台Intellstart选择选择Sample Tune and Develop Method点击开始，输入化合物的名称、输入化合物的分子式或分子量、调用现有的调谐方法（选择想调用的调谐方法）、选择自动调谐MRM方法、每个化合物调谐几个子离子（一般选2 ）、 选择标样所放的位置、选择进样方式（一般选combined ）点击,质谱开始自动调谐，自动生成的仪器MRM的方法保存在当前project 内。2.7建立质谱的MRM方法点击新建质谱方法点击 按调谐结果输入下列参数：离子模式、化合物名称化合物名称 、子离子质量数子离子质量数、锥孔电压锥孔电压 、Auto Dwell、母离子质量数母离子质量数 、离子驻留时间、碰撞能、MRM的运行时间，通用性OA-SPE方法为11minFileSave as保存质谱方法。2.8建立液相方法点击inlet method，编辑BSM梯度表，点击Quaternary Solvent Manager，编辑on line SPE溶剂处理程序（如从右边进样口直接进样做LC-MS分析，QSM梯度表只留第一行，流速设为0），点击Autosampler出现2777自动进样器方法编辑窗口(Injection=3代表，共取三次样进样分析。如进样体积15m ，此处injection=3,同时进样列表inject volume=5000mL) FileSave as保存液相方法。2.9 建立样品序列表,运行采集数据。File点击新建序列表 输入文件名,注释,质谱方法,液相方法,瓶号（Bottle为1:1到1:18,标配VT18-20盘，可装18个20m 进样小瓶)，Inject volume不可大于5000,进样体积 ，点击运行保存样品序列OK。2.10 处理数据在masslynx主画面上点击short cut Target Lynx2.10.1在样品表中输入样品类型和浓度 Sample Type Concentration A (B, C, D.)2.10.2设正确的积分参数创建定量方法 首先点黑想看的数据,再点击Chromatogram打开谱图点击调用离子通道点击 选取左边的Target Lynx选取Edit Method点击新建一个处理方法添加添加化合物输入化合无名称。所有的参数化合物参数 (不需要填写，打开色谱图，右键拖拉被检测化合物的色谱峰)校正曲线参数(line fitting)积分参数 (e.g. smoothing, peak detect) 2.10.3 处理样品方法建立好,就可以处理样品在样品表中选取所要处理的样品进行处理点击 TargetLynx 然后选择 Process Samples点击OK后出现TargetLynx浏览器检查结果。Slide Show按样品查看按化合物查看2.11打印报告2.11.1编辑报告:FileReport Format报告模版选择需要的模版。2.11.2打印预览:FilePrint Preview。2.11.3保存报告:FileSave As。2.12 关机清洗色谱柱、仪器系统，停流速，关高压，关氮气，venting泻真空, 退出软件，关电脑，关仪器, MS断开电源电缆. 3 注意事项3.1 气体3.1.1液氮：使用液氮罐作为气源，MS使用前打开增压阀使用前打开增压阀（绿色）和出口阀 ，减压阀表压力为0.7MPa。不使用MS时，关闭增压阀，长期不用要关闭出气阀，液位指示表读数低时及时补充液氮。 3.1.2氩气：氩气减压阀压力为0.05MPa。3.2 开高压之前一定要先开氮气，关氮气之前一定要先关高压。3.3定期清洗样品锥孔定期清洗样品锥孔：关闭隔断阀，取下样品锥孔，先用甲醇：水：甲酸 （45 ：45：10）的溶液超声清洗20分钟，然后在分别用超纯水和甲醇各溶液超声清洗10分钟，待晾干后再安装到仪器上。当灵敏度下降时，需要清洗Ion Block、二级锥孔和RF lens 。3.4定期（每星期）检查机械泵的油的状态，如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，要及时更换机械泵油。 4 运行中的检查4.1 在设备的两次检定之间，至少进行一次期间核查；当设备受到外力的冲击（或震动）、移动或发生不正常操作时，应及时进行期间核查，检查结果在期间核查记录中记录。根据期间核查结果决定仪器是否继续使用。4.2 仪器运行中适时监测。在检测试样，每10个试样带1个标点，标点的相对误差不超过30%认为检测数据有效，否则重新绘制标准曲线。标点的结果和试样编号在大型仪器运行记录中记录。4.3 及时填写齐全当日大型仪器运行记录。5 维护与保养5.1 溶剂和流动相的要求溶剂和流动相的要求 所有的流动相都要使用0.22um的滤膜过滤，水相要