如何有效选择高效液相色谱柱.ppt

HowtoSelectionYourHPLCColumnsforFastMethodDevelopment如何有效选择高效液相色谱柱 程小卫ProductMarketingSpecialist VarianInc ChinaServiceLine 8008205999OfficeTel 02133184918Ext 333CellPhone请问您 请问您 是不是为您的色谱柱寿命短而感到烦恼 是否为您的化合物保留弱而一愁莫展 是否正在苦苦寻觅分离高极性化合物的色谱柱 是否在为位置异构体的分离苦思冥想 是否因为碱性化合物的拖尾而不知所措 是否需求高分辨快速分析的LC MS色谱柱 是否面临硅胶基质色谱柱分离生物样品易污染 pH范围窄不能再生 寿命短的难题 有人助您成功 提供您尖端的产品 做您忠实的朋友 她的名字叫做 VarianHPLCSilicaBasePhases Pursuit XRs100 烷基 苯基修饰固定相 C18 C8 DP Silica Pursuit 200 烷基 苯基修饰固定相 C18 C8 DP PFP Polaris 200 极性基团修饰固定相 C18 A C18 ether C8 A C8 ether Amide C18 Amino Si A PLRP S 刚性球形聚合物固定相 100 300 1000 4000 VarianHPLCColumns Pursuit XRs独特的分离度 超高的柱寿命 高的制备上载量 PursuitXRsFeatures Varian新产品线100 高纯硅胶基质极高的比表面积 460m2 g 异常的梯度耐受性极宽的选择性高含碳量 PursuitXRsC18 25 carbon pH耐受范围宽 1 5to10 0提供3 5和10 m粒径键合相 C18 C8 andDiphenyl各种尺寸规格 Advantage BenefitsofPursuitXRs PursuitXRsHPLCcolumnsAdvantages 极高分离度极高重现性杰出的柱寿命 BenefitsPursuitXRsColumns 更快的方法开发对复杂样品的杰出分离度宽pH值耐受性优秀的柱寿命选择范围宽有能力分离位置异构体提高QA QC方法可靠性相对其他品牌色谱柱 更多进样次数 ExcellentpHStability PursuitXRsC18和C8色谱柱能够在宽广的pH 1 5 10 范围下运行1 440多小时无变化 Pursuit XRs超长柱寿命 Pursuit XRs超长的柱寿命和极佳的重现性 Injection 1 Injection 5 000 PursuitXRs色谱柱能够在5 000次以上的进样后仍最小的柱效损失 最小的反压上升和最小的保留时间变化 Pursuit XRs极高的分辨率 与其它品牌的色谱柱相比 PursuitXRs C18对三环类抗抑郁剂 TCA 14种化合物实现了完全基线分离 PursuitXRsC18 LunaC18 Pursuit XRs极高的分辨率 InertsilODS 3 GeminiC18 Pursuit XRs极高的分辨率 XBridgeC18 SunFireC18 ComparisonofPhenylPhasesAntifungalsmix PursuitXRsDP InertsilPhenyl 3 LunaPhenylHexyl PursuitDP DP色谱柱具有独特的 选择性 相对其他品牌柱更佳的分离度和峰形 Pursuit 快速分析with杰出的分离度 Pursuit Features 比表面积 230m2 g孔径 200 孔容 1 1mL g硅胶纯度 99 999 粒径 3 5 10 m载碳量 C18 14 C ASTMD5291 C8 10 C ASTMD5291 DP 10 C ASTMD5291 PFP 10 C ASTMD5291 键合相覆盖率 4 05 mole m2宽pH范围 1 5 10 0 机械强度 DAC模式 最大装柱压力达到50bar 725psi DiphenylpHrangeis1 5to7 5 Pursuit AdvantageandBenefits Pursuit HPLCColumnAdvantage 快速分离 孔径200 vs100 比表面积230vs460m2 g杰出的选择性 很高的相密度 4vs3 M m2 宽pH值耐受性传统和独特的键合相 C18 C8 DP PFP Rapidseparationswithoutstandingselectivityandresolution BenefitsPursuit Columns 节约分析时间和溶剂杰出分离度宽pH值耐受性优秀的柱寿命选择范围宽LC MS分析最佳选择 Pursuit pHStability pH1 5 pH10 0 Gene InsulinatPursuit C18 PursuitC18 CompetitorI300 CompetitorII300 Pursuit柱不同于市场上其它300 孔径的色谱柱 它能在不损失分辨率的前提下 真正实现快速分析 PursuitC18和市场上大孔径柱对胰岛素基因突变体 n merfromn 1mers 的分离 Pursuit 实现快速分析 同时很高的分离度 TCA satPursuitC18withpH9 0 Goodpeakshape baselineresolution fasteranalysis Poorresolution broadpeaks Poorresolution Poorresolution undefinedpeaks Poorresolution tailingpeaks Moderateresolution peaktailing Column ListedonchromatogramDimension 50 x2 0mmIDMobilePhase MeCN 20mMammoniumformate pH9 0 50 50FlowRate 0 25mL minTemperature AmbientDetection UV270nmSample 1 Nordoxepin2 Nortriptyline3 Doxepin4 Imipramine5 Amitriptyline6 Trimipramine L LunaC18 2 X XterraMSC18 S SymmetryC18 Z ZorbaxSB C18 D DiscoveryHSC18 Pursuit PFP 五氟苯基 Pursuit PFP 保留基于偶极 偶极相互作用对卤代化合物等高极性样品强保留对位置异构体有极高选择性 尤其适用于紫杉醇类化合物在100 水相中稳定 Pursuit PFPseparationpositionalisomers Pursuit PFP对位置异构体的分离 Polaris 独特选择性和分离度 Polaris HPLCColumnFeatures FeaturesofPolaris HPLCColumn200 高纯硅胶基质独特的极性修饰和极性基团植入技术独特的选择性加强极性化合物的保留宽pH值耐受性 pH1 5 10 Polaris ColumnAdvantages Benefits Polaris Advantages Benefits 保留强极性 碱性化合物 且峰形尖锐和对称在高水相中稳定与普通C18有不同的选择性宽pH值耐受性 pH1 5 10 广泛键合相 C18 A C18 ether C8 A C8 ether Amide C18 Amino Si A Polaris separationbasiccompounds LunaC18 InertsilODS 3 DiscoveryC18 SymmetryC18 A PolarisC18A Polaris对强碱性化合物的分离 峰形尖锐和对称 XterraatpHExtremevs PolarisC18 A Dimensions 150 x4 6mm 5 bothcolumns MobilePhase H2O 0 1 TFA B CH3CN 0 1 TFAGradient 20 60 Bin10minsFlowRate 1 0ml min Temperature AmbientDetection 220nm Dimensions 150 x4 6mm 5 bothcolumns MobilePhase A H2O 0 1 NH4OH pH10 0 25mM B CH3CNA B 45 55FlowRate 1 0ml min Temperature 400C Detection 215nm BlockersPindololMetoprololPropranolol SuperiorpeakshapeandresolutionatlowandhighpHs PLRP S 刚性聚合物色谱柱 生物样品分离分析的最佳选择 ChemicalStructureofPLRP S PLRP S HPLCColumnFeatures PLRP S 刚性聚合物色谱柱特点 PLRP S 刚性聚合填料与硅胶基质的C18 C4的比较反相分离模式 保留基于疏水性及 相互作用 PLRP S HPLCColumnFeatures PLRP S Benefits PLRP s HPLCColumnandMediaBenefits 机械强度高 可以装填DAC柱 pH值1 14 各种酸碱兼容 再生方便 恢复原有柱效和压力 无柱流失 生物样品可逆吸附 易洗脱 寿命长 耐高温 可用于DHPLC孔径和粒径分布广 密度小 有效节约成本 PLRP S proof PLRP S 耐强酸强碱 StandardPeptideSeparation1 Oxytocin2 AngiotensinII3 AngiotensinI4 Insulin 1234 AfterregenerationAfter92injectionsInitialperformance 再生方法 1M氢氧化钠 乙腈洗脱之后 用四氢呋喃 乙腈洗脱 方案 人为进样天然大肠杆菌裂解液 CrudeE Colilysate 至色谱柱污染 比较前后4个标准品的理论塔板数 柱压等参数 PLRP S 再生方便 使用寿命长 PLRP S proof PLRP S填料对多肽的分离峰型尖锐且对称 PLRP S proof SilicaRPComparison SampleSuppliedby MerckBiosciencesAG EluentA 0 1 TFAin5 acetonitrileEluentB 0 1 TFAin50 acetonitrileGradient 0 75 Bin30minFlowRate 1 0ml minDetector UV 220nm 0min30 YMCODS A 100 Vydac218TPC18 300 KromasilC8 100 PLRP S100 100 CrudeSyntheticPeptide 14mer Sample Peptide 2Val Thr Arg Tyr Leu Thr Phe Ser Asn Lys Ser Val Leu Glu acid SampleSuppliedby Novabiochem MerckBiosciencesAG PolymericComparison EluentA 0 1 TFAin5 acetonitrileEluentB 0 1 TFAin50 acetonitrileGradient 0 75 Bin30minFlowRate 1 0ml minDetector UV 220nm 0min30 Source15RPCAmberchromXT20PLRP S300 PLRP S100 SampleSuppliedby Novabiochem MerckBiosciencesAG Sample Peptide 2Val Thr Arg Tyr Leu Thr Phe Ser Asn Lys Ser Val Leu Glu acid CrudeSyntheticPeptide 14mer HPLCColumnSelectionGuidance 分析物主要作用力 Pi Pi 疏水性 Pi Pi 强偶极 PursuitC8 C18 没有偶极 PursuitDP PursuitPFP Complexmixtures higherloadings usePursuitXRs Lowercomplexity LCMS usePursuit Molecules2000DausePursuit Polarisan