仪器分析复习题.doc

1.食品检测技术定义：研究食品工程领域所需分析检测技术。 包括：方法原理 仪器结构 操作要点（条件选择） 应用范围 举例：色谱技术分析抗生素或农药2.化学分析法：以待测物质能够发生特定的化学反应和计量关系为基础，又称经典分析法。如各种滴定分析，重量分析等物理分析法：以待测物质的物理性质或物理化学性质为基础，又称仪器分析法。化学分析与仪器分析方法比较化学分析法仪器分析法检测对象常量（1）、半微量（0.011%）微量、痕量、超痕量、单分子、单原子、单细胞检出限差（x）好（ppm、ppb、ppt）灵敏度低高分析速度慢（手工操作）快（自动化程度高）准确度好（0.2）差（有的方法10）标准不需要需要设备简单便宜（玻璃器皿，天平等）昂贵的仪器仪器分析选择性好3.仪器分析方法分类光学分析法：测量信号为电磁辐射电学分析法：测量信号为物质在溶液中的电化学性质。色谱法：根据两种物质在两相（流动相和固定相）中的分配比的差异进行分离和分析的方法。其它分析方法：如质谱、热重量分析法、放射分析法等4.常用的分析方法经典化学分析：容量分析法；重量分析法现代仪器分析技术：光谱分析法；色谱分析法；电化学分析法其中-色谱分析法包括：高效液相色谱法（HPLC）,气相色谱法（GC），薄层分析法（TLC）5. GLP：药品非临床研究质量管理规范（Good LaboratoryPractice，GLP）用于为申请药品注册而进行的非临床研究，以确保实验资料的真实性、完整性和可靠性。GMP：药品生产质量管理规范（GoodManufacturePractice，GMP）用于药品制剂生产的全过程、原料药生产中影响成品质量的关键工序，是药品生产和质量管理的基本准则。GSP: 药品经营质量管理规范（Good SupplyPractice，GSP）保证医药商品进、存、销环节的药品质量。GCP: 药品临床试验管理规范（Good ClinicalPractice，GCP）是临床试验全过程的标准规范，包括方案设计、组织实施、监督稽查、记录分析和总结报告等，以确保临床试验结果可靠，保护受试者的权益和安全。6.检验工作的基本程序:取样-均匀合理；科学性、真实性、代表性性状-综合反映药品内在质量鉴别-判断药物的真伪，依据化学结构和物理性质检查-判断药物的纯度（限度试验）含量测定-测定有效成分的含量写出报告7.分析方法验证：目的：为保证分析结果准确可靠，用特征参数对分析方法的科学性、准确性和可行性进行验证，充分表明分析方法符合测试项目的要求。验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。8.色谱分析法的分类：1. 按流动相的物态气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法2. 按固定相使用的物态气-固色谱法；气-液色谱法；固液色谱法；液液色谱法9.气相色谱（GC）流程图： 载气系统=进样系统=色谱柱和柱箱=检测系统=记录及数据处理液相色谱（LC）流程图： 高压泵=梯度洗提=进样装置=色谱柱=检测器=记录及数据处理10.色谱法原理：利用混合物各组分在性质和结构上的差异，导致各组分在互不相溶的固定相和流动相之间的分配速率不同而达到分离的效果。色谱法的特点：集富集、分离和检测于一体的高自动化、高选择性和高灵敏度的分析方法。11.色谱法的流出曲线及有关术语基线：当色谱柱中仅有流动相通过时，检测器响应讯号的记录值稳定的基线应该是一条水平直线。峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离h保留值：表示试样中各组分在色谱柱中的滞留时间的数值，通常用时间或用将组分带出色谱柱所需载气的体积表示。A死时间tM不在固定相中分配的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间为死时间；B保留时间tR试样（某一组分）从进样开始到柱后出现峰极大点时所经历的时间为试样中某一组分的保留时间；C调整保留时间：tR = tR tM ；对应于组分在固定相中停留的总时间D死体积、保留体积、调整保留体积 E、相对保留值-定性分析 它与流动相的流速和色谱柱的物理指标无关；仅与柱温和固定相的性质有关F分配比（容量因子）k区域宽度：组分在色谱柱中谱带扩展的函数，反映了色谱操作条件的动力学因素A标准偏差:即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半B.半峰宽度C.峰底宽度12.色谱峰所能提供的重要信息1 样品中所含组分的最少个数2 保留值-定性分析3 色谱峰面积（或峰高）-定量分析4 色谱峰的保留值和区域宽度-评价色谱柱的分离效能5 根据相邻色谱峰之间的距离来选择合适的色谱分离条件13.塔板理论：影响色谱塔板高度的因素；如何解释在不同流速下,同一个色谱柱具有不同的塔板高度；速率理论： 公式及各项含义；分离度： 从分离度的公式分析如何提高色谱峰的分离度；一般地，R=1时，相邻的两组分能实现“很好”的分离，此时两色谱峰之间的距离为4s，重叠部分2%；R=1.5时，相邻的两组分能实现“基线”的分离，重叠部分小于1%14.定性分析与定量分析：A 定性分析：响应信号的测量-色谱峰高；色谱峰面积；定量校正因子绝对校正因子；相对校正因子；相对响应值（灵敏度）；B 定量分析方法：内标法 外标法 归一化法15.系统适用性试验：ChP 每次检测前，应对仪器进适用性试验，应达到规定要求：理论板数（n）分离度（R）重复性（RSD）拖尾因子（T）16.检测器类型：A浓度型检测器：测量的是载气中通过检测器组分浓度瞬间的变化，检测信号值与组分的浓度成正比。热导检测器；B质量型检测器：测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测信号值与单位时间内进入检测器组分的质量成正比。FID；C广普型检测器：对所有物质有响应，热导检测器；D专属型检测器：对特定物质有高灵敏响应，电子俘获检测器；17.检测器：通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成；广谱型对所有物质均有响应；专属型对特定物质有高灵敏响应；常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器；、18.检测器性能评价指标：（1） 响应值（或灵敏度）S：S 表示单位质量的物质通过检测器时，产生的响应信号的大小。S值越大，检测器（也即色谱仪）的灵敏度也就越高。（2） 最低检测限（最小检测量）：A噪声水平决定着能被检测到的浓度（或质量）；B检测器响应值为3倍噪声水平时的试样浓度（或质量），被定义为最低检测限（或该物质的最小检测量）。19.温度控制系统：气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制温度；气化室：保证液体试样瞬间气化；检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；分离室：准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离；20.氢火焰离子化检测器（FID）特点：(1) 典型的质量型检测器;(2) 对有机化合物具有很高的灵敏度;(3) 无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应;(4) 氢焰检测器具有结构简单、稳定性好、灵敏度高、响应迅速等特点;(5) 比热导检测器的灵敏度高出近3个数量级，检测下限可达10E-12gg-1。21.氢焰检测器的结构：(1) 在发射极和收集极之间加有一定的直流电压（100300V）构成一个外加电场。(2) 氢焰检测器需要用到三种气体：N2 ：载气携带试样组分；H2 ：为燃气；空气：助燃气。使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。22.氢焰检测器的原理：(1)当含有机物CnHm的载气由喷嘴喷出进入火焰时，在C层发生裂解反应产生自由基：CnHm CH(2)产生的自由基在D层火焰中与外面扩散进来的激发态原子氧或分子氧发生如下反应： CH +O CHO+ + e(3)生成的正离子CHO+ 与火焰中大量水分子碰撞而发生分子离子反应：CHO+ + H2O H3O+ + CO(4)化学电离产生的正离子和电子在外加恒定直流电场的作用下分别向两极定向运动而产生微电流（约10-610-14A）；(5) 在一定范围内，微电流的大小与进入离子室的被测组分质量成正比，所以氢焰检测器是质量型检测器。(6) 组分在氢焰中的电离效率很低，大约五万分之一的碳原子被电离。(7)离子电流信号输出到记录仪，得到峰面积与组分质量成正比的色谱流出曲线23.影响氢焰检测器灵敏度的因素：各种气体流速和配比的选择N2流速的选择主要考虑分离效能，N2 : H2 = 1 : 11 : 1.5氢气: 空气=1 : 10。极化电压正常极化电压选择在100300V范围内24.三种不同形式液相色谱的特征特性经典LCTLC/PCHPLCHPLC优势进样人工加样点样进样器准确溶液流动重力表面张力高压泵快速分离重现性好检测和定量收集馏分检测显色连续检测高灵敏度自动化实验结果棒式图斑点色谱图三高一快25.HPLC与GC区别A 分析对象及范围：GC分析只限于气体和低沸点的稳定化合物，而这些物质只点有机物总数的20%；HPLC可以分析高沸点、高分子量的稳定或不稳定化合物，这类物质占有机物总数的80%；B 流动相的选择：GC采用的流动相中为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小；HPLC采用的流动相为液体或各种液体的混合，可供选择的机会多。它除了起运载作用外，还可与组分作用，并与固定相对组分的作用产生竞争，即流动相对分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离；26.高效液相色谱仪结构：流动相高压泵进样器色谱柱 检测器积分仪27.流动相预处理：过滤和脱气目的： 防止溶液中固体颗粒进入管路（管道、泵）； 去O2和CO2 。 样品过滤和脱气： 气泡存在于管路，存在于检测器；氧化样品。 脱气方法：He，加热，真空，超声波，在线脱气机28梯度淋洗装置：A外梯度:利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。B内梯度:一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。29HLPC从塔板理论分析如何提高柱效：A涡流扩散、纵向扩散和流动相传质逐利均与dp有关，小的dp有利于提高柱效。B高效固定相的重要特征是颗粒细小。C固定相传质阻力与df有关，减少df有利于提高柱效。D键合相色谱有效降低df，柱效进一步提高。30.色谱检测器的分类：理想的检测器应该是灵敏度高、线性范围大、对所有待测组分相同响应。一般检测器分为； 热学、光学、电学、电化学检测器 总体性质检测器：热导、示差折射；电导溶质性质检测器：氢焰、紫外、荧光； 通用检测器与选择型检测器 浓度型检测器和质量型检测器31.样品前处理分析检测的基本流程：取样预处理分析测试（鉴别、检查、含量测定）-数据处理和结果报告为什么要进行样品预处理？浓度太低-有些被测组分在食品中含量极低，低于仪器检测范围，需进行浓缩才能准确测定；样品太脏-样品的成分很复杂，会给测定带来干扰（色谱共流出）；太“危险”- 污染物可能成为“色谱柱杀手”样品呈溶液状态，调节样品的酸碱度，离子强度和浓度，保护仪器。31.样品预处理的总体原则：消除干扰因素，选择性的将目标化合物从基质中分离出来；完整保留被测组份，目标化合物保持原有特征，而不是变性或者破坏；使被测组份浓缩。重现性（回收率），速度，方法简单，成本低。预处理方法：溶剂萃取；蒸馏；31.固体样品分析过程：匀浆-提取-萃取-浓缩-净化-分析32.固相萃取：利用固体吸附剂将液体样品中目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，再用洗脱液解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。33.固相萃取的一般步骤：活化上样淋洗洗脱氮气吹干两种使用方式：被测物吸附模式；基质吸附模式；34.能自发地将物质的化学能直接转变成电能的装置原电池。能将电能直接转变为物质的化学能的装置电解池。35.电化学分析法的特点1分析速度快 2. 灵敏度高 3.选择性好 4.所需试样的量较少，适用于进行微量操作 5. 易于自动控制6.电化学分析法还可用于各种化学平衡常数的测定以及化学反应机理的研究。 36.直接电位法直接电位法应用最多的是pH的电位法测定和用离子选择性电极测定离子活度37.工作电池是由两支性能不同的电极插入同一试液中构成的。一支电极的电位随待测离子的活度变化而变化，称为指示电极；另一支电极的电位则不受试液组成变化的影响，具有恒定的数值，称为参比电极。38.pH的定义及测定基本原理39.测量装置:测定溶液的pH采用玻璃电极作指示电极，甘汞电极作参比电极，与待测溶液组成工作电池40.pH计的使用1. 仪器的定位与校正（1）测量前检查仪器、电极、标准缓冲液是否正常。（2）选用标准缓冲溶液：根据待测样品的pH值范围，在其两端选用两种pH标准缓冲溶液（标准缓冲溶液可自配或购买pH基准试剂）（3）仪器定位与校正： 将电极浸入第一种标准缓冲溶液中，调节“温度”旋钮，使之与被测溶液温度一致。然后调“定位”钮，使pH读数与已知pH值一致。校正后切勿再动“定位”钮 将电极取出，洗净、吸干，再浸入第二种标准缓冲溶液中，测定pH值， pH值之差应小于0.1。测量（1）准备操作：更换标准缓冲液或样品时，应用蒸馏水充分淋洗电极，用滤纸吸去电极上的水滴，再用待测溶液淋洗，以消除相互影响。这一点对缓冲能力较弱的溶液尤为重要。（2）测量pH时，溶液应适度搅拌，以使溶液均匀和达到电化学平衡，静置片刻后再读取数据。（3）测量时，甘汞电极内的KCl溶液液面应高于被测溶液的液面，以防止被测溶液向甘汞电极内扩散。41.玻璃电极特点：v 对H+有高度选择性的指示电极，使用范围广，不受氧化剂还原剂影响，适用于有色、浑浊或胶态溶液的 pH 测定；响应快(达到平衡快)、不沾污试液。v 膜太薄，易破损，且不能用于含F- 的溶液；电极阻抗高，须配用高阻抗的测量仪表。v 存在酸差和碱差（或钠差）42.碱差（钠差）n 定义：普通玻璃电极的适应范围为1-10，当用玻璃电极测定pH10的溶液或钠离子浓度较高的溶液时，测量值与实际值相比偏低，这种现象称为碱差（或钠差）。n 产生原因：在强碱性溶液溶液中，H+的活度低，Na活度高，Na重新进入玻璃膜的硅氧网格，并占据少数交换点位，导致测量到的H活度偏大，pH值偏低。酸差n 定义：当用玻璃电极测定pH1的强酸性溶液时，测量值比实际值偏高，这种现象称为酸差。n 产生原因：在强酸性溶液溶液中，H+的浓度很高，相对而言，H2O的活度降低，H靠H3O传递，达到电极表面的H减少，pH值增大。43.电位滴定的终点确定方法 E（电动势读数）-V（加入的滴定剂的体积）曲线法 E-V曲线法 如果E-曲线比较平坦，突跃不明显，则可绘制一级微商曲线，即E-V曲线。E表示随滴定剂体积变化的电位变化值。44.玻璃膜的响应机理由纯二氧化硅组成的石英玻璃对H+没有响应，在二氧化硅中加入少量Na2O后，部分硅氧键断裂，形成待负电荷的硅氧结构，并与待正电荷的Na结合，形成类似硅酸钠分子的结构。在玻璃膜内，Na+活动性较强，当玻璃电极浸泡在水中，溶液中的氢离子可进入网格，并与钠离子交换而取代钠离子的位置（交换点位)，与SiO结构键和，交换反应为（类似于硅酸钠的水解反应）:H(aq)NaGl- (M) Na+ (aq) + H+Gl- (M)此反应的平衡常数很大，由于氢离子取代了钠离子的点位，玻璃膜表面形成了一个类似硅酸结构（H+Gl-）的水化胶层。45.晶体膜电极的响应机理（1)晶体膜内的缺陷空穴：LaF3 空穴 LaF2F；与玻璃膜不同，不是离子交换，而是离子的迁移！注意：（i）在氟化镧晶体中，La3固定不动，可移动的是F，故氟化镧晶体膜只对F有选择性响应。（ii）晶体膜中缺陷空穴的大小，形状，电荷的分布只能容纳特定的可移动的晶格离子，其它离子不能通过空穴。46.影响测定的因素（1）温度：保持温度恒定。（2）电动势的测量：要求测量仪器灵敏度、准确度高。（3）干扰离子：加入掩蔽剂（4）溶液的pH：必要时使用缓冲剂（5）待测离子的浓度：10-110-6 molL-1 （6）电位平衡时间：速率、浓度、膜厚度等47.原子吸收光谱法它是基于物质所产生的原子蒸气对特征谱线的吸收作用来进行定量分析的一种方法；48.分析过程 目标：测定试液中的镁离子的含量。 过程： 先将试液喷射成雾状进入燃烧火焰中，含镁盐的雾滴在火焰温度下，挥发并解离，生成镁原子的蒸气。 再用镁空心阴极灯作为光源，辐射出镁的特征谱线的光，这束光透过一定厚度的镁蒸气时，部分光被镁蒸气吸收。 通过单色器和检测器检测这束光被削弱的程度，即可求出镁的含量。49.优势 专一性：空心阴极灯只发出所需要的特征波长的辐射线，不发射邻近波长的辐射线，因此干扰小。 高灵敏度：原子吸收过程中，所测定的是大部分的原子。50.基本原理1.共振线与吸收线 1.原子在两个能态之间的跃迁伴随着能量的吸收和发射。 2.原子可具有多种能级状态。原子受外界能量激发时，可跃迁到不同能级，因此具有不同激发态。 3.原子由基态第一激发态的跃迁,最易发生。原子的外层电子从基态跃迁到能量最低的激发态时要吸收一定频率的光，当它再跃迁回基态时，则发射出同样频率的光（谱线），这种谱线称为共振吸收线。 每种原子的核外电子能级分布不同，当产生由基态第一激发态的跃迁时，吸收特定频率的辐射能量。 原子吸收光谱是线状光谱。51.特点 共振线是元素的特征谱线。 各种元素的原子结构和外层电子排布不同，不同元素的原子从基态激发至第一激发态时，吸收的能量不同，因此各种元素的共振线不同。 共振线是元素的灵敏线。 从基态到第一激发态间的直接跃迁最容易发生。-原子吸收分析的依据 52.谱线变宽变宽的因素：1.自然宽度 2.多普勒变宽 3.压力变宽 4.自吸变宽 5.场致变宽多普勤宽度和压力变宽(碰撞变宽)是谱线变 宽的主要因素。53.锐线光源：光源发射线的中心频率与吸收线的中心频率一致，而且发射线的半宽度比吸收线的半宽度小得多时，则发射线光源叫做锐线光源。原子吸收的测量： 需测量的是原子的峰值吸收。为了测定K0值，使用的光源必须是锐线光源。 54.为什么原子吸收的测量采用锐线光源而不用连续光源？ 1、锐线光源的能量能被原子充分吸收，测定的灵敏度较高。 2.如果用连续光源，则吸收的光的强度只占入射光强度的极小部分，使测定的灵敏度极差。 55.原子化器：1.原子化器的作用:将样品中的待测组份转化为基态原子的装置。=气态、基态原子蒸气越多，测定的灵敏度、准确度越高。2.原子化器的类型 火焰原子化 石墨炉(电热)原子化 ICP原子化 氢化物原子化 冷原子化火焰原子化器:利用气体燃烧形成的火焰来进行原子化。A. 构造：四部分组成：雾化器，预混合室，燃烧器，火焰雾 化 器：由不锈钢或聚四氟乙烯做成。预混合室： 由不锈钢、聚四氟乙烯等材料做成。燃 烧 器：单缝、双缝和三缝。火焰： B. 化学火焰的基本特性燃气供气速度过大，导致吹灭燃气供气速度不足将会引起回火点火时：先通助燃气，后通燃气，立即点火.熄灭时：先断燃气，待火焰熄灭后，再断助燃气.C. 化学火焰的氧化与还原特性a) 中性火焰：这类火焰，温度高、稳定、干扰小、背景低，适合于许多元素的测定。b) 富燃火焰：还原性火焰，燃烧不完全，温度略低于中性火焰；具有还原性；适合于易形成难解离氧化物的元素测定；干扰较多；背景高。如锡等。c) 贫燃火焰：氧化性火焰；它的温度较低，有较强的氧化性，有利于测定易解离，易电离元素，如碱、碱土金属。56.石墨炉原子化器与火焰原子化器比较有如下优点： 1）原子化效率高，可达到90%以上，而后者只有10%左右。 2）绝对灵敏度高（可达到10-1210-14），试样用量少。适合于低含量 及痕量组分的测定。 3）温度高，在惰性气氛中进行且有还原性C存在，有利于易形成难离解氧化物的元素的离解和原子化。57.原子吸收光谱法的干扰效应及消除方法1. 光谱干扰 2.化学干扰 3.电离干扰 4.物理干扰 5.背景干扰背景干扰产生原因及校正方法：原因-背景干扰也是光谱干扰的一种，主要指火焰吸收、分子吸收与光散射造成光谱背景。 校正方法：1) 用非共振吸收线校正背景用分析线测量原子吸收与背景吸收的总吸光度，因非共振线不产生原子吸收 用它来测量背景吸收的吸光度。两者之差值即为原子吸收的吸光度。2) 用连续光源校正背景：火焰原子化器和石墨炉原子化器都使用。先用锐线光源测定分析线的原子吸收和背景吸收的总和。再用氘灯(紫外光区)、碘钨灯(可见光区)、氙灯(紫外、可见光区)在同一波长测定背景吸收(这时原子吸收可忽略不计)计算两次测定吸光度之差，即为原子吸收光度。58.白光 ：各种单色光按一定比例混合；单色光单色光 （互为补色）59.吸收的本质：光子能量的转移60紫外可见吸收光谱定性的依据：同一种吸光物质，浓度不同时，吸收曲线的形状相同，最大吸收波长不变，只是相应的吸光度大小不同。61. 紫外可见吸收光谱定量的依据：吸光度的大小与其浓度相关，其定量关系符合朗伯比耳定律。朗伯比耳定律a比例常数，称为吸光系数 b液层厚度，单位cmc 浓度。当浓度c以gL-1为单位，液层厚度b以cm为单位时，吸光系数的单位为：Lg-1cm-162.摩尔吸光系数的物理意义表示吸光物质的浓度为1molL-1，液层厚度为1cm时溶液的吸光度它是各种吸光物质对一定波长单色光吸收的特征常数。越大，表示该物质对此波长光的吸收能力越大。63.物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动（价电子运动）； （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动； （3）分子本身绕其重心的转动。64.分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。65.红外光谱 (: 0.75-1000 m)- 振动能级与转动能级跃迁紫外、可见吸收光谱 (: 200-750 nm)- 电子能级跃迁10200 nm:远紫外；200400 nm:近紫外；400750 nm:可见光66.电子跃迁类型：主要有六种类型：1*跃迁引起的吸收谱带电子从轨道到*轨道的跃迁, max值很大。吸收峰随双键共轭程度的增加向长波方向移动。2 *跃迁引起的吸收谱带不饱和键中杂原子上的n电子到*轨道的跃迁。吸收峰在近紫外可见区，值小。3*跃迁引起的吸收谱带饱和键电子的能级跃迁 吸收光谱在远紫外区(或真空紫外区),max 170 nm4 *跃迁引起的吸收谱带含有O、N、S、Cl、Br、I 等杂原子的饱和烃衍生物分子的电子能级跃迁吸收光谱位于远紫外区， max 200 nm5电荷转移引起的吸收谱带（pd跃迁）6配位体场跃迁引起的吸收谱带（dd，ff跃迁）*跃迁与n*跃迁的比较*跃迁机率大，是强吸收带； n *跃迁机率小，是弱吸收带。67.生色团能产生紫外-可见吸收的官能团，是含有非键轨道和分子轨道的电子体系。能引起 * 和*跃迁68.助色团是能使生色团吸收峰向长波方向位移并增强其强度的官能团，是带有非键电子对的基团。含有孤电子对，能与生色团中电子相互作用，使*跃迁能量降低并引起吸收峰位移。69.红移和蓝移 (或紫移)红移：某些有机化合物经取代反应引入某些基团后，吸收峰的波长max向长波方向移动。蓝移(紫移)：吸收峰的波长max向短波方向移动。70.紫外分光光度计的基本构件：光源-单色器-样品室-检测器-显示光源：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在3202500 nm。紫外区：氢、氘灯。发射185400 nm的连续光谱。71.影响紫外、可见吸收光谱的因素 1. 共轭效应的影响 电子共轭体系增大，max红移，max增大。空间阻碍使共轭体系破坏，max蓝移， max 减小。2取代基的影响助色团取代*跃迁吸收带发生红移。72.显色反应在分光光度分析中，利用显色反应把待测组分X 转变为有色化合物，然后再进行测定。使试样中的被测组分与化学试剂作用生成有色化合物的反应叫显色反应。73.影响显示反应的因数：1、显色剂的用量-显色剂用量 ，适当过量。2、溶液酸度-影响显色剂的平衡浓度和颜色；影响被测物质的存在状态影响络合物的组成及颜色；3、温度：有些反应需要加热。有些显色剂或有色配合物在较高温度下易分解褪色。此外温度对光的吸收及颜色深浅也有影响，要求标准溶液和被测溶液在测定过程中温度一致。4、时间：显色反应有快慢，有的有色配合物容易褪色，因此不同的显色反应需放置不同的时间，并在一定的时间范围内进行比色测定。5、溶剂：有机溶剂可降低有色化合物的离解度。合适的表面活性剂可增溶、增敏、增稳。6、共存干扰离子的影响及消除：包括：正干扰（共存离子本身有色or与显色剂反应，在测量条件下有吸收）和负干扰（共存离子引起显色反应不完全） 77.基频峰与泛频峰a）基频峰：分子吸收一定频率红外线，振动能级从基态跃迁至第一振动激发态产生的吸收峰； 基频峰的峰位等于分子的振动频率 基频峰强度大红外主要吸收峰 b）泛频峰：分子的振动能级从基态跃迁至第二振动激发态、第三振动激发态等高能态时所产生的吸收峰；泛频峰强度较弱，难辨认却增加了光谱特征性78.红外光谱产生条件： 分子吸收红外辐射的频率恰等于分子振动频率整数倍 分子在振、转过程中的净偶极矩的变化不为0， 即分子产生红外活性振动，且辐射与分子振动发生能量耦合。79.分子振动的形式：1. 双原子分子只有一种振动形式:两原子的相对伸缩振动2.多原子分子一、 伸缩振动 指键长沿键轴方向发生周期性变化的振动1对称伸缩振动：键长沿键轴方向的运动同时发生2反称伸缩振动：键长沿键轴方向的运动交替发生二、 弯曲振动（变形振动，变角振动）：指键角发生周期性变化、而键长不变的振动1面内弯曲振动 2面外弯曲 3变形振动80.吸收峰数常少于振动自由度数？ 发生了简并即振动频率相同的峰重叠 红外非活性振动81.影响偶极矩大小的因素有1）化学键连有原子电负性的大小 电负性差别， ，峰2）分子