医学课件第四章 尿液标本采集和处理第五章 尿液一般检验ppt课件

复习内容 血液生理 血液标本类型 血液标本的采集方法 常用抗凝剂机制及用途 血涂片的制备与染色 瑞氏染色原理 红细胞的生理特性和功能 红细胞计数 电阻抗原理 库尔特 流式细胞术 红细胞计数意义 血红蛋白组成 氰化高铁血红蛋白测定原理 红细胞形态检查 异常红细胞形态 大小 形状 血红蛋白含量 结构和排列异常 红细胞比容 HCT的主要应用 红细胞平均指数 平均指数用于贫血的形态学分类 网织红细胞计数及临床意义 嗜碱性点彩红细胞计数及意义 红细胞沉降率影响因素及临床意义 白细胞计数 白细胞分类计数 三分类 五分类 及临床意义 中性粒细胞毒性变化 核左移 核右移 异型淋巴细胞 3型 血小板计数临床意义 第四章尿液标本采集和处理 尿液是血液经过肾小球滤过 肾小管和集合管重吸收和排泄所产生的终末代谢产物 可反映机体的代谢状态 并受机体各系统功能状态的影响 尿液的采集简便 无创 因此 尿液检测在临床上常作为常规检测项目之一 尿液检测的临床应用 泌尿系统疾病的诊断和疗效判断 泌尿系统炎症 结石 肿瘤 肾移植排斥等 其他系统疾病的诊断 糖尿病 胰腺炎 黄疸鉴别 MM 溶血等 用药的监护 抗菌药物如庆大 卡那 磺胺药等引起的肾损害 尿液标本采集 一 一般要求 一 患者告知一般患者遵医生要求留尿 1 收集足够尿量 10ml 如收集定时尿 容器够大并加盖 必要时加防腐剂 2 避免阴道分泌物 粪便 表面活性剂等污染 3 如需培养 应清洁外阴后用无菌容器收集中段尿 最好在用抗生素前 二 收集的容器 1 清洁 干燥 一次性使用 有较大开口便于收集 30 50ml尿杯 试管 进行细菌培养时用无菌容器 2 有明显标记 病人信息 晨尿 随机尿 计时尿 特殊试验尿 培养用尿标本 尿液标本种类 三 尿液标本采集种类 根据临床不同的尿液检验目的 正确 合理地采集尿液 才能为临床提供正确 有用的检验结果 3 计时尿 timeurine 餐后尿 一般是收集午餐后2 4h内的尿液 适用于病理性糖尿 蛋白尿或尿胆原的检测 3h尿 一般是收集上午6 9时段内的尿液 适用于尿液有形成分排泄率检查 12h尿 是收集晚8时至次晨8时段内的全部尿液 适用于Addis计数 24h尿 是收集24小时内的全部尿液 适用于检测体内代谢产物以及用于尿浓缩沉渣或结核杆菌检查等 4 特殊试验尿尿三杯试验 一次排尿分三段收集 临床用于尿路及生殖系统疾病定位初步判断 导管尿 中段尿 耻骨上膀胱穿刺尿 采集方法 5 培养用尿标本 对肾或尿路感染患者的尿作病原微生物培养 鉴定以及药物敏感试验 应采集无菌尿液 四 标本保存和处理1 尿标本收集后应及时送检 及时检查 2小时内 否则会影响检测结果 表4 3 2 如不能及时送检 应置冰箱4 保存 6小时 3 防腐剂的应用 抑制细菌生长 甲醛 5ml L 固定细胞 管型甲苯 5ml L 24H尿蛋白 尿肌酐测定浓盐酸 10ml L 24H尿钙 磷 激素代谢产物测定 五 尿液标本采集质量管理规范化管理 SOP文件检验的申请 检验者 临床医护人员患者准备 饮食 用药 活动 局部清洁等标本采集 采集的时间 方法 种类 标识等接受标本 接收的时间 标本状况 签收检验报告 室内质量控制纠正失控 记录和保存检验结果 检验结果保存2年质量控制评估 参加室间质评 第五章尿液一般检验 尿液理学检查尿液化学检查尿液有形成分检验 第一节尿液理学检查 量 味 色 比重 尿量 urinevolume 24小时尿总量参考值 1000 2000ml 24h 成人 约1ml kg 儿童按每公斤体重计排尿量 约为成人的3 4倍 1 检测方法 使用量筒或其他具有刻度的容器 直接测定尿液体积 2 检测方法及评价 直接法 一次测定24h内的尿液总量 准确性较好 但尿液需加防腐剂 否则易变质 呈恶臭味 累计法 分次测定24h内尿液体积 然后计其总量 因多次测定 误差较大 容易漏检 影响尿量准确性 计时法 按时分次测定24h内的尿液体积 计算出每小时尿量 常用于危重患者排尿量的观察 3 质量控制 合格的标准量筒或具有精确刻度的液体容积测量器具 其刻度 精确至1ml 必须清晰可见 便于测定时准确读数 尿液采集必须完全而准确 不可丢失 测定24h尿量时 读数误差不超过20ml 4 临床意义 1 多尿 poliuria 多于2500ml 24h称多尿 见于 摄入过多 内分泌疾病 DM 高SG 尿崩症 低SG 肾脏疾病 慢性肾盂肾炎 急性肾衰多尿期等 精神性多尿 常伴尿频 使用利尿剂 2 少尿或无尿 24小时尿量少于400ml或每小时尿量持续少于17ml称少尿 oliguria 24小时少于100ml称无尿 anuria 原因 肾前性 休克 严重脱水 心力衰竭等肾性 肾小球 肾小管功能损伤肾后性 尿路梗阻 结石 肿瘤 畸形 二 尿液颜色和透明度 尿色 urinecolor 是尿液颜色的简称 尿透明度 是以混浊度 turbidity 表示 尿液混浊程度取决于其含有混悬物质的种类和数量的多少 新鲜尿液呈淡黄色 清晰透明 清晰透明 轻度混浊 雾状 混浊 云雾状 明显混浊 透明度分为 1 检测原理 尿液颜色和透明度 是通过肉眼观察来判断尿液外观理学性状的结果 尿液颜色和透明度 受观察者的主观因素而影响 带有一定的主观性和局限性 2 质量控制 使用统一标准统一不同的操作者判断尿色和透明度的认知能力 使用新鲜尿液新鲜尿液标本有助于准确判断颜色和透明度 防止污染以免产生隐血假阳性 3 临床意义 1 血尿 hematuria 肉眼血尿 超过1ml L尿 淡红色显微镜下血尿 平均大于3个RBC HP见于 肾或泌尿系统结石 肿瘤 外伤 重症肾小球疾病等 也可见于ITP 血友病等 2 血红蛋白尿 hemoglobinuria 和肌红蛋白尿 myoglobinuria 浓茶色 酱油色 见于PNH 输血反应 挤压综合征等 3 脓尿 pyuria 与菌尿 bacteriuria 白色浑浊或云雾状 见于 泌尿系统感染 肾盂肾炎 膀胱炎4 乳糜尿 chyluria 和脂肪尿 lipiduria 白色乳状 乳糜实验阳性 前者见于丝虫病 淋巴回流受阻 后者见于肾病综合征等 5 胆红素尿 bilirubinuria 深黄 含有大量的结合胆红素引起的 震荡后出现泡沫 见于阻塞性黄疸及肝细胞黄疸 6 药物性有色尿 7 结晶尿 尿液中含有高浓度的盐类结晶者 称为结晶尿 尿液可呈灰白色或粉红色混浊外观 尿酸盐 酸性尿液遇冷时 析出淡粉红色结晶混浊或沉淀 磷酸盐和碳酸盐 碱性尿液遇冷时 尿呈淡灰色 白色混浊 草酸盐 结晶尿加15 HCl后 混浊消失 结晶尿类型 乳糜尿 脓尿 菌尿 结晶尿鉴别 混浊 方法 乳糜尿 脓尿 菌尿 结晶尿 镜检 加热 加酸或加碱 蛋白定性 脂肪球 混浊 阳性 白细胞 脓细胞 产生沉淀 混浊 混浊消失 细菌 产生沉淀 混浊 阳性 阳性 盐类结晶 混浊消失 阴性 三 比重 specificgravity SG 尿液在4 时与同体积纯水重量之比 称为尿比重 密 尿比重是尿液中所含溶质浓度的指标 所以尿比重大于水 可相对指示肾脏的浓缩功能 正常情况下尿比重晨尿 1 015 1 025 随机尿 成人1 003 1 035新生儿1 002 1 004 在生理情况下 尿比密与尿液排出的水分 盐类及有机物含量有关 在病理情况下 还受尿蛋白 尿糖 细胞成分及管型等病理成分的影响 氯化钠 25 尿素 25 肌酐 蛋白质的代谢产物 尿液中的含盐量 可溶性的晶体 1 检测方法 化学试带法 精度差 但广泛用作筛选试验 尿比重计法 操作繁 精度差 目前已淘汰 超声波法 易自动化 标准化 但需特殊仪器 称重法 准确性高 但操作繁 易受温度影响 折射计法 参考方法 NCCLS和CCCLS推荐 检测方法 2 质量控制 使用与仪器匹配 合格有效的试带 每天用标准色带进行校准 如尿PH 7 0 测定值应增高0 005 试带法对过高或过低的尿比密不敏感 应进行连续多次测定 化学试带法 折射计法 仪器要用去离子水和已知的标准溶液进行校准 测尿前要按操作时室温进行温度补偿调校 3 临床意义 1 SG增高 见于高热 脱水 糖尿病 急性肾小球肾炎 放射性造影剂也可引起 2 SG降低 见于急性肾小管坏死 慢性肾衰竭少尿期或多尿期 尿崩症等 可粗略判断肾小管的浓缩稀释功能 四 尿渗量 osmolality 尿渗量又称尿渗透量 是指尿液内全部溶质颗粒的总数量 尿渗量能较好地反映肾脏对溶质和水的相对排泄速度 更确切反映肾脏脓缩和稀释功能 因此 是评价肾脏浓缩功能较好的指标 需用特殊仪器进行测定 在临床上可用尿比重粗略代替 渗透量有两种表示方法 质量渗摩尔 Osm kg H2O 和体积渗摩尔 Osm L 正常尿渗量 600 1000mOsm kg H2O 尿渗量 血浆渗量之比为 3 0 4 7 1 五 尿气味 odor 气味是通过鼻子可以闻到的味儿 正常尿液的气味是由肾脏不断产生的酯类和尿内含有挥发酸共同组成 人的嗅觉不能分辨这些有机酸和酯类 新鲜尿液具有特殊微弱的芳香气味 若有 氨味 表明有尿潴留或慢性膀胱炎 粪臭味 要考虑膀胱 直肠瘘 烂苹果的甜味 可能是糖尿病酮症酸中毒 大蒜臭味 可能有机磷农药中毒 第二节尿液化学检查 一般包括尿酸碱度 蛋白 糖 酮体 胆红素 尿胆原 隐血 亚硝酸盐 白细胞酯酶 维生素C等 多采用尿干化学分析仪测定 干化学尿液分析仪一 原理 1 试纸条上的各个模块与尿中的相应成分进行独立的反应而显示不同的颜色 颜色的深浅与尿中的某种成分的含量呈正比关系 2 用一光源照射已吸附尿液并产生化学反应的模块 其发射光被一球面积分析仪接受后再进行一系列处理 对照 参比 计算出结果 干扰本实验的药物 1 奎宁 磺胺嘧啶致pH大于9 易导致尿蛋白假阳性 2 大剂量青霉素480万 5小时 易导致尿蛋白假阴性 3 大剂量的维生素C易导致尿糖 潜血及酮体假阳性 4 吩噻嗪易导致尿胆红素及尿胆元假阳性 5 呋喃坦叮易导致尿白细胞假阳性 因此检查前应停药1 2天或告知检验科有关应用药物情况 特别是内肾科的病人 若遇到无法解释的阳性结果时应停药 一 尿液的酸碱度测定 尿液酸碱度是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一 常称尿液酸度 正常晨尿多偏弱酸性 pH5 5 6 5 平均pH6 0 随机尿pH4 5 8 0 尿可滴定酸度20 40mmol 24h尿 可滴定酸度 相当于尿液酸度总量 真酸度 用氢离子浓度的负对数pH值表示 尿液酸度 1 检测方法 指示剂法 方法简单 变色范围窄 pH6 0 7 6 准确性差 易受干扰 pH试带法 操作简单 变色范围宽 pH5 0 9 0 但易吸潮变质 常用作筛选方法 滴定法 尿液酸度的总量 动态监测 操作繁 电极法 精确度高 但需特殊仪器 操作繁 包括 2 检测原理 指示剂法 indicator 用0 4g L溴麝香草酚蓝溶液滴于尿液中 黄色为酸性尿 蓝色为碱性尿 绿色为中性尿 pH试带法 pH试剂块含有甲基红和溴麝香草酚蓝两种酸碱指示剂 在pH4 5 9 0内 颜色有橙红经黄绿到蓝色变化 滴定法 titration 用0 1mol LNaOH将尿液标本滴定至pH7 4时 根据NaOH消耗量求得尿液可滴定酸度 pH计法 用pH电极直接精确地测定尿液的pH值 3 质量控制 标本必须新鲜否则造成pH增高或减低 指示剂法 指示剂的解离状态不同所呈现的颜色不同 pH试带法 变化范围宽 定期检查试带灵敏度 滴定法 氢氧化钠浓度必须标准 定期重配 pH计法 定期校准pH计 确保仪器状态良好 4 临床意义 生理性 尿液pH易受食物影响 肉类 水果 进餐后尿pH增高 一过性增高 碱潮 生理活动及药物等的影响 病理性 尿pH减低 酸中毒 低血钾性碱中毒 尿pH增高 碱中毒 肾小管性酸中毒 药物 包括 二 尿液蛋白质检查 正常 0 80mg 24小时尿 定性实验是阴性 各种原因造成尿液内蛋白质超过150mg 24h或100mg L 蛋白定性试验呈阳性者 称为蛋白尿 proteinuria PRO 检验蛋白尿的重要性在于 蛋白尿主要反映肾小球或肾小管损害 持续性蛋白尿是肾脏病的重要指征 肾小球性蛋白尿 glomerularproteinuria 肾小管性蛋白尿 tubularproteinuria 混合性蛋白尿 mixedproteinuria 溢出性蛋白尿 overflowproteinuria 组织性蛋白尿 histicproteinuria 生理性蛋白尿 physiologicalproteinuria 偶然性 假性 蛋白尿 accidentalproteinuria 尿蛋白分类 尿常规方法不能区分 1 检测方法 试带法 对清蛋白敏感性高 0 07g L 球蛋白敏感性差 本周蛋白不敏感 测定迅速 简便 易于标准化 宜作筛选试验 加热乙酸法 对清蛋白和球蛋白都敏感 但敏感性低 0 15g L 特异性强 干扰少 宜作鉴别试验 磺基水杨酸法 对清蛋白 球蛋白 糖蛋白和本周蛋白的敏感性高 0 05 0 1g L 操作简便 反应灵敏 结果显示快 宜作确证试验 定性试验 2 检测原理 试带法 pH指示剂的蛋白误差 proteinerror 各种指示剂都有一定的pH变化范围 在一定的pH缓冲液中颜色比较稳定 当尿液中含有蛋白质时 由于蛋白质离子对指示剂 如四溴酚蓝 离子相反电荷的吸引而生成复合物 引起指示剂的进一步电离 超越了缓冲作用 指示剂发生颜色改变 加热乙酸法 加热煮沸使蛋白变性 凝固 本周蛋白则溶解 然后加酸使尿液pH接近尿蛋白等电点 pH4 7 时 有利于变性蛋白沉淀 在含有适量无机盐存在的条件下 蛋白质更易于凝固沉淀 而无机盐结晶溶解消失 磺基水杨酸法 SSA 在略低于蛋白质等电点的酸性环境中 尿蛋白的氨基带正电荷 能与带负电荷的磺基水杨酸根结合 形成不溶性蛋白盐而沉淀 3 质量控制 试带法 必须使用标准 合格的试带 操作规范 加热乙酸法 控制加酸量及盐类浓度 磺基水杨酸法 注意鉴别假阳性反应 煮沸 两种检测方法互相对照 4 临床意义 尿液蛋白尿检查 除了主要用于肾脏疾病的诊断 治疗观察 预后监测之外 还用于全身性疾病及其他疾病的筛选试验 生理性蛋白尿 轻度 病理性蛋白尿 蛋白尿包括 生理性蛋白尿 尿蛋白定性 定量 0 5g 24h 功能性蛋白尿 直立性蛋白尿 偶然性蛋白尿 老年性蛋白尿 妊娠性蛋白尿 生理性蛋白尿包括 肾性蛋白尿 肾前性蛋白尿 浆细胞病 血管内溶血性疾病 大面积肌肉损伤 酶类增高 肾小球性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 肾后性蛋白尿 泌尿 生殖系炎症反应 泌尿系结石 肿瘤等 泌尿系邻近器官疾病刺激 病理性蛋白尿 尿蛋白电泳 按分子量大小排列 1 非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链2 肾小管性蛋白尿3 生理性蛋白尿4 混合性蛋白尿5 部分选择性肾小球性蛋白尿 三 尿糖检查 生理情况下 肾小球滤过液的葡萄糖浓度几乎与血浆相同 但当滤液流经肾小管近曲小管时 葡萄糖可全部被重吸收回到血液中 因此 正常人尿液几乎不含或仅含微量葡萄糖 临床上 把尿液中开始出现葡萄糖时的血糖浓度 称为肾糖阈 尿液内尿糖定性试验呈阳性者 称为糖尿 糖尿一般是指葡萄糖 glucose Glu 尿 葡萄糖是尿糖的主要成分 偶尔可见乳糖 半乳糖 果糖 戊糖等 1 检测方法 班氏法 方法简便 特异性差 干扰因素多 试带法 简便快速 特异性高 灵敏度高 薄层层析法 操作复杂 费时 成本高 包括 2 检测原理 班氏法 具有还原剂性质的糖类在热碱性溶液中能将Cu2 还原成Cu 形成黄色的CuOH沉淀和红色的Cu2O沉淀 试带法 采用葡萄糖氧化酶法 GOD 葡萄糖在GOD的作用下 生成葡萄糖酸和H2O2 H2O2在过氧化物酶催化下氧化色素原而呈现颜色变化 3 临床意义 尿糖检查 主要是作为糖尿病诊断 病情判断 治疗效果观察及预后监测的重要指标之一 尿糖检查时 应同时检测血糖 以提高诊断准确性 尿糖可分为血糖正常性糖尿 肾性糖尿 血糖增高性糖尿和其他糖尿三种形式 糖尿病是由于胰岛素分泌量绝对或相对不足 使体内各组织对葡萄糖的利用率减低 葡萄糖在血液内浓度过高 从尿中排出 摄入性糖尿 输入增多或输入性增多 应激性糖尿 暂时性或一过性糖尿 代谢性糖尿 糖尿病等 内分泌性糖尿 甲状腺功能亢进等 血糖增高性糖尿 血液中除了葡萄糖外 其他糖类有 乳糖 半乳糖 果糖 戊糖 蔗糖等 这些糖经肾滤过后 也是通过肾小管重吸收 在尿液中含量极微 如果进食过多或受遗传因素影响 体内代谢失调后 可使血液中浓度增高 易出现相应的糖尿 乳糖尿 妊娠或哺乳期妇女 半乳糖尿 先天性半乳糖血症 果糖尿 原发性果糖尿 果糖不耐受症 其他糖尿 四 尿酮体 ketonebodies KET 羟丁酸 乙酰乙酸 丙酮方法 试带法 与乙酰乙酸 丙酮起显色反应 正常阴性临床意义 糖尿病性酮尿 酮症酸中毒非糖尿病性酮尿 高热 饥饿 严重呕吐 腹泻 妊娠反应等 五 尿胆红素 bilirubin BIL 及尿胆元 urobilinogen URO 尿胆红素是血液中直接胆红素增高 超过肾阈值后从尿中排出 尿胆元是直接胆红素经肠道分解后产物 重吸收入血再经尿液排出 试带法测定尿胆红素 BIL 正常阴性尿胆元 URO 正常阴性 弱阳性 临床用于黄疸的鉴别诊断 六 尿隐血 BLD 尿血红蛋白 试带法检测的尿隐血是指尿液中红细胞或 和 红细胞变形裂解后溢出的血红蛋白 因此尿BLD阳性包括血尿和血红蛋白尿 BLD报告的阳性程度往往高于显微镜检查的红细胞数 正常为阴性 试带法检测原理 利用血红素的过氧化酶活性 催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色 临床意义 各种原因的血尿血管内溶血所致的血红蛋白尿 肌红蛋白尿也阳性 七 尿亚硝酸盐 nitrite NIT 尿亚硝酸盐主要来自尿液中细菌对尿硝酸盐的还原反应 是提示菌尿的指标 八 尿白细胞 WBC leucocyte LEU 白细胞酯酶 试带法检测尿白细胞是检测粒细胞的酯酶活性 主要用于泌尿系感染的诊断 正常阴性 阳性时结合镜检 九 尿维生素C主要用于判断试带法结果的准确性 当尿维生素C强阳性时 尿隐血 胆红素 亚硝酸盐 葡萄糖可能出现假阴性结果 十一 其他化学成分 一 人绒毛膜促性腺激素 hCG 是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素 HCG存在于孕妇的血液 尿液 羊水及初乳中 尿液HCG浓度略低于血液浓度 且呈平行关系 正常情况下 尿HCG定性试验 阴性 半定量试验 2ng L 妊娠期血清hCG水平 1 2 检测方法 包括 单克隆抗体胶体金试验 在含有均匀分布的胶体金标记的鼠抗人 hCG单克隆抗体 McAb 和无关的金标记鼠IgG试带上 将羊抗人hCG抗血清 多抗 线固定在试带下方为测定线 羊抗鼠IgG线固定在试带上方为阴性对照 检测时 将试带浸入被检尿液中 液面低于两条抗体线 后迅速取出 尿液沿试带继续上行 尿液中hCG在上行过程中与金标记的McAb结合 当上行至羊抗人hCG多抗线时 形成金标记的McAb 尿hCG 羊抗人hCG多抗复合物 双抗体夹心 在试带上显示紫红色线条 为HCG阳性 试带上无关的金标记鼠IgG随尿继续上行至羊抗鼠IgG线时 与之形成金标记抗原 羊抗鼠IgG复合物 在试带上显示紫红色线条 为阴性对照 两条紫红色为阳性 一条紫红色为阴性 临床意义 早期妊娠诊断 流产诊断和监察 先兆流产 不全流产 异位妊娠诊断 宫外孕 妊娠滋养细胞疾病的诊断与病情观察 作为肿瘤标志物时 须结合临床表现和其他检查结果综合分析 包括 二 乳糜尿检查 乳糜液或淋巴液进入尿液中 尿液呈乳白色混浊 称为乳糜尿 若同时混有血称乳糜血尿 若合并泌尿道感染 则可出现乳糜脓尿 乳糜尿形成机制 泌尿系统淋巴管破裂 从肠道吸收的乳糜液未经正常的淋巴道引流入血而逆流至泌尿系淋巴管中 引起该处淋巴管内压力增高 曲张破裂 乳糜液流入尿液中所致 深部淋巴管阻塞 乳糜液不能流入乳糜池 而逆流到泌尿系统淋巴管中 乳糜尿的外观取决于尿中淋巴液含量的多少 从轻度乳白 乳白带红到乳糜胨样 乳糜尿含卵磷脂 胆固醇 甘油三酯 少量纤维蛋白原和清蛋白