06血清总胆红素和直接胆红素测定.doc

标题：血清总胆红素和直接胆红素测定版本号：A修订号：0文件编号CJYYLAB-SH-SOP-006发布日期：2006年06月06日生效日期：2006年07月01日发布部门：管理层编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码： 共 3 页一、目的 胆红素是血红蛋白的代谢产物，来源有三：（1）人体内胆红素的3/4源于循环血液中衰老红细胞崩解后所释放出的血红蛋白辅基血红素降解而产生；（2）骨髓中的红细胞原位溶血所释放的血红蛋白；（3）含卟啉的血色蛋白如肌红蛋白和其他非血红蛋白性的正铁血红素分解后产生极少量胆红素。 血红蛋白被单核-巨噬细胞系统破坏后分解成胆绿素，再还原成胆红素进入血与血浆白蛋白结合而被运转，称为非结合胆红素或间接胆红素；间接胆红素难溶于水，不能由肾脏排出而进入肝脏，受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合，形成葡萄糖醛酸酯，称为结合胆红素或直接胆红素。 结合胆红素由肝随胆汁排至肠道，被还原成粪胆原（尿胆原）再经氧化变成粪胆素（尿胆素），大部分随粪便排出体外；小部分经门脉吸收回肝，复经肝肠循环，其中一小部分进入血循环，经肾排出，称尿胆原。当肝细胞损伤，胆管阻塞，红细胞破坏增加或寿命缩短时，胆红素代谢发生异常，临床上即出现黄疸。二、测定方法 改良J-G法三、原理 血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂混合后，加入偶氮苯磺酸，生成紫色的偶氮胆红素。其中醋酸缓冲液用以保持偶氮反应的PH，咖啡因、苯甲酸钠加速偶氮苯磺酸的偶联反应。抗坏血酸破坏剩余偶氮试剂，终止偶氮反应。最后加入强碱性酒石酸溶液使紫色偶氮胆红素变成蓝色偶氮胆红素，在600nm波长下比色,测定蓝色偶氮胆红素的生成量。四、标本1、静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。2、采血后应立即送到检验科生化室。3、样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于28保存。4、溶血或脂血的标本不能测定。五、设备及试剂1、希迈全自动生化仪。2、上海复星长征公司胆红素试剂。3、胆红素试剂应于28冰箱保存。 六、操作步骤1、样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。2、试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，确认无误后方可进行测定。3、操作方法：详见希迈生化仪操作手册。七、质量控制 每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清至少做一次室内质控，每年定期参加海南省临检中心所组织的室间质评。八、干扰因素1、 轻度溶血对本法无影响，但严重溶血时可使测定结果偏低，其原因是血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素，还可被亚硝酸氧化为高铁血红蛋白而干扰测定。2、 胆红素对光敏感，标本应尽量避光，尽早测定。3、 脂血对测定有干扰，尽量抽取空腹血。4、 胆红素结果过高时，可用生理盐水稀释后测定。九、参考区间 总胆红素：1.717.1 umol/l 直接胆红素：06 umol/l间接胆红素=总胆红素-直接胆红素十、实验室解释 血清胆红素的测定能准确地反映黄疸的程度，对临床诊断隐性黄疸及黄疸有重要意义。1、 肝细胞疾病如急性黄疸性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝坏死等，胆红素会有升高现象。2、 阻塞性疾病如胆石症、肝癌、胰头癌等压迫造成的胆道阻塞性疾患，可使血清总胆红素和直接胆红素均升高。3、 新生儿黄疸、败血症、溶血性贫血、恶性疟疾、严重大面积烧伤或因输血不当引起溶血等可引起总胆红素、间接胆红素升高。十一、异常结果处理实验结果应与临床相符，不符的应复查。十二、参考文献1、 叶应妩、王毓三主编，全国临床检验操作规程，中华人民共和国卫生部医政司、南京、第二版、1997。2、管正大主编，医学检验临床意义