（天然药化）第三章 糖和苷类ppt课件

第三章糖和苷 第一节糖类化合物 1 糖的含义 糖 saccharides 是多羟基醛或多羟基酮及其衍生物 聚合物的总称 糖的分子中含有碳 氢 氧三种元素 大多数糖分子中氢和氧的比例是2 1 因此 具有Cx H2O y的通式 所以 糖又称为碳水化合物 carbohydrates 但有的糖分子组成并不符合这个通式 如鼠李糖 rhamnose 为C6H12O5 2 存在 在自然界中 糖的分布极广 无论是在植物界还是动物界 糖可分布于植物的各个部位 植物的根 茎 叶 花 果实 种子等大多含有葡萄糖 果糖 fructose 淀粉和纤维素 cellulose 等糖类物质 3 主要生物活性 糖类化合物多具有抗肿瘤活性 香菇多糖 或具有增强免疫功能 黄芪多糖 糖类的结构与分类 根据其能否水解和分子量的大小可分为 单糖 monosaccharides 不能再被简单地水解成更小分子的糖 如葡萄糖 鼠李糖等 低聚糖 oligosaccharides 由2 9个单糖聚合而成 也称为寡糖 如蔗糖 麦芽糖等 多糖 polysaccharides 由10个以上的单糖聚合而成 分子量很大 其性质也大大不同于单糖和低聚糖 如淀粉 纤维素等 一 单糖的构型 1 绝对构型 在Fischer式中 最后第二个碳原子上的 OH向右的为D型 向左的为L型在哈沃斯 Haworth 式中 只要看六碳吡喃糖的C5 五碳呋喃糖的C4 上取代基的取向 向上的为D型 向下的为L型 2 相对构型 哈沃斯 Haworth 式 端基碳原子的相对构型 或 是指C1羟基与六碳糖C5 五碳糖C4 取代基的相对关系 当C1羟基与六碳糖C5 五碳糖C4 上取代基在环的同一侧为 构型 在环的异侧为 构型 以下糖结构式中的部分羟基未画出 构型 构型 单糖在水溶液中形成半缩醛环状结构 即成呋喃塘和吡喃糖 具有六元环结构的糖 吡喃糖 pyranose 具有五元环结构的糖 呋喃糖 furanose 3 六碳酮糖 ketohexose hexulose 如D 果糖 D fructose L 山梨糖 L sorbose 等 4 甲基五碳糖常见的有L 鼠李糖 L rhamnose L 夫糖 L fucose 和D 鸡纳糖 D quinovose D 果糖 L 鼠李糖 5 支碳链糖糖链中含有支链 如D 芹糖 D apiose 和D 金缕梅糖 D hamamelose D 金缕梅糖 6 氨基糖 aminosugar 单糖的一个或几个醇羟基置换成氨基 庆大霉素 7 去氧糖 deoxysugars 单糖分子的一个或二个羟基被氢原子取代的糖 常见的有6 去氧糖 甲基五碳糖 2 6 二去氧糖及其3 O 甲醚等 该类糖在强心苷和微生物代谢产物中多见 并有一些特殊的性质 如L 黄花夹竹桃糖 L thevetose 是2 6 二去氧糖的3 O 甲醚 8 糖醛酸 uronicacid 单糖分子中的伯醇基氧化成羧基 常结合成苷类或多糖存在 常见的如葡萄糖醛酸 glucuronicacid 和半乳糖醛酸 galactocuronicacid 糖醛酸易环合成内酯 在水溶液中呈平衡状态 L 黄花夹竹桃糖 D 葡萄糖醛酸 缩合成内酯 D 半乳糖醛酸 9 糖醇 单糖的醛或酮基还原成羟基后所得到的多元醇称糖醇 糖醇在天然界分布也很广 亦多有甜味 如卫矛醇 D 甘露醇 D 山梨醇 D 山梨醇D 甘露醇 二 低聚糖 oligosaccharides 寡糖 由2 9个单糖通过苷键键合而成的直链或支链的聚糖称低聚糖 分类 按组成低聚糖的单糖基数目分为 二糖 三糖 四糖等 常见的二糖有蔗糖 龙胆二糖 gentiobiose 麦芽糖 maltose 芸香糖 rutinose 蚕豆糖 vicianose 槐糖 sophorose 等 按有无游离的醛基或酮基分为还原糖和非还原糖 若两个糖均以端基脱水缩合形成的聚糖就没有还原性 芸香糖麦芽糖 化学命名 把除末端糖之外的叫糖基 并标明连接位置和苷键构型 D 葡萄糖1 2 D 果糖 蔗糖 sucrose 非还原糖 三 多聚糖 polysaccharides 多糖 是由10个以上的单糖基通过苷键连接而成 多糖分子量较大 一般由几百个甚至几万个单糖分子组成 聚合度 已失去一般单糖的性质 一般无甜味 也无还原性 性质 分类 1 按功能分水不溶的 直糖链型 主要形成动植物的支持组织 ex 纤维素 甲壳素溶于热水 形成胶体溶液 多支链型 动植物的贮存养料 ex 淀粉 肝糖元2 按组成分由一种单糖组成 均多糖 homosaccharide 由二种以上单糖组成 杂多糖 heterosaccharide 1 植物多糖 1 纤维素 cellulose 由3000 5000分子的D 葡萄糖通过1 4苷键以反向连接聚合而成的直链葡聚糖 分子结构直线状 不易被稀酸或碱水解 纤维素 2 淀粉 starch 淀粉是葡萄糖的高聚物 淀粉在制剂中常用作赋形剂 在工业上常用作生产葡萄糖的原料 3 粘液质 mucilage 是植物种子 果实 根 茎和海藻中存在的一类粘多糖 粘液质可溶于热水 冷后呈胶冻状 4 树胶 gum 树胶是植物在受伤害或毒菌类侵袭后分泌的物质 干后呈半透明块状物 如中药没药内含64 树胶 是由D 半乳糖 4份 L 阿拉伯糖 1份 和4 甲基 D 葡萄糖醛酸 3份 组成的酸性杂多糖 2 菌类多糖 1 猪苓多糖 能显著提高荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬能力 促进抗体形成 是良好的免疫调节剂 具有抗肿瘤转移和调节机体细胞免疫功能的作用 此外 对慢性肝炎也有良好的疗效 2 茯苓多糖 本身无抗肿瘤活性 若切断其所含的1 6吡喃葡聚糖支链 成为单纯的1 3葡聚糖 称为茯苓次聚糖pachymaran 则具有显著的抗肿瘤作用 3 灵芝多糖3 动物多糖 1 肝素 heparin 是一种含有硫酸酯的粘多糖 肝素广泛分布于哺乳动物的内脏 肌肉和血液里 作为天然抗凝血物质受到高度重视 国外用于预防血栓疾病 并已形成了一种肝素疗法 2 甲壳素 chitin 是组成甲壳类昆虫外壳的多糖 不溶于水 对稀酸和碱稳定 甲壳素经浓碱处理 可得脱乙酰甲壳素 chitosan 甲壳素及脱乙酰甲壳素应用非常广泛 可制成透析膜 超滤膜 用作药物的载体具有缓释 持效的优点 还可用于人造皮肤 人造血管 手术缝合线等 低聚糖和多糖的提取分离 1 水提醇沉 分级沉淀 按分子量不同进行的初步分离 沉淀一般在PH7时进行 此时糖的性质最稳定 但酸性多糖在PH7时以盐的形式存在 易调至PH2 4进行 2 凝胶过滤法糖类层析最适用聚丙烯酰胺凝胶等 各溶质洗脱顺序随分子量由大到小依次流出 3 透析法利用一定大小孔目的膜 使无机盐或小分子糖透过而达到分离目的的方法 应选择适当的透析膜 以免大分子的糖透过 4 活性炭柱层析法适用于分离低聚糖的混合物 柱上溶剂极性越大时吸附力愈强 故应先用水洗脱以洗出单糖 然后以5 7 5 稀醇洗出双糖 10 稀醇洗出聚合度更高的聚糖 如此逐渐增加乙醇浓度 得到聚合度渐高的聚糖 活性炭吸附容量大而不受糖溶液浓度改变或无机盐的存在而受影响 这是一个有用的分离方法 5 季铵盐沉淀法季铵盐可与酸性多糖的阴离子形成不溶于水的沉淀 使酸性多糖从水溶液中沉淀出来 中型多糖留存在母液中而分离 若再利用硼酸络合物 中性多糖亦可沉淀 或在高pH的的条件下 增加中性醇羟基的解离度而使之沉淀 第二节苷类化合物 甙类 1 含义 苷类 glycosides 是糖或糖的衍生物与另一非糖物质通过糖的端基碳原子连接而成的一类化合物 又称为配糖体 苷中的非糖部分称为苷元 genin 或配基 aglycone 以葡萄糖为例 D 葡萄糖苷 苷键原子 苷元 配基 非糖的物质 常见的有黄酮 蒽醌 三萜等 苷键 端基碳原子 2 植物分布 苷类的分布广泛 是普遍存在的天然产物 由于苷元的结构类型不同 各种结构类型的苷类在植物中的分布情况亦不一样 如黄酮苷在近200个科的植物中都有分布 强心苷主要分布于玄参科 夹竹桃科等10多个科 对多数中草药 根及根茎往往是苷类分布的一个重要部位 3 生物活性 苷类化合物多具有广泛的生物活性 如天麻苷是天麻安神镇静的主要活性成分 三七皂苷是三七活血化瘀的活性成分 强心苷有强心作用 黄酮苷有抗菌 止咳 平喘 扩张冠状动脉血管等等作用 苷类的结构与分类 一 结构1 苷键 苷中的苷元与糖之间的化学键称为苷键 2 苷键原子 苷元上形成苷键以连接糖的原子 称为苷键原子 也称为苷原子 它是由苷元提供的原子 苷键原子通常是氧原子 也有硫原子 氮原子 少数情况下 苷元碳原子上的氢与糖的半缩醛羟基缩合 形成碳 碳直接相连的苷键 3 苷的构型 由于单糖有 及 二种端基异构体 因此在形成苷类时就有二种构型的苷 即 苷和 苷 在天然的苷类中 由D 型糖衍生而成的苷多为 苷 而由L 型糖衍生而成的苷多为 苷 4 成苷的常见糖 主要是单糖 为D 葡萄糖 L 阿拉伯糖 D 木糖 L 鼠李糖 D 甘露糖 D 半乳糖 D 果糖 D 葡萄糖醛酸以及D 半乳糖醛酸等 也有去氧糖等其他糖 二 分类1 按苷键原子分类根据苷键原子的不同 苷类可以分为氧苷 硫苷 氮苷和碳苷 1 氧苷 O 苷 苷元通过氧原子和糖相连接而成的苷称为氧苷 根据形成苷键的苷元羟基类型不同 又可分为醇苷 酚苷 酯苷和氰苷等 其中以醇苷和酚苷居多 酯苷较少见 醇苷 是通过醇羟基与糖端基脱水而成的苷 比较常见 强心苷均属此类 红景天苷 毛茛苷 酚苷苷元分子中的酚性羟基与糖脱水而成的苷 较常见 如黄酮苷 蒽醌苷多属此类 熊果苷天麻苷丹皮苷 酯苷苷元中羧基与糖缩合而成的苷 其苷键既有缩醛性质又有酯的性质 易为稀酸和稀碱所水解 如山慈菇苷A和B 是山慈菇中抗霉菌的活性成分 被水解后 苷元立即环合生成山慈菇内酯A和B R H山慈菇内酯AR OH山慈菇内酯B R H山慈菇苷AR OH山慈菇苷B 氰苷 主要是指 羟基腈的苷 氰苷数目不多 但分布广泛 这种苷多为水溶性 不易结晶 易水解 尤其是在有稀酸和酶催化时水解更快 生成的苷元 羟基腈很不稳定 立即分解为醛 酮 和氢氰酸 而在浓酸作用下 苷元中的 CN基易氧化成 COOH基 并产生NH4 在碱性条件下 苷元容易发生异构化而生成 羟基羧酸盐 苦杏仁苷 amygdalin 存在于杏的种子中 具有 羟基腈结构 属于氰苷类 cyanogenicglycosides 苦杏仁苷在人体内会缓慢分解生成不稳定的 羟基苯乙腈 进而分解成为具有苦杏仁味的苯甲醛以及氢氰酸 小剂量口服时 由于释放少量氢氰酸 对呼吸中枢产生抑制作用而镇咳 大剂量口服时因氢氰酸能使延髓生命中枢先兴奋而后麻痹 并能抑制酶的活性而阻断生物氧化链 从而引起中毒 严重者甚至导致死亡 在酸碱或酶的作用下 苦杏仁苷依不同的条件生成不同的分解产物 要求掌握 2 硫苷 S 苷 糖的半缩醛羟基与苷元上巯基缩合而成的苷称为硫苷 芥子苷是存在于十字花科植物中的一类硫苷 其通式如下 几乎都是以钾盐的形式存在 经其伴存的芥子酶水解 生成的芥子油含有异硫氰酸酯类 葡萄糖和硫酸盐 具有止痛和消炎作用 3 氮苷 N 苷 糖上的端基碳与苷元上氮原子相连接而成的苷称为氮苷 氮苷在生物化学领域中是十分重要的物质 腺苷 鸟苷 胞苷 尿苷 等是核酸的重要组成部分 另外 中药巴豆中的巴豆苷 crotonside 其化学结构与腺苷相似 巴豆苷 腺苷 4 碳苷 C 苷 碳苷是一类糖基的端基碳原子直接与苷元碳原子相连接而成的苷类化合物 组成碳苷的苷元多为黄酮类 蒽醌类化合物等 其中以黄酮碳苷最为多见 碳苷类具有水溶性小 难于水解的共同特性 如豆科植物葛和野葛的根中含有的葛根素 puerarin 对心血管系统有较强的活性 有明显的扩张冠状动脉 增加冠脉流量 降低血压的作用 该化合物即为异黄酮的碳苷 8位直接与葡萄糖相结合 葛根素 2 其它分类方法 1 按苷元的化学结构类型 分为香豆素苷 蒽醌苷 黄酮苷 吲哚苷等 2 按苷类在植物体内的存在状况 分为原生苷 primaryglycosides原存在于植物体内 次生苷 secondaryglycosides原生苷水解失去一部分糖后生成的 如苦杏仁苷是原生苷 野樱苷是次生苷 3 按苷的生理作用分类 强心苷 4 按苷的特殊物理性质分类 皂苷 5 按糖的种类或名称分类 葡萄糖苷 木糖苷 去氧糖苷等 6 按苷分子所含单糖的数目分类 可分为单糖苷 双糖苷 三糖苷等 7 按苷分子中的糖链数目分类 可分为单糖链苷 双糖链苷等 8 按其植物来源分类 例如人参皂苷 柴胡皂苷等 形 苷类化合物多数是固体 其中糖基少的可以成结晶 糖基多的如皂苷 则多呈具有吸湿性的无定无形粉末 味 苷类一般是无味的 但也有很苦的和有甜味的 如甜菊苷 stevioside 是从甜叶菊的叶子中提取得到的 属于贝壳杉烷型四环二萜的多糖苷 比蔗糖甜300倍 临床上用于糖尿病患者作甜味剂用 无不良反应 色 苷类化合物的颜色是由苷元的性质决定的 共轭系统的大小及助色团的有无 糖部分没有颜色 第三节苷的性质 苷类的物理性质1 苷类均为固体 无定形粉末状物或结晶2 多具有吸湿性3 刺激性 有些苷类对粘膜具有刺激作用 如皂苷 强心苷等4 多数苷类化合物呈左旋 但水解后 由于生成的糖常是右旋的 因而使混合物呈右旋 因此 比较水解前后旋光性的变化 也可以用以检识苷类化合物的存在 但必须注意 有些低聚糖或多糖的分子也都有类似的性质 因此一定要在水解产物中肯定苷元的有无 才能判断苷类的存在 5 溶解性 1 苷 苷的糖基增多 极性增大 亲水性增强 在水中的溶解度也就增加 碳苷的溶解性较为特殊 和一般苷类不同 无论是在水还是在其它溶剂中 碳苷的溶解度一般都较小 2 苷元 易溶于亲脂性有机溶剂或不同浓度的醇 水甲醇 乙醇 乙醚 苯 石油醚苷元 亲脂性 苷 亲水性 注 为可溶 为不溶 苷类的化学性质 1 氧化开裂反应 Smith降解法 重要 苷类分子中的糖基具有邻二醇结构 可以被过碘酸氧化开裂 Smith降解法是常用的氧化开裂法 适用于苷元不稳定的苷和难水解的碳苷 此法先用过碘酸氧化糖苷 使之生成二元醛以及甲酸 再用四氢硼钠还原成相应的二元醇 这种二元醇具有简单的缩醛结构 比苷的稳定性差得多 在室温下与稀酸作用即可水解成苷元 多元醇和羟基乙醛等产物 Smith降解法在苷的结构研究中 具有重要的作用 对难水解的碳苷 也可用此法进行水解 以避免使用剧烈的酸进行水解 可获得连有一个醛基 但其它结构保持不变的苷元 此外 对一些苷元结构不太稳定的苷类 如某些皂苷 为了避免酸水解使苷元发生脱水或结构上的变化以获取真正的苷元 也常用Smith降解法进行水解 2 苷类的显色反应和沉淀反应苷类的共性在于都含有糖基部分 因此 苷类可发生与糖相同的显色反应和沉淀反应 但苷中的糖为结合糖 需先水解成为游离糖后才能进行反应 苷类化合物中的苷元部分 其结构可能彼此差异很大 性质亦各不相同 由苷元部分产生的显色反应请参见以后各章内容 例如 糖在浓酸 4 10N 作用下 失三分子水 生成具有呋喃环结构的糠醛类化合物 这些糠醛衍生物可以和许多芳胺 酚类可缩合成有色物质 可用于糖的显色和检出 Molish试剂 萘酚 浓硫酸反应试管进行糖检出 黄 棕 绿 3 苷键的裂解苷键的裂解反应是一类研究多糖和苷类化合物的重要反应 通过该反应 可以使苷键切断 用途 1 了解苷元的结构2 考察所连糖的种类和组成3 研究苷元与糖的连接方式4 探讨糖与糖的连接方式 常用的方法 酸水解 碱水解 酶水解 氧化开裂 Smith降解法 等 1 酸催化水解 苷键属于缩醛结构 易为稀酸催化水解 反应一般在水或稀醇溶液中进行 常用的酸有HCl H2SO4 乙酸和甲酸等 反应的机理是 苷原子首先发生质子化 然后断裂生成苷元和糖的阳碳离子中间体 在水中经溶剂化脱去氢离子而形成糖 以氧苷为例 说明其反应历程 苷键原子的质子化 苷类酸水解的裂解规律 影响水解难易程度的关键在于 苷键原子的质子化是否容易进行具体到化合物的结构 则有以下规律 1 按苷键原子的不同 酸水解难易程度为 N 苷 O 苷 S 苷 C 苷原因 N最易接受质子 而C上无未共享电子对 不能质子化 2 呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解 水解速率大50 100倍 原因 呋喃五元环平面性 直立键多 各键重叠 张力大 不稳定 3 酮糖苷较醛糖苷易水解 原因 酮糖多呋喃环结构 且端基上接大基团 CH2OH 不稳定 4 吡喃糖苷中 吡喃环C5上的取代基越大越难水解 故有 五碳糖苷 甲基五碳糖苷 六碳糖苷 七碳糖苷 5位接 COOH的糖苷原因 吡喃环C5上的取代基对质子进攻有立体阻碍 5 2 3 去氧糖苷 2 去氧糖苷 3 去氧糖苷 2 羟基糖苷 2 氨基糖苷原因 2位羟基对苷原子的吸电子效应及2位氨基对质子的竞争性吸引 2 去氧糖苷 2 羟基糖苷 2 氨基糖苷 6 芳香苷 脂肪苷原因 芳香属苷 如酚苷 因苷元部分有供电子结构 苷元的供电子效应使苷原子的电子云密度增大 易于发生质子化 因此水解比脂肪属苷 如萜苷 甾苷等 容易得多 某些酚苷 如蒽醌苷 香豆素苷不用酸 只加热也可能水解 7 苷元为小基团者 苷键横键的比苷键竖键的易于水解原因 横键上原子易于质子化 小苷元在竖键时 环对质子进攻有立体阻碍 苷元为大基团者 苷键竖键的比苷键横键的易于水解 原因 苷的不稳定性促使水解 8 N 苷易接受质子 但当N处于酰胺或嘧啶位置时 N 苷也难于用矿酸水解 原因 吸电子共轭效应 减小了N上的电子云密度 注意 对酸不稳定的苷元 为了防止水解引起皂元结构的改变 可用两相水解反应两相水解 适于水解后对酸不稳定的苷元 糖苷 水 H CHCl3苷元 CHCl3 糖 水 2 碱催化水解 一般的苷对碱是稳定的 不易被碱催化水解 故多数苷是采用稀酸水解 但是 酯苷 酚苷 氰苷 烯醇苷和 吸电子基取代的苷易为碱所水解 如藏红花苦苷 靛苷 蜀黍苷都都可为碱所水解 但有时得到的是脱水苷元 例如藏红花苦苷的水解 原因 其中藏红花苦苷苷键的邻位碳原子上有受吸电子基团活化的氢原子 当用碱水解时引起消除反应而生成双烯结构 3 酶催化水解 条件温和高度专属性 水 30 40 苷酶 苷 麦芽糖酶水解 葡萄糖苷键 苷酶 苷 苦杏仁酶水解 葡萄糖苷键和其他六碳糖的 苷键 用酶水解苷键可以保持苷元的结构不变 获得真正苷元 进而获知苷键的 构型 还可以保留部分苷键得到次级苷或低聚糖 以便获知苷元和糖 糖和糖之间的连接方式 注意 酶降解反应的效果取决于酶的纯度以及对酶的专一性的认识目前使用的多为未提纯的混合酶 4 乙酰解反应 在多糖苷的结构研究中 为了确定糖与糖之间的连接位置 常应用乙酰解反应开裂一部分苷键 保留另一部分苷键 然后用薄层或气相色谱鉴定在水解产物中得到的乙酰化单糖和乙酰化低聚糖 反应用的试剂为乙酸酐与不同酸的混合液 常用的酸有硫酸 高氯酸或Lewis酸 如氯化锌 三氟化硼等 操作 一般可将苷溶于乙酐与冰乙酸的混合液中 加入3 5 量的浓硫酸 在室温下放置1 10天 将反应液倒入冰水中 并以碳酸氢钠中和至pH3 4 再用氯仿萃取其中的乙酰化糖 然后通过柱色谱分离 就可获得不同的乙酰化单糖或乙酰化低聚糖 再用TLC 薄层色谱 或GC对它们进行鉴定 苷发生乙酰解反应的速度与糖苷键的位置有关 如果在苷键的邻位有可乙酰化的羟基 则由于电负性 可使乙酰解的速度减慢 从二糖的乙酰解速率可以看出 苷键的乙酰解一般以1 6苷键最易断裂 其次为1 4苷键和1 3苷键 而以1 2苷键最难开裂 乙酰解反应的流程 多糖苷 醋酐 酸 浓硫酸 高氯酸 氯化锌 乙酰化单糖 乙酰化低聚糖 选择性水解 1 6 苷键 1 4 苷键和1 3 苷键 1 2 苷键 依鉴定结果 裂解规律 推断多糖苷中糖与糖之间的连接位置 鉴定 薄层色谱气相色谱 下列为一种五糖苷的乙酰解过程 其分子组成中含有D 木糖 D 葡萄糖 D 鸡纳糖和D 葡萄糖 3 甲醚 当用醋酐 ZnCl2乙酰解后 TLC检出了单糖 四糖和三糖的乙酰化物 并与标准品对照进行鉴定 由此可推出苷分子中糖的连接方式 第四节苷类的提取和分离 提取 植物体内 苷类常与水解苷类的酶共存 因此在提取时 必须抑制酶的活性 常用的方法是在中药中加入CaCO3 或用甲醇 乙醇或沸水提取 同时提取过程中要尽量勿与酸或碱接触 以免苷类水解 如不加注意 则往往提到的就不是原生苷 在提取时还必明确提取的目的即要求提取的是原生苷 次生苷 还是苷元 然后根据要求进行提取 因为其提取方法是有差别的 各种苷类 由于苷元的结构不同 所联接的糖也不一样 很难有统一的提取方法 如用极性不同的溶剂循极性从小到大次序提取 则在每一提取部分 都可能有苷的存在 以下是最常用的提取方法 流程图 分离方法 1溶剂处理法 溶剂沉淀 水液加丙酮或乙醚溶剂萃取法 乙酸乙酯 正丁醇萃取2铅盐沉淀法 3大孔树脂处理法 先水洗 无机盐 糖 肽类 不同浓度的乙醇洗苷类4柱色谱分离法 反相硅胶色谱 Rp 18 Rp 8 极性成分适用 水 甲醇或水 乙腈为流动相葡聚糖凝胶色谱 SephedexLH 20 有机相适用 不同浓度的乙醇为洗脱剂 苷的检识 一 化学检识水解苷糖 苷元 鉴别特点和意义 菲林试剂阴性 阳性 还原糖特有多伦试剂阴性 阳性 还原糖特有Molish反应阳性 阳性 苷与苷元的鉴别 萘酚 浓硫酸 二 色谱检识1 薄层色谱 分配原理 硅胶正相色谱硅胶反相色谱固定相硅胶表面吸附的水Rp 18 Rp 8展开剂正丁醇 乙酸 水 4 1 5 上层 氯仿 甲醇氯仿 甲醇 水 65 35 10 下层 甲醇 水 三元系统 二元系统 适用范围大多数苷 极性偏大 极性较小的苷 2 纸色谱 分配原理 固定相水展开剂正丁醇 乙酸 水 4 5 1 上层 正丁醇 乙醇 水 4 2 1 水饱和的苯酚显色剂苯胺 邻苯二甲酸试剂 间苯二酚 盐酸试剂 薄层 纸层均可 茴香醛 硫酸 间苯二酚 硫酸 萘酚 硫酸 仅薄层适宜 主要针对苷中糖及糖的显色 针对苷元的显色见各章节 第五节苷类的结构研究 天然产物中的苷类成分多为固体化合物 其结构鉴定应通过以下各项程序进行 一 纯度的测定TLC 熔点 柱色谱鉴别二 分子量及分子式的测定质谱分析法 广泛采用 苷类化合物一般极性较大 无挥发性 遇热气化时易于分解 采用电子轰击质谱 EI MS 常常不能获得分子离子峰 现多采用化学电离质谱 CI MS 场解吸质谱 FD MS 快原子轰击质谱 FAB MS 和电喷雾质谱 ESI MS 等方法来获得分子离子蜂 尤其是ESI MS及FAB MS两种质谱法更是目前测定苷类分子量常用的方法 三 组成苷的苷元和单糖的鉴定将苷用稀酸或酶进行水解 使生成苷元和各种单糖 然后再对这些水解产物进行签定 一 苷元的结构鉴定苷元的结构类型不一 需要通过某些化学反应先确定其结构类型和基本母核结构 再按照所属类型分别进行研究 其方法将在有关章节中逐一介绍 二 组成苷中糖的种类鉴定通常采用PC TLC等方法对水解液进行鉴定 也可以直接通过解析苷的或二维NMR谱进行鉴定