浙江大学大学生科研训练计划项目.doc

浙江大学大学生科研训练计划项目（第十四期）中期检查表项目名称： 氟维斯群对KBv200细胞株多药耐药逆转作用的研究 项目负责人姓名： 吕丹旎 所在学院（系）： 医学院 年级与学号： 09级 3090104336 所学专业： 临床医学 联系电话：电子邮件： 项目组成员姓名： 黄圆 填表日期： 2011-10-22 本科生院教研处制表填表说明一、浙江大学大学生科研训练计划项目中期检查表由立项负责人根据项目实施情况实事求是填写，并用A4纸打印一份，于左侧装订成册，必须请指导教师审核，填写意见和签名，并上交所在学院（系）本科教学管理科。 二、项目负责人填写浙江大学SRTP项目中期检查表后，必须及时将检查表上传至浙江大学本科生创新网。三、学院（系）可采取不同形式进行中期检查，同步查看学生填写的浙江大学大学生科研训练项目记录本。 四、浙江大学大学生科研训练计划项目中期检查表和浙江大学大学生科研训练项目记录本将作为学院（系）给予学生提交项目结题材料完整性、过程管理、总成绩评定和评优的主要材料之一。项目名称氟维斯群对KBv200细胞株多药耐药逆转作用的研究立项经费1000起止时间2011年6月至2012 年5月负责人学号姓名年级所在院系、专业联系电话E-mail 3090104336吕丹旎09级医学院 临床医参加成员10918108黄圆08级医学院 肿瘤学导师姓名范伟民院系浙一医院职务/职称教授E-联系电话88208778一、SRTP项目研究进展情况（对研究内容、方法、进度和过程规范等）多药耐药是当今影响肿瘤化疗效果的主要障碍之一。研究表明，肿瘤细胞膜上的膜转运体P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）高表达是引起肿瘤细胞耐药性的重要原因。氟维斯群（Fulvestrant, ICI 182,780）作为一种雌激素受体拮抗剂，目前已应用于乳腺癌临床治疗。本项目开创性地针对通过研究氟维斯群对P-gp的影响及其对雌激素受体阴性肿瘤细胞多药耐药的逆转作用，以期拓展其应用范围，为肿瘤临床治疗提供新的思路。本项目以人口腔鳞状上皮癌耐药细胞株KBv200及其亲代敏感株KB为细胞模型，运用显微镜观测及四甲基偶氮唑盐（MTT）法评估氟维斯群的耐药逆转作用，并通过细胞周期检测、细胞凋亡检测及Western Blot等方法研究其逆转机制。目前已完成文献和资料查阅、项目研究方案设计，相关实验研究已完成与阿霉素共处理条件下氟维斯群耐药逆转作用的显微镜观测与MTT检测，实验结果显示氟维斯群对雌激素受体阴性细胞耐药确有逆转作用；此外，已完成蛋白提取及定量，近期正在进行-actin、bcl-2、P-gp、Ik-B等蛋白的Western Blot检测。二、SRTP项目研究已取得阶段性成果和收获（体会）阶段性成果：1、通过光镜检测，验证了氟维斯群与阿霉素联合使用对KBv200细胞耐药逆转的大致趋势。2、通过MTT检测，得到阿霉素单独处理、氟维斯群与阿霉素共处理两种条件下KBv200细胞株的IC50，从而验证了氟维斯群对KBv200细胞耐药的逆转作用。3、分别对KB、KBv200细胞在空白处理、阿霉素单独处理、氟维斯群单独处理、氟维斯群与阿霉素共处理4种条件下进行蛋白提取并定量。收获：1、熟悉了实验室的环境和工作流程，为今后的科研打下基础。2、熟练掌握了MTT、Western Blot等多项实验方法。3、培养了严谨踏实的科研态度与作风。三、SRTP项目研究存在的主要问题分析及应对思路与措施在前期实验研究过程中存在的主要问题是MTT检测所得的细胞生存率常因细胞接种数不均一而出现一定波动，从而对实验结果造成较大干扰。针对这一问题的应对措施包括：铺板采用十字交叉法以消除边缘效应的干扰、铺板前充分混匀细胞悬液并定时吹打等等。此外，在蛋白提取过程中，存在控制裂解液与细胞数配比的问题：裂解液过多会造成核裂解，出现大量粘稠状DNA影响蛋白提取；裂解液过少会导致细胞裂解不完全，蛋白提取量过少。因此，需要参照多方经验指导结合实际情况进行摸索与探究。四、SRTP项目研究下阶段主要任务及时间进程安排2011年11月 继续Western Blot实验，并完成细胞周期检测与细胞凋亡检测2011年12月 进行数据统计、处理与分析2012年1月至2012年4月 撰写论文2012年5月 结题答辩五、SRTP项目经费使用情况（说明购置实验材料、试剂、药品、加工测试、资料、复印、调研、交通等已开支经费数额） 实验耗材 500元 实验试剂 2000元 六、项目组成员各人分工所承担和完成研究内容情况项目组负责人所承担和完成研究内容情况汇报文献与资料查阅项目研究方案设计 实验研究及数据处理 论文撰写项目组第一成员所承担和完成研究内容情况汇报文献与资料查阅项目研究方案设计数