高盐饮食对家兔血压和心肝肾组织中自由基的影响实验.doc

高盐饮食对家兔血压和心肝肾组织中自由基的影响实验前言：食盐是人们生活中重要的调味品，我国人群日均摄盐量为720g。正常人体生理需要量为每人每天4.5g，世界卫生组织建议每人每天摄盐量应为5g以下为宜。国内外均有文章报道，平均每日钠摄入量与高血压的发生率成正相关。这和机体对钠的敏感性有关，钠盐的摄入量增加，导致水钠潴留，血容量增加，血压升高。有关高盐饮食对血压方面的影响国内外对都有过报道，但高盐对血压影响的同时对心，肝，肾组织的影响报道却并不多见，尤其是高盐饮食与自由基的量化关系报道甚少。为了填补这方面的资料，本研究主要从测定超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）含量方面来探讨高盐饮食影响血压的同时对体内心，肝，肾组织的影响。为预防医学及疾病的治疗提供合理的理论依据。并对影响因素进去初步分析。实验目的：探讨高盐饮食对家兔血压和心，肝，肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量的影响。本实验旨在为高血压患者是否该限盐提供参考依据，也可以证明正常人群改变高盐饮食的习惯有利于多种疾病的预防。实验对象：健康家兔20只，雌雄不拘，体重1.4-1.7kg。第一组10只，随机分为高盐饮食组和正常对照组，每小组5只，用于测定血压。第二组10只，随机分为高盐饮食组及正常对照组各5只，用于测试自由基。实验器材和药品：BL-410生物机能实验系统，分光光度计，手术器械，动脉夹，压力换能器，三通活塞，气管插管，动脉插管，玻璃分针，头皮针，注射器，丝线，纱布等。20%的氨基甲酸乙酯，超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）试剂盒实验方法：1， 实验动物饲养 从第一天起，正常对照组每天给与正常饲料和饮水。高盐饮食组每天给与含8%的NaCl饲料和饮水，连续15天。2， 一般情况 干预后观察动物的精神状态，进食，活动情况，体征，并发症，统计实验过程中动物的死亡率。3， 血压的测定 取用第一组家兔，以20%的氨基甲酸乙酯按5-6ml/Kg耳缘静脉注射麻醉。仰卧位固定于手术台上。在气管旁向下分离出家兔颈总动脉，远心端用线结扎，近心端用动脉夹夹住。在动脉夹和结扎线之间靠近结扎线处用眼科剪剪一“V”形切口，向心脏方向插入与压力换能器相连并充满肝素溶液的动脉插管，用线夹杂固定，保持动脉插管与动脉在同一直线上。然后用胶布将动脉插管固定与手术台上，放开动脉夹，便可记录动脉血压，再将压力换能器接入到BL-410生物机能试验系统。连续描记血压，待血压平稳后记录数据。4， 氧自由基的测定 取用第二组家兔，向家兔耳缘静脉注射一定量的空气，致其死亡，解剖家兔，迅速取出其心，肝，肾制备成10%的组织匀浆液，然后采用考马斯亮兰测定组织中蛋白含量。用黄嘌呤氧化酶法测定家兔脏器中SOD活力。以硫代巴比妥酸（TBA）法测定脏器中MDA含量。测定仪器用分光光度计。5， 统计学处理 采用SPSS16.0软件对实验结果进行统计学分析，数据以xS表示。组间比较采用t检验，以p0.05作为差异显著。预期结果：1， 血压 两组动物血压差异均有显著性。表现为高盐饮食组收缩压和舒张压均高于正常对照组（p0.05），见表1。表1 高盐饮食小鼠收缩压和舒张压的变化（xS，mmHg）组别数量收缩压舒张压正常对照组5高盐饮食组52， 脏器中SOD和MDA的改变 两组动物心，肝，肾组织中SOD和MDA差异也有显著性。表现为高盐饮食组SOD的活力降低（p0.05，0.01），而MDA的含量升高（p0.05，0.01），见表2.表2 高盐饮食小鼠心，肝，肾组织中SOD活力和MDA含量的变化（xS）组别数量SOD（U/mgprot）MDA(nmol/mgprot)心肝肾心肝肾正常对照组5高盐饮食组5预期结论：目前学术界认为体内氧自由基过多可引起机体组织细胞的损伤，且与高血压等多种疾病的发生发展有密切的联系。 本实验预期结果：1， 高盐饮食可致收缩压和舒张压均显著高于正常对照组，证明高盐饮食确与高血压密切相关。2， 高盐饮食均致动物心，肝，肾脏器中超氧化物歧化酶（SOD）活力显著低于正常对照组，而丙二醛（MDA）含量却高于正常对照组。提示高盐饮食还与体内脏器中氧自由基增殖有密切相关。3， 高盐饮食不仅与高血压有密切联系，还与体内重要脏器中的氧自由基的含量有关。SOD是体内需氧生物催化氧自由基歧化为H2O2与O2的一种金属酶。生理状态下，它能有效的清除体内的代谢物，有保护细胞和生物大分子免受自由基的攻击。本实验预期高盐饮食可能致心肝肾组织中SOD活力降低，MDA含量升高，说明高盐饮食有使心肝肾组织细胞损伤的可能，这和以往报道的高血压患者体内存在氧化与抗氧化失衡，脂质过氧化反应增强，抗氧化酶系统的保护功能减弱相一致。4， 由于氧自由基的增多，有可能损伤肝细胞膜性结构，导致肝功能障碍，使肝内抗氧化物和蛋白质含量下降，从而影响物质在肝细胞内的代谢。5， 另一方面，又由于盐性高血压造成肾组织损伤形成尿酸和大量的超氧阴离子自由基，导致肾组织内氧自由基大量堆积。这