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文档简介

_菌种保存一、保存时间:2014.3.2二、待保存菌种:KJNN-6(400mg/L)、KJSN-3(400mg/L)、KJNN-1(400mg/L)、KJSW-4(350mg/L)、KJNN-4(400mg/L)、KJNN-3(400mg/L)、KJNN-2(白)(400mg/L)、KJSW-5(350mg/L)、KJSN-2(400mg/L)、KJNN-5(400mg/L)、KJSW-7(350mg/L)、KJSW-2(400mg/L)、LJX1、KJSW-3(350mg/L)、KJSN-1(400mg/L)、KJSW-8(400mg/L)3、 保存材料与工具:50%甘油、EP管、镊子、试剂盒等4、 保存菌种原理由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50% 的水溶液,高压灭菌 后室温保存 即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冻结。 加甘油是为了避免水结冰产生冰晶损伤细菌细菌具有容易变异的特性,在保存过程中需使细菌的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使细菌代谢能力降低的重要因素。5、 保存菌种步骤:将待使用的镊子、EP管、枪头放入高压灭菌锅灭菌在超净工作台将待保存的菌种、实用工具紫外表面灭菌用酒精清洁完手后,在酒精灯上灼烧镊子消毒用镊子取10支EP管于试剂盒(防止碰到EP管口)用移液枪取500L50%甘油于EP管,另取500L菌种于EP管将EP管取出(防止碰到EP管口)盖好盖子,盖上写明菌种类型及保存人,震荡均匀后装袋将记录菌种类型、保存人、日期的字条放入小袋中所有菌种袋装入一个大袋中进行统一保存,贴上标签,写明类别并置于-20冰箱保存(注意:操作过程中手及衣袖不要在试剂盒上EP管上晃动)6、 后期检测方法一定时间后(如三个月),取出一套冻存菌种,37水浴中快速解冻,然后进行平板划线将菌种复苏,检测细菌的存活情况,并观察菌落形态、菌体形态,检测有关生化指标,比较各菌株的生物学特性是否发生变化。七、预期结果 观察在存活期内,各菌株的形态、染色特性、生化反应等均无明显变化,也就是说这些菌在

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