临床微生物标本采集与运送SOP.doc

临床微生物标本采集与运送SOP手术部位感染标本采集及运送标准操作规程一、一般原则1.在抗菌药物使用前，且仅在有临床感染症状或伤口恶化或长期不能愈合时采集标本。2 皮肤或粘膜表面的清洁。（1）闭合伤口和穿刺物标本：消毒方法同血培养标本的皮肤消毒。（2）开放伤口：无菌生理盐水充分冲洗伤口部位。不可以用消毒剂。3 采集新鲜的感染组织，避免采集浅表的组织碎屑。4 若可以采集穿刺物或活检标本，应避免拭子标本。二、容器1 较大的标本：含有少量生理盐水的带螺纹口的无菌塑料容器。2 标本较小或拭子标本：MW&E TRANSWAB运输培养基，适用于需氧和厌氧菌。三、采集方法（一）封闭性脓肿1 注射器穿刺抽取脓液。2 若无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次穿刺抽吸脓液：若脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。脓液的量以大于1ml为宜。3 排除注射器内部及针头的气体，用无菌橡皮塞封闭针头送检：或直接打入血培养瓶中。若为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。（二）组织和活检标本1 采集足够大的组织，体积以1立方毫米为宜，避免在坏死区域采集。2 将小块的组织放在运输培养基内，较大的放在无菌容器中，并加入少量无菌生理盐水。（三）开放伤口1 无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。2 用拭子深入伤口的基底部或伤口-正常组织边缘部采集两个标本，分别用于培养和革兰氏染色。四、标本的标识填写患者信息、标本类型（深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等）、标本的来源（腹腔、腿和上臂等）、记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗菌药物前采集，选择检查项目（需氧培养或厌氧培养）。五、标本的送检为了更好的分离病源菌，标本应在采集后的30分钟内送到实验室。送检时应保持标本的湿润（尽量采用运输培养基，组织可以放在生理盐水中）。在送检前或运输过程中，禁止将标本放于冰箱。若不能及时送检，运输培养基中标本应室温保存。但最长不超过24小时。尿液标本采集和运送标准操作规程一、采集时机：宜为抗菌药物使用之前的清晨第一次尿液。二、采集方法：（一）清洁中段尿1 女性：采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液等冲洗外阴，用手指分开阴唇，弃其前段尿，不中止排尿，留取中段尿1020ml于无菌容器内。2.男性：采样前用肥皂水或0.05%0.1%的聚维酮碘（碘伏）溶液等消毒液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿1020ml于无菌容器中。（二）耻骨上膀胱穿刺主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿、脊柱损伤的尿液采集。先用0.25%碘伏溶液等消毒液消毒穿刺部位皮肤，然后使用无菌注射器直接从耻骨联合与脐连线上高于耻骨联合2cm处刺入膀胱吸取尿液1020ml于无菌容器中。（三）导尿管尿1.直接导尿法：使用0.05%0.1%的碘伏溶液等消毒剂消毒会阴局部，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃用前段尿液约15ml，再留取中段尿液1020ml于无菌容器中。2.留置导尿管法：医院内尿路感染中，临床最常用此法。采集前先夹住导尿管，采集时则松管弃其前段尿，使用0.25%0.5%的碘伏溶液等消毒剂消毒导尿管的采样部位，使用无菌注射器斜刺入导尿管（从采样口或靠近尿道的导尿管管壁）抽取1020ml尿液于无菌容器中。3.回肠造口导尿管法：摘除导管，弃去里面的尿液，先用0.05%0.1%的碘伏溶液等消毒剂消毒吻合口，再将导尿管插入到清洁的吻合口，直至筋膜的深部采集1020ml尿液于无菌容器中。（四）小儿收集包对于无自控能力的小儿可应用收集包采集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。三、标本运送标本采集后及时送检并接种，室温下保存时间不应超过2h(夏季保存时间适当缩短或冷藏保存)。如果不能及时运送或接种，应4摄氏度冷藏，但保存时间也不应超过8h。四、注意事项1.不应从集尿袋中采集尿液。2.尿液中不应加防腐剂或消毒剂。3.若尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应反复多次送检。4.多次采集或24小时尿不应用于尿液培养。5.除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿管患者常规进行尿液培养6.培养结果应结合临床表现、菌落计数及微生物种类，进行综合判断。痰标本采集与运送标准操作规程一、 采集目的一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。二、 一般原则1.采集标本的最佳时机应在使用抗菌药之前。2.宜采集清晨第二口痰液。3.对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。4.怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。三、采集方法(一)自然咳痰法与雾化导痰法1.用物准备：无菌容器（盒）、生理盐水（250ml或500ml）、化验单。2.核对患者床号、姓名等。3.无痰或痰量极少者可用3%5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5分钟后留取痰液。4.如有可能，应在医护人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘下牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力字气管深部咳出痰液，置无菌容器内，应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。（二）支气管镜法鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支气管肺泡潅洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。（三）经人工气道吸引法1.用物准备：负压吸引器、生理盐水、一次性吸痰管、无菌手套、无菌容器（试管）、化验单。2.核对患者床号、姓名等。3.将患者头部转向操作者一侧。4.进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器至适宜负压（成人：40.053.3kPa;小儿：小于40.0kPa）.5.将一次性吸痰管外包装去除，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。6.折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速的左右旋转上提吸痰管吸痰。见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15秒，吸痰前后需吸入高浓度氧气12分钟）。7.将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液黏稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌容器（试管）内。四、运送和保存应在2h之内送至实验室，否则应4摄氏度冷藏，但放置时间不可超过24h.。血培养标本采集、运送与报告标准操作规程一、 血培养指征患者出现寒战，体温超过三十八摄氏度或者低体温，怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：留置中心静脉导管超过七十二小时;感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状；临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。二、采血时机一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养，最好在抗菌治疗前或者停用抗菌药二十四小时后，以寒战、发热时采集为宜。三、 采血流程（一）消毒1、培养瓶消毒程序：用消毒液消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。2、皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5厘米以上，待消毒液挥发干燥后（常需30秒以上）穿刺采血。(二)静脉穿刺和培养瓶接种成人用注射器无菌穿刺取血后，排净针头内空气，直接注入血培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），先注于厌氧培养瓶，避免注入空气，然后注入需氧培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固。近年来，临床普遍采用负压血培养瓶。将血从患者静脉直接吸入血培养瓶、减少污染环节。（三）注意事项1检验单需注明抗菌药使用情况、血液采集时间和部位、临床诊断等患者信息。2采血部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药的静脉处采血。除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血。因为导管易被皮肤正常菌群污染。3.采血次数：对于成年患者，应该同时分别在两个部位采集血标本，在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。4.细菌性心内膜炎：在24h内取血3次，每次间隔不少于30分钟；必要时次日再做血培养2次。5.采血量：以培养基与血液之比10:1为宜，以稀释血液中的抗菌药、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次