实验诊断ppt课件

第一节血液学一般检验 长医附属和平医院检验科乔慧 二 白细胞系统检验 嗜中性杆状核粒细胞 S 0 0 05嗜中性分叶核粒细胞 N 0 50 0 70外周血液中可嗜酸性粒细胞 E 0 005 0 05见到的白细胞 嗜碱性粒细胞 B 0 0 01淋巴细胞 L 0 20 0 40单核细胞 M 0 03 0 08 血液中的五种白细胞形态 单核细胞 嗜酸性粒细胞 嗜中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 成人白细胞分类参考值 百分率 绝对值 X109 L 中性杆状粒核细胞1 5 0 04 0 5 中性分叶核细胞50 70 2 7 嗜酸性粒细胞0 5 5 0 5 5 嗜碱性粒细胞0 1 0 1 淋巴细胞20 40 0 8 4 单核细胞3 8 0 12 0 8 白细胞计数 参考值 成人 4 10 109 L婴幼儿 11 12 109 L新生儿 15 20 109 L白细胞总数的增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响 淋巴细胞数量的改变也会引起白细胞总数的变化 一 中性粒细胞 Neutroplilcell NE 中性粒细胞功能 NE具有趋化 变形 粘附 吞噬和杀菌等多种功能 在机体防御和抵抗病源菌侵袭过程中起着重要作用 临床意义 1 嗜中性粒细胞增多 生理性增多 年龄 新生儿较多 一般在15X109 L左右 个别可达30X109 L 3 4天后降至10X109 L 6 9周前主要以中性粒细胞为主 以后淋巴细胞逐渐增多 可达70 2 3岁后逐渐减低 到4 5岁后两者又基本相等 日间变化 活动后和进食后较高 早晨较低 下午较高 运动 疼痛和情绪的影响 妊娠与分娩 妊娠最后一个月波动于12 17X109 L之间 其他 吸烟者高于非吸烟者30 反应性增多急性感染或炎症严重的组织损伤和坏死急性溶血急性中毒急性失血恶性肿瘤 非反应性增多也叫异常增生性增多 见于骨髓增殖性疾病和粒细胞白血病 如急性髓细胞白血病 AML CML等 2 中性粒细胞减少某些细菌 结核 伤寒 病毒 流感 肝炎等 感染 某些血液病理化损伤单核巨噬细胞系统功能亢进 3 中性粒细胞核象变化 核左移 外周血中杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒 中幼粒等细胞轻度杆状核 5 轻度感染 抵抗力强 中度杆状核 10 严重感染 抵抗力强 重度杆状核 25 见于重度咸染或白血病 类白血病反应 核右移 中性粒细胞分叶5叶以上 3 见于营养性贫血 恶性贫血 应用抗代谢药后等 炎症恢复期可出现一过性核右移 疾病进行期突然出现核右移表示预后不良 中性粒细胞形态 二 嗜酸性粒细胞 Eosinopenia Eo 嗜酸性粒细胞 EO 的功能 EO与机体免疫状态有着密切的关系 可吞噬抗原抗体复合物 含抗体的红细胞 细菌 酵母细胞壁等 胞浆中的碱性蛋白还可分解寄生虫的幼虫 白细胞系统检验 临床意义 1 嗜酸性粒细胞增多见于 过敏性反应 如支气管哮喘 食物过敏等 寄生虫病如蛔虫 钩虫病等 某些血液病如M4EO CML等 2 嗜酸性粒细胞减少见于 某些感染如伤寒 副伤寒 应用肾上腺皮质激素后 白细胞系统检验 三 嗜碱性粒细胞 basophil Ba 嗜碱性粒细胞功能临床意义 增多见于CML 慢性溶血 脾切除后等 白细胞系统检验 四 淋巴细胞 lymphocytecell LC LC也源于骨髓造血干细胞 LC因发育和成熟的途径不同 可分为TLC和BLC两种类型 TLC约占血液中LC总数的50 70 其前体细胞依赖胸腺发育成熟 参与细胞免疫功能 寿命较长 可存活数月甚至数年 具有参加LC的再循环 加强免疫反应 散布记忆细胞 充实淋巴组织 使进入体内的抗原与机体反应细胞广泛接触等作用 白细胞系统检验 B LC约占血液中LC的15 30 其前体通过骨髓 胎儿期是在肝 发育成熟为BLC 参与体液免疫功能 寿命较短 仅存活4 5天 BLC经抗原激活后转化为浆细胞前体 浆细胞通过产生免疫球球蛋白在体液免疫中发挥重要的作用 白细胞系统检验 临床意义 1 淋巴细胞增多见于 某些细菌感染如百日咳 结核等 病毒感染如麻疹 传染单核细胞增多症等 某些白血病如ALL CLL 淋巴瘤等 组织移植后的排斥反应 2 淋巴细胞减少见于 应用肾上腺皮质激素 接触放射线以后 白细胞系统检验 五 单核细胞 Monocyte MO 与NE有共同的前体细胞粒 单核系祖细胞 CFU GM 有人认为CFU GM在低水平的集落刺激因子影响下 向MO系分化 经原单核 幼单核阶段发育为成熟的MO而进入血液 血液中的MO功能上还不成熟 在血液中仅逗留1 3天即逸出血管进入组织或体腔内 转变为巨噬细胞 形成单核 巨噬细胞系统 进入组织转变为巨噬细胞 在功能上才完全趋于成熟 白细胞系统检验 单核 巨噬细胞系统的功能主要有以下几个方面 诱导免疫反应 吞噬和杀灭某些病原体吞噬衰老 异常红细胞 清除损伤组织及死亡细胞抗肿瘤活性对白细胞生成的调节 白细胞系统检验 临床意义 1 单核细胞增多见于 某些感染如疟疾 黑热病 结核 亚急性细菌性心内膜炎及急性感染恢复期等 某些血液病如M5 M4等 2 单核细胞减少无临床意义 三 血小板系统检验 包括 PLT MPV PCT PDW及PLT直方图 一 血小板计数 PTL 血小板具有保护毛细血管完整性和很强的止血和凝血功能 它产生于骨髓造血干细胞 通过原巨 幼巨及颗粒型巨核细胞阶段后其胞质脱落形成血小板 初生成的血小板体积较大 粘着力强 易于聚集和发生释放反应 有很强的止血和凝血功能 老化的血小板大部分在脾 肝 骨髓的网状内皮系统破坏 其余在循环中破坏 Matureplatelet Bonemarrow Megakaryocyte 血小板系统检验 参考值 100 300 109 L 临床意义 血小板系统检验 血小板平均体积 MPV 参考值 11 15fl临床意义 MPV的临床意义要结合PLT变化才有价值 1 鉴别血小板减少的原因由于PLT生成减少者MPV减少 由于PLT破坏增多者MPV增高由于PLT分布异常者MPV正常 血小板系统检验 2 判断骨髓造血功能 MPV增高可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征 造血功能衰竭时MPV与PLT同时持续减少 血小板系统检验 血小板体积分布宽度 PDW 反映血小板体积大小的离散度 PDW正常表明血小板体积大小一致 PDW增大表明血小板体积大小悬殊 第二节凝血功能检测 抗凝机制 正常止血机能 两个方面 四个因素 凝血机制 血管壁 血小板 凝血系统 抗凝及纤溶系统 凝血与抗凝机制的病理生理基础 一 血管壁的作用 血管的止血作用表现为 血管的收缩 血小板的激活 凝血系统的激活 局部血粘度的增高 二 血小板的作用 血管受损vWF 血管性血友病因子 血小板黏附PLT聚集 FgPLT释放 5 HTADP 血管加速 加速 a使纤维蛋白收缩聚集形成网收缩 血小板止血功能 粘附 聚集在血管破损处 形成白色血栓 释放活性物质 促进血小板聚集 增强血管收缩 促进凝血过程 血块收缩 形成稳固血栓 维持血管壁的完整性 毛细血管的通透性 三 凝血因子与凝血过程 血液由流动状态变为凝胶状态称血液凝固 是由一系列凝血因子参加的 复杂的酶促反应和分子聚合过程 凝血因子 纤维蛋白原 凝血酶原 组织因子 钙离子 易变因子 不存在 稳定因子 抗血友病因子 Christmas因子 Stuart Power因子 血浆凝血活酶前加速素 Hegeman因子XIII纤维蛋白稳定因子PK激肽释放酶原HMWK高分子量激肽原 目前公认的凝血因子共14个 按罗马字命名的有12个 以及高分子量激肽原 HMWK 激肽释放酶原 PK 大多数由肝脏产生 其中II VII IX X合成依赖于Vitk 称Vitk依赖因子除TF外 都存在于血浆 除FIV Ca2 外 均为蛋白质 正常情况下 所有因子都处于无活性状态 分为三个阶段 两个途径 内源性 外源性 第一阶段 凝血酶活酶形成第二阶段 凝血酶形成第三阶段 纤维蛋白形成 XII XI IX VIII III VII X V II I 血液凝固 内源凝血途径 外源凝血途径 共同凝血途径 IIaCa2 VIIIVIIIaIIIPlt PF3Ca2 IIaXaVVaCa2 正常凝血过程 瀑布学说 PF3 磷脂 凝血酶原 II 凝血酶 IIa 纤维蛋白原 I 可溶性纤维蛋白稳固性纤维蛋白 内源性途径 胶原等带负电荷表面 HMWKK XIIXIIa 外源性途径 组织损伤释放 组织因子 III XIXIa IIa IXaXIIa K IXIXa VIIaVII XIIIXIIIa 参加因子 XXa VIII IX XI XIIV X II IIII VII Ca2 PF3 Ca2 IIa HMWK PKK 激肽释放酶 激肽释放酶原 四 正常抗凝系统 细胞抗凝机制 单核 巨噬细胞肝细胞 吞噬清除 凝血过程有关物质和产物 五 纤维蛋白溶解系统的作用 外激活途径 纤溶酶原激活物t PAu PA aK a 内激活途径 纤溶酶原纤溶酶PL纤溶酶抑制物 水解 X 纤维蛋白及纤维蛋白纤维蛋白原降解产物D D等 t PA 组织型纤溶酶原激活物 u PA 尿激酶型纤溶酶原激活物 K 激肽释放酶 PLG 最重要的生理性抗凝系统 血小板聚集 止凝血障碍的实验室检查 检查目的 止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测溶栓治疗效果判断术前检查 标本采集 病人准备 药物影响 抗凝药 抗血小板药 溶栓防栓药 如避孕药 抗凝 抗凝剂 109mmol L枸橼酸钠1 9试管 真空抗凝管 塑料试管注意事项 采血顺利 混匀充分 立即送检 2h完成 血管壁检测 出血时间测定将皮肤毛细血管刺破后 血液自然流出到自然停止所需的时间称为出血时间 BT 主要反映血管壁和血小板相互作用高度怀疑血管因素异常时才做 参考值 BT测定器法6 9 2 1min 9min为延长 意义 BT延长 血小板明显 50 109 L 血小板功能异常 血小板无力症或药物影响 如阿斯匹林 潘生丁 血管壁异常 遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子 血管性假性血友病 VWD DICBT缩短某些严重高凝状态或血栓性疾病 血小板检测 血小板计数血小板平均容积 MPV 和血小板分布宽度 PDW 测定 参考值 MPV为7 11fL PDW为15 17 临床意义 MPV增加 血小板破坏增加而骨髓代偿功能良好者 MPV增加是造血功能恢复的首要表现 MPV减低 骨髓造血功能不良 血小板生成减少 MPV随血小板数持续下降 是骨髓造血功能衰竭的指标之一 有半数白血病患者MPV减低 PDW增高 表明血小板大小悬殊 见于AML 巨幼贫 CML 脾切除 巨大血小板综合征 血栓性疾病等 PDW减低 表明血小板的均一性高 无临床意义 临床应用 主要凝血试验 活化凝血酶原时间凝血酶原时间纤维蛋白原测定凝血酶时间D D二聚体FDP 活化部份凝血活酶时间APTT 是反映内源性凝血途径中VIII IX XI XII因子水平的实验 APTT只反映因子水平 并不反映凝血因子是否活化 反映内源凝血的筛选实验 参考范围32 43秒 受检者较正常对照值延长10s以上才有意义 白陶土 接触因子激活剂 部分凝血活酶 脑磷脂 Ca2 凝固时间 血浆 APTT的临床意义 APTT延长 和 因子中某一项或几项因子水平缺乏 血友病甲 血友病乙 当凝血酶原 纤维蛋白原及因子V X缺乏时 但敏感性略差 如肝脏疾病 肝硬化DIC后期继发纤溶亢进时 血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高 肝素治疗的监护 一般在肝素治疗期间 APTT维持在正常对照的1 5 2 5倍适宜 均需测血小板计数 使其维持在正常范围内 若低于50 109 L需暂时停药 溶栓治疗时 ATPP与PT TT应将值控制在正常值的2倍 APTT缩短 见于血液呈高凝状态 DIC早期 血栓前状态 血栓性疾病 凝血酶原时间PT 反映外源性凝血途径中II V VII X因子水平的实验 反映外源凝血的筛选实验 参考范围平均值为 12 1 s 超过正常对照值3s为异常 凝固时间 血浆 组织凝血活酶 含TF Ca2 PT的临床意义 PT延长 先天凝血因子异常 如I II V VII X因子中某一项或几项因子水平缺乏 可用于外源凝血因子缺陷的筛查 后天凝血因子缺乏 如肝脏疾病 肝硬化 大多数凝血因子由肝脏合成 维生素K缺乏 可见于阻塞性黄疸 可用作肝脏蛋白质合成功能的检测手段 DIC后期 由于大量消耗和产生的FDP拮抗凝血酶的作用使PT延长 因此可用作DIC的检测 口服抗凝药 可密定 华法林 PT最敏感 PT缩短 高凝状态 DIC早期 心梗 脑血栓形成 深静脉血栓形成 口服避孕药 PT时间缩短 但并不常见 1 凝血酶原时间比值 PTR PTR PT受检 PT对照参考值为0 85 1 152 国际标准化比值 INR WHO规定口服抗凝剂患者的报告方式 INR PTRISI 参考值为0 1 血浆纤维蛋白原测定Fg 参考值 2 4g L 意义 减少 1 先天性纤维蛋白原缺乏症 原发性Fg减少 原发纤溶2 DIC晚期 消耗过多 3 严重肝病增高 1 高凝状态 血栓性疾病 急性炎症 手术创伤 恶性肿瘤等 Fg是急性时相蛋白 2 生理性 部分正常老人 妊娠晚期 凝血酶时间TT反映共同途径是否存在抗凝或纤溶亢进 血浆 凝固时间 标准凝血酶 参考范围 16 18秒 以超过正常对照3秒以上为有病理意义 TT的临床意义 TT延长1 血浆纤维蛋白原水平低下 如低 无 纤维蛋白原血症 异常纤维蛋白原血症等 FIB减少时TT延长 2 循环中有抗凝血酶活性增高 如FDP存在 高肝素血症 抗凝血酶 活性增高等 3 肝硬化 肝肿瘤 DIC 异常抗凝物质增多 TT缩短较罕见 异常纤维蛋白血症 巨球蛋白血症可缩短 无特别临床意义用链激酶 尿激酶作溶栓治疗时 可用TT作为监护指标 以控制在正常值的2 5倍为宜 纤维蛋白降解产物 FDP 参考范围 5mg L意义 1 FDP增高 是体内纤溶亢进的标志 但不能鉴别原发性和继发性纤溶亢进 2 可作为血栓形成的观察指标 D 二聚体 参考范围 D 二聚体 300 g L 视为病理状态 表明体内存在着频繁的纤维蛋白降解过程 一般D 二聚体 500 g L时 就可以确定有血栓形成 D 二聚体水平增高 见于继发纤溶症 作为鉴别原发性与继发性纤溶症的重要指标 其水平升高多见于深静脉血