骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化及其在细胞移植中的应用.pdf

中国组织 工程研 究与临床康 复 2眷 3筋 2 0 0 8 0 1 1 5出版 J o u r n a l o fC l i n i c a l R e h a b i l i t a t i v e l s s u eE n g i n e e r i n g R e s e a r c h J a n u a r y1 5 2 0 0 8 V o 1 1 2 N o 3 骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化及其在细胞移植中的应用 王新生 崔慧先 Di ffe r e n t i a t i o n o f me s e n c h y ma l s t e m c e l l s i n t o n e ur o n l i k e c e l l s a n d t h e a p p l i c a t i o n i n c e l l t r a n s p l a n t a t i o n Wa n g Xi n s h e n g Cu i Hu i x i a n Ab s t r ac t BACKGR0UND M e s e n c h y m a l s t e m c e l l s e x i s t i n b o n e ma r r ow s t r oma a n d c an d i f f e r e n ti a t e i n t o t h r e e b l as t o d e r mi c t y p e c e l l s OBJ ECTI VE I n t h i s p a p e r t h e l a s t e d p r o g r e s s i n the b i o l o g i c a l c h a r a c t e ris t i c s an d the me c h an i s m o f i n d u c i n g the me s e nc h y ma l s t e m c e l l s d i f f e r e n tia tio n t o n e u r o n l i k e c e l l s a n d山e c e l l s t r an s p l a n t a tio n i n r e c e n t y e a r s we r e re v i e wed RETRI EVAL S TRATEGY A c o mp u t e r b a s e d o n l i n e s e arc h o f P UBM ED wa s un d e r t a k e n t o i de n t i f y山e r e l e v an t a r t i c l e p u b l i s h e d b e t we e n l 9 9 9 a n d 2 00 7 wi 山 山e k e y wo r d s o f b o n e me s e n c h y ma l s tem c e l l s i n En g l i s h Me anwh i l e 山e r e l e v an t a r t i c l e s p u b l i s h e d f r o m l 9 9 9 t o 2 0 0 7 we r e s e arc h ed i n Ch i n a J o ur n al F ul l t e x t Da tab a s e wi th t h e s a r fl e k e y wor d s i n Ch i n e s e Th e l i t e r a t u r e s we r e s e l e c t e d p rima r y an d t Il e c i tat i o n o f e a c h a r t i c l e wa s I o ok e d u p I n c l u s i v e c ri t e ria a r t i c l e s r e l a t ed t o 山e p r e s e n t d e v e l o p me n t o f me s e nc h y ma l s t e m c e l l s an d山e me c h an i s m o f i n d uc i n g 山e me s e nc h y ma l s t e m c e l l d i f f e r e nt i a tio n t o n e u r a 1 1 i k e c e l l s an d the c e l l s tra n s p l an tat i o n we r e i nc l u d ed Ex c l u s i v e c r i t e r i a Ob s o l e s c e n t l i t e r a t u r e s o r r e p e t i tiv e s t u di e s we r e e x c l u d ed LI TERATURE EVALUAT1 0N Amo ng 2 3 0 c o l l e c t e d a r t i c l e s 7 2 we r e s e l e c t e d a c c o r di n g to 山e i n c l u s i v e c rit e ria a n d l 5 8 o l d o r r e pet i t i v e o n e s we r e e l i mi n a t e d F i n all y 2 9 a r t i c l e s w e r e ana l y z e d i n v o l v i n g山e i s o l a t i o n c u l t u r e i d e n t i f i c a t i o n 8 a r t i c l e s mec h a n i s m andd i f f e r e n ti a ti o n 1 7 a r t i c l e s an d tr an s p l antat i o n 4 a r t i c l e s o f me s e n c h y ma l s t e m c e l l s DATA SYNTHES I S At p r e s e n t t h e c y t o b i o l o g i c a l an d mol e c u l ar me c h an i s ms of me s e n c h y ma l s t e m c e l l s a r e s t i l l u n c e r t a i n b ec a u s e o f l a c k i n g o f s pe c i fic mark e r s o f me s e n c h y ma l s tem c e l l s an d man y p r o b l e ms s u c h a s h o w t o i n d u c e the m e s e n c h y ma l s t e m c e l l s t o d i f f e r e n t i a t e i n t o n e e d ed c e l l s or t i s s u e s 山e tran s p l an tati o n an d o n c o g e ni c i t y s t i l l n e e d f u r t h e r i n v e s t i g a t i o n Re c e n t l y man y res u l t s h a v e b e e n a c h i e v ed s u c h a s 山e i n d u c ed me 山o d s o f me s e n c h y ma l s t e m c e l l s d i f f e r e n t i a t i o n i n to n e u ro n l i k e c e l l s an d i t s mech ani s ms and the me s e n c h y ma l s t e m c e l l tr ans p l antat i o n t o c u r e n e r v e i n j u r y C0 NCLUS1 0N M e s e n c h y m a l s t e m c e l l s are e a s i l y t o o b t a i n a n d c u l t i v a t e wi 山 h y p o i mm u n og e n i c i t y Th e ref or e me s e n c h y ma l s t e m c e l l s h a v e b e e n g e n e r a l l y a p p l i e d i n c e l l th e r a p y an d g e n e the r a p y f o r c l i n i c a l d i s e a s e s a s a n i d e a l v e c t or W an g XS Cui HX Di f f e r e n tia tio n o f me s e n c h y ma l s t e m c e l l s i nt o n e u r o n l i k e c e l l s an d t h e a p p l i c a t i o n i n c e l l tr ans p l antat io n Z h o n g g u o Z u z h i Go n g c h e n g Y anj i u y u L i n c h u ang Kang f u 2 0 0 8 1 2 3 5 2 3 5 2 6 Ch i n a W WW z g l c k f c o m z g l c k f e j o u r n a l u p fi l e s 0 8 3 3 k 5 2 3 p s p d O 摘要 学术背景 骨髓 间充质干细胞主要存在 于骨髓基 质中 具有 横向分 化潜 能 在适 当的条件下可 以向 3个胚 层的细胞进 行分 化 目的 文章就骨髓 间充质 干细胞 生物学特性 神经元诱导分化及其机制 细胞移植方面 的最新进展进行综述 检 索策略 应用计算机检 索 P u b Me d 1 9 9 9 2 0 0 7年相关文章 检索词 为 b o n e ma r r o w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s 并限定文章 语言种类为 E n g l i s h 同时计算机检索 中国期刊全文数据库 1 9 9 9 2 0 0 7年相关文章 检索词 为 骨 髓间充质干细胞 并限 定文章语言种类为 中文 对资料进行初审 并 查看每 篇文章后的引文 纳 入标准 文章所述 内容与骨髓 间充质 干细胞的发 展现状及神经元诱导分化及机制和移植研究相关 排 除标准 重复研 究或较 陈旧的文献 文献评价 共 收集 到 2 3 0篇相关 文献 7 2篇文献符合纳入标准 排 除的 1 5 8篇文献为内容陈旧或重复文献 选取 2 9篇文献 进行分析 分别涉及骨髓间充质干细胞 的分离培养和鉴定 8篇 神经元细胞方 向分化及其机制 1 7篇 细胞移植治疗各种神 经损伤 的实验研究 4篇 资料综合 由于尚未找到骨髓 间充质干细胞特 异性标记物 其在 体内的细胞生物学和分子 生物 学作用机制仍不清 楚 如何 限定 体内外诱导条件使其 向所 需细胞或 组织 定 向分化 以及移 植时机 是否具有致瘤性等 问题 尚需深入研究 但近 来在骨 髓 间充质干细胞 向神经细胞方 向分化 的诱 导方法 和机制 以及骨髓间充质干细胞移植治疗神经损伤方面取得很 多成果 结论 骨髓 间充质干细胞具有 易获得 易培养 低免疫原性 等特 性 已成为具有细胞治疗和 基因治疗临床疾病潜在实 用价 值 的有 效载 体 关键词 骨髓 间充质干细胞 诱导分化 移植 基因治疗 王新生 崔慧先 骨髓 间充质 干细胞 向神经 元样 细胞的分化及其在细胞移植中的应用 J J 中国组织工程研究 与临床康 复 2 0 0 8 1 2 3 5 2 3 5 2 6 www z g l c k f c o m z g l c k f e j o u ma l u p fi l e s 0 8 3 3 k 5 2 3 p s p d f 0 学术 背景 骨髓间充质干细胞存在于骨髓基质中 能 自我增殖 其一 方面为造血 干细胞提供 物理 支 持 并且分泌多种生长因子和细胞因子来控制 造血干细胞的成熟和分化 另一方面具有横向 j s s N 5 7 3 8 2 25 cN 2 i i 5 3 铆 CoDEN ZL XHAH 分化的潜能 在适当的条件下可以向3 个胚层的 细胞进行分化 如 外胚层来源的神经细胞 中 胚层来源的骨 软骨 心肌细胞以及内胚层来源 的肝细胞等 由于其来源丰富 取材容易 以及 其 巨大的分化 潜 能 并 且避免 了伦 理方 面的 冲 突 因此 在干细胞移植治疗难治性疾 病的研 究 中 骨髓 间充质 干细胞成 为 了研 究热点 Ex pe r i me nt a l Ce n t e r He b ei No r t h Un i v e r s i t y Z h a n 由i a k o u 07 5 O x He b e i P r ov i n c e Chi na De pa r t me n t of Ana t o my He b e i M e d i c a l Uni v e r s i t y S h i j i a z h u a n g 05 0 0l 7 He b e i P r ov i n c e Chi na Wa n g Xin s la e n g S t u d yi n g f o r d 0 c t 0 眦 As s o c i a t e p r o f e s s o r E D ai 嘲 忸l C 慨 He b e iN0 I 廿 IUn i v an i t y 2 a n g j ia k o u 0 7 5 0 0 0 He b e i P r o v i n c e Ch i n a wx i n s h e n g1 9 6 8 s l n a eom Cor r e s p on d e nc e t o Cu i Hu i x i an Doc t or P r o f e s s or Tu t o r o f do c t or De pa r t m e nt of An a t o my He b e i M e d i c a l Uni ve r s i t y S h ij i a z h u ang 05 0 0l 7 He b e i P r ov i n c e Ch i na c u i h x f y a h o o n c n Re c e i ve d 2 0 0 7 0 9 28 Ac c e p t e d 2 0 07 1 0 1 9 河北北方学院实 验中心 河北省张 家 口市0 7 5 0 0 0 河北医科大学解 剖教研室 河北省 石 家 庄 市 0 5 0 0 1 7 王新 生 男 1 9 6 8 年生 河北省景县 人 汉族 河北 医 科 大学在读博士 副教 授 i 要从事成体干 细胞与神经再生方 面的研究 wx i n s h e n g l 9 6 8 通 讯作者 崔慧 先 博士 教授 博士生导师 河北 医科 大学解剖教 研 室 河北省石家 庄 市0 5 0 0 1 7 c u i h x f y a h o o C om C n 中图分类 号 R 3 9 4 2 文献标 识码 A 文章编 号 1 6 7 3 8 2 2 5 2 0 0 8 0 3 0 0 5 2 3 0 4 收稿 日期 2 0 0 7 0 9 2 8 修回 日期 2 0 0 7 1 0 1 9 0 7 5 0 9 5 3 2 I G W Q 5 23 维普资讯 w w w z g l c k fc o m i裁 等 骨髓 阚充磺干细匏向神经 7 L 样细泡的分他技其 缅瞧穆掖 的 1 目的 文章 就骨髓间充质干细胞生物学特性 神经元诱导 分化及其 机制 细胞移植 方向的最新研 究进展 综述 2 材 料和方法 2 1 资料检索 应用计 算机检 索P u b Me d l 9 9 9 2 0 0 7 年 相关文章 检索词为 b o n e ma r r o w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s 并限定文章语言种类为E n g l i s h 同时计算机检 索中国期刊全文数据库1 9 9 9 2 0 0 7 年相关文章 检索词 为 骨髓间充质干细胞 并限定文章语言种类为中文 对资料进行初审 并查看每篇文章后 的引文 纳入标 准 文章所述 内容应与骨髓间充质干细胞的发展现状 及 神经元诱导 分化及机制 和移植研 究相 关 排 除标 准 重复研究或较陈旧的文献 2 2检索方法共 收集到2 3 0 篇相 关文献 7 2 篇文 献符 合 纳入标准 排除的1 5 8 篇文献为内容陈旧或重复文 献 选取符 合 纳入标 准的2 9 篇文 献进 行分析 分 别涉 及骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定8 篇 J 墙 l 神经元 细胞 方向分化及其机 制 1 7 篇 9 2 5 1 细胞移植 治疗各种 神 经损 伤的 实验研 究4 篇 1 3综合评价 3 1 骨髓间充质干细胞的生物学特性 骨髓 间充质 干细 胞 是较 早被认 识 的戍体 干细胞 之一 曾 因其形 状呈成 纤维细胞样最初被称为 戍纤维细胞克隆形成单位 或骨髓基质成纤维细胞 由于具有支持诱导造血干细 胞分化的功能 被称为骨髓基质细胞 因有 多向分化 潜能 被称为骨髓基质来源的干细胞等 体外培 养的骨髓 间充质干 细胞具有贴壁生长特 性 原代培养时细胞形态表现为圆形 大小不一 随 着培 养时间的延长 细胞 出现突起 经传代后细胞形 态似梭形或戍纤维细胞样 呈集落或旋涡形生长 流 式细胞仪检测结果表明 体外培养的细胞大多数处于 G o G 期 电镜观 察可 见 细胞 呈长梭 形 胞核 大而 呈 卵圆形 位 于胞 体 中央 为常 染 色质 核仁 明显 细胞 内存在许多发育 良好 结构正常的细胞器如 线 粒体 内质 网 高 尔基 体 和 大量 的游 离核糖 体 胞 浆 内有 大量的 内质 网池 空泡和溶 酶体 扩 张的 内质 网 池 内可见类脂类物质 细胞外周存在许 多细小纤维束 大量胶原纤维从细胞伸出 构成 了一个精细的网状纤 维 网络 1 在骨髓 间充质 干细胞表面表达 多种表面抗原如 S H2 S H3 CD2 9 CD4 4 CD71 CD9 0 CD1 0 6 52 4 C D1 2 0 a C D1 2 4 等 另外 细胞表面还表达多种细胞 因子 和生长 因子 受体如I L 1 R I L 3 R I L 4 R I L 6 R I L 7 R LI F R S CFR G CSF R I FN v R TNFI R TNF I I R TGF p I R TNF D I I R b F GF R P DGF R EGF R 等 但其不表达造血干细胞的特异性标记物如 脂 多 糖 受体C D1 4 C D3 4 白细 胞表 面抗 原C D 4 5 C D1 l b 等口 l K a w a n o 等I 6 研究结果表明 在骨髓间充质干细 胞 细胞膜 上 存 在C a z 通 道 S O C s 和v OC C s 以及I n s P 3 受 体 I I I I I I 型和 D HP 受体 O 1 A和 O 2 A型 C a z 释放 由I n s P 3 R S 调 节 而C a 2 穿过 细胞膜 主 要 通 过S O C s 通 道 另有一 小部分通 过VO C C s 在基 因水平 骨髓问充质干细胞可表达多胚层的 基因 Wo o d b u r y 等 研 究了未分化的间充质干细胞具 有代表性的基因谱 系的表达 结果显示 表达的基 因 不仅限于中胚层 系列 而是 包括所有胚层的代表基 因 骨髓间充质干细胞的分 离培养和鉴定仍是亟待解 决的问题 由于尚未找到其特异性标记物 所以其分 离的方 法主要有 密度梯 度 离心 法 差速 贴 壁 筛选 法 免疫磁珠分选法和流式细胞仪分选法 或者多项方法 结合来完成 在培养方面 由于骨髓 间充质干细胞具 有的干细胞特性 生长旺盛 常规细胞培养条件即可 满足要求 但有研究显示血清量的多少 可导致细胞 周期发生 变化 从 而影响 细胞增殖 I 8 l 另外 如何控制 或降低在培养传代过程中出现的 自然分化现象 也是 需要进一步研究的问题 而骨髓间充质干细胞的鉴定 主要靠细胞形态似成纤维样细胞 贴壁生 长 具有 多 向分化潜能等特征来推定 3 2 骨髓 间充质 干细胞 体外诱 导分化 为神经元 的进展 近 年来 随着wlo o d b u r v 等 9 1 使用 p 巯基 乙醇或二甲基亚 砜和丁羟茴香醚等体外诱导骨髓 间充质干细胞向神经 元样 细胞 的分化 同时表达神经元特异性烯醇酶 神 经 元核抗原 和神经微丝 一 M等神经细胞标志物 很多研 究小组开展了这方面的研究 并取得 了很 多成果 1 0 1 2 1 L e i 等 则分别比较 了p 巯基 乙醇 无血清培养和小鼠 胚胎脑星形胶质细胞共培养等3 种 方式处理后的诱导 特点 3 种诱导方式均可导致骨髓间充质干细胞表达神 经元核抗原或者GF AP 等标志物 且具有典型的形态学 改变 但表型出现差异 无血清培 养时 细胞向神经 元样 细胞分化 表达神 经元标志 物神经 元核 抗原 p 巯基 乙醇 可促 进该 进程 而 小 鼠胚 胎脑 星形胶质 细胞 共培养后 细胞则表达G F A P 说明依据不同诱导条件 骨 髓 间 充质 干 细胞 在 体 外展 现 出可 塑 的神 经 分 化 潜 力 C h a i 等I l 1 通过使用B N D F F o r s k o l i n 和多巴胺诱导 骨髓间充质干细胞 向多巴胺能神经元分化 通过 高效 液相监 测到 多巴胺递质 的释放 近来对 中药诱导骨髓间充质干细胞的研究也取得 了很大进展 如 使用丹参 黄芪 地黄多糖 枸杞 P o B o x 1 2 0 0 S h e n y a n g 1 1 0 0 0 4 k f 2 3 3 8 5 0 8 3 s i n a c o rn 维普资讯 I 瓤 生 等 骨 髓 阚 充 质 于 细 胞 向 神 经 元 样 细 胞 的 分 化 瑟 其 在 细 瞻 移 植 中 的 瘟 国 7 W W W z P fc c m 多糖 龟板 黄连素 黄芩甙 麝香 多肽 仙茅等单 方药或其提取物可诱导骨髓间充质干细胞向神经元样 细胞分化 并表达n e s t i n 神经元特异性烯醇酶 N F 神经元核抗原 G F A P 等多种神经干细胞或神经细胞的 特异性标志物 至于为什 么这些中药具有诱导作 用 尚无明确的结论 现代药理学的一些实验结果表 明 上述药物多具有抗氧化 清除氧 自由基 对损伤 的神经细胞具有保护作用 提 高人体免疫力等作用 提 示上述 药物 的诱 导作 用可 能和 药物 的抗 氧 化作 用有 关 这与人们分析认为 在 D一 巯基 乙醇诱导骨髓间充 质干细胞分化为神经元过程 中 主要与其抗氧化作用 有 关 的观点基 本一致 3 3 骨髓 间充质干细胞诱导分化机制的研究进展 近 年 来 许 多研 究小组对诱 导骨 髓 间充质 干细胞 向神 经元 分化 的机制也进行 了大量地研宄 Y a g h o o b i 等 2 使用 R T P CR技 术监 测 了Na n o g Oc t 一 4 Ne u r o D Cy c l i n D1 的表达 N u c l e o s t e mi n 是一种p 5 3 结合蛋白 位于胚胎 干细胞细胞核 内 在成人组织的终末分化细胞不表达 被认 为在维持干细胞 自我更新方面发挥作用 在未分 化骨髓间充质干细胞可见Nu c l e o s t e mi n 的高表达 在诱 导分化后 其表达显著减少 在诱导6 h 后探测不到其 表 达 与其相伴 随 细胞 开始 出现N F M N F H MA P 2 s y n a p t o p h y s i n 神经元特异性烯醇酶等基因的 转录和表达 在分化过程中 N e u r o D和C y c l i n D1 表达 也逐渐降低 但速度慢于Nu c l e o s t e mi n 而在分化前后 始终未监测到N a n o g 和Oc t 4 的表达 推 N u c l e o s t e mi n 在管理骨髓间充质干细胞 自我更新 方面发挥作用 E g u s a 等 2 通过比较骨髓 间充质干细胞向骨分化和神 经方向分化过程中相 关基 因的转录和表达 发现在未 分化骨髓间充质干细胞有控制神经细胞和成骨细胞表 型的基因的转录 同时可见有神经细胞蛋白T r k A 和 D t u b u l i n l I I 的表达 但梭形的胞体并没有显示神经细胞 和成骨细胞的形态特征 在向神经元诱导分化后 可 见清晰的神经元样突起 并且神经细胞蛋 白T r k A和 D t u b u l i n l I I 的表达阳性 但在向成骨细胞分化过程中 没有神经细胞蛋白的表达 作者还通过DN A 微点阵技 术检测 了5 8 个细胞外基质基 因和骨相关基因以及9 6 个 管家基 因 结果显示在成骨分化过程 中 细胞外基质 基 因和骨相关基因上调 相反在经历神经元方向分化 过程中 这些基因保持沉默 推测在分化进程 中一些 冗余的基因簇 的沉默可以导致某些表型的抑制 从而 达到诱导要求 J e o n g 等 通过D NA 微点阵技术以外周 血来源的单核细胞为基线 使用基因差异表达分析方 法 在转录水平对人骨髓间充质干细胞基 因组进行 了 综合的分析研究 结果显示 虽然试验选用的骨髓间 充质干细胞的基因背景差异很大 但在基 因表达方面 却高度相似 而与单核细胞相比 有2 2 7 3 种基因被认 l s s N l 6 7 3 8 2 2 5 CN 21 1 5 3 9 R coDE N ZL KHAH 为是与骨髓 间充质干细胞相 关的分子标记 在这些基 因中 有l 6 个基 因与人胚胎干细胞高度 重叠 有2 0 个 基因与造血干细胞高度重叠 这些有限的重叠的干细 胞分子标记表明每一个干细胞类型可表达一个独特地 基 因系列并管理着它的核心机能 分析实验结果 作 者认为有9 2 种基 因可以看作骨髓间充质 干细胞的分子 标记 其 中7 1 种 已经明确 根据 其蛋 白产物 的亚 细胞 定位 和机 能可 分 为9 个类 型 胶原 其他 细胞 外 基质 蛋 白 细胞 外基质 生发 因子 细胞 因子和 生 长因子 膜 内在蛋白 转录因子 核蛋白 细胞骨架相关蛋白 胞浆 内蛋白 另外2 1 种 尚不清 楚 其 特 征 其 中9 种 可 确 定 为 t w o l y s y l o x i d a s e s I MAGE 2 6 2 0 6 0 a n d I MAGE 3 1 0 4 7 4 t y p e I I I fi b r o n e c t i n KI AA 1 8 6 6 I GF BP 4 p p 9 9 7 4 I GF 2 一 a s s o c i a t e d p r o t e i n I MAGE 2 2 2 4 0 2 2 n u c l e a r f a c t o r I X I MAGE 1 9 1 2 8 3 5 C0L 4 Al I MAGE 2 6 3 7 1 6 MMP 2 DKF Z p 4 3 4 B 1 4 7 P L AC9 U I l B C l p a s i a 一 0 2 0 U I 其他 l 2 种 尚 未确 定 上述 研 究结果为可为管理骨髓间充质干细胞核心特征的分 子机制研 究提供便 利 3 4 骨髓间充质干细胞移植治疗各类神经损伤的研究进展 人们对骨髓间充质干细胞移植治疗各类神经损伤也进 行 了大量的研 究和 尝试 并取得 了很 多成 果 为干 细 胞移植治疗奠定了基础 Ma h mo o d等 2 6 1 通过静脉注射 3 种剂量 的骨髓 间充质干细胞来观测缺血性 大脑皮质 损伤大鼠的恢复情况以及骨髓 间充质干细胞的分布情 况 静脉注射3 个月后 大鼠的功能恢复显著好于对照 组 组 织切 片可 见骨髓 间充质 干 细胞 大量分 布 于损 害 区边缘 免疫组化结果显示该区域脑源性神经营养因 子的表达显著增加 但是神经生长因子没有 改变 以 上情况的改 变随注射剂量 的增加 而有显著的提 高 K a ma d a等1 结果表明骨髓间充质干细胞的植入可促 进脊髓损伤的轴 突再生 在脊髓损伤的治疗中潜力巨 大 L i u 等 2 8 1 通过 大脑中动脉闭塞导致脑缺血 大鼠模 型 研究了骨髓间充质干细胞移植治疗对皮质脊髓柬 c o r t i c o s p i n a l t r a c t C S T 和皮质 红核 束 c o r t i c o r u b r a l t r a c t C R T 的影响 结果显 示 经骨髓 间充质干 细胞 移 植治疗后 机能恢复方面实验组明显好于对照组 通 过 荧光 示踪剂D i I 标记显 示 移 植治 疗4 周后 C R T密度 明显高于对照组 且与功能恢复高度相关 C S T 腹侧束 生 出的轴 突数 量和 长度远 多 于对 照 组 统 计结 果显 示 白质中轴 突萌生与骨髓间充质干细胞移植治疗提高的 机 能恢复的相 关性具有统计学意义 另外 骨髓间充 质干 细胞 移植组 的 生长纤 维 中可 见 明显增 多的 轴 突分 支 免疫组化显示骨髓 间充质干细胞 移植组脊髓前角 s y n a p t o p h y s i n 和P S D 5 0 的表达高于对照组 且表达升 高程度与被骨髓间充质干细胞提升的功能恢复呈高度 52 5 维普资讯 w w w z g l c k f c o rn 主藏生 等 肯髓闯充质于细魄向神经元样细魄的分化爱其在细融移植中的瘟霸 正相 关 提 示骨髓 间充质 干 细胞 的移 植可 促进 轴 突的 萌生和促进脑缺血损伤后机能的恢复 C h e n 等 9 l通过 手术切段 坐骨神经大鼠模型观察骨髓间充质干细胞的 移植治疗效果 骨髓间充质干细胞的移植使用2 明胶 作 为支持物 坐骨神 经再生 的机 能评价 采 用s c i a t i c f u n c t i o n i n d e x S F I 表达 术后1 0 周 骨髓间充质干细 胞移植组的坐骨神经损伤诱导的腓肠肌重量下降状况 明显 改善 可记 录到肌 动作 电位 受损 的传导 潜伏 期 改善 大体检查见骨髓间充质 干细胞移植组神 经组织 再生多于对照组 但具有相似的超微结构 We s t e r n b l o t 结 果 示N F L MB P 表 达增 强 R T P C R示P 0 P MP 2 2 转录增加 各种营养因子如 P 0 P MP 2 2 N GF B D N F G DN F C N T F 在骨髓间充质干细胞移植组的表达明显 高于多照组 以上结果提示骨髓间充质干细胞移植可 促 进 坐骨神 经再 生 包括轴 突生 长和髓 鞘形 成 其机 制可能与骨髓间充质干细胞移植后的再生组织中的各 种神经营养因子高表达有关 4结论 许 多难 治性 疾病如 帕金 森病 老年 性痴 呆和 一 些 神经损伤的治疗和康复始终是 困扰 医学界的难题 而 干细胞的研究成果为其治疗提供 了更多的方法和途 径 但 骨髓 间充质 干 细胞 移植 进入 临床 实验将还 将 面 临很多的问题 如何快速获取 高纯度 的骨髓间充质干 细胞 如何避免或减少在体外扩增过程 中细胞的 自然 分化 通 过何 种 方 式移 植进入 体 内后 可以 获得 更好 的 治疗效果 如何增加移植细胞的成活率和分化效率 移植细胞的致瘤性等 5 参考 文献 2 3 4 6 7 8 9 5 26 J i n HF Ku ma r BM Ki m J G e t a 1 E n h a n c e d d e v e l o p me n t o f p o r c i n e e mb r yo s c l o n e d f r o m b o n e ma r r o w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s I n t J De v Bi o l 2 0 0 7 5 l 1 8 5 9 0 T a g a mi M I c h i n o s e S Y a ma g a t a K e t a 1 Ge n e t i c a n d u l t r a s t r u c t u r a l d e mo n s t r a t i o n o f s t r o n g r e v e r s i b i l i t y i n h u ma n me s e n c h y ma l s t e m c e l 1 Ce l l Ti s s u e Re s 2 0 0 3 3l 2 1 3 1 4 0 M i n g u e l l J E r i c e s A Co n g e t e t a 1 M e s e n c h y ma l s t e m c e l l s E x p Bi 0 J Me d 2 0 0l 2 2 6 6 5 07 5 2 0 P i t t e n g e r M M a c k a y AM Be c k S C e t a 1 M a r s h a k mu l t i l i n e a g e p o t e n t i a l o f a d u l t h u ma n me s e n c h y ma l s t e m c e l l s S c i e n c e l 9 9 9 2 8 4 5 4l 1 l 4 3 l 4 7 Co n g e t P A M i n g u e l l J J P h e n o t y pic a l a n d f u n c t i o n a l p r o p e i e s o f h u ma n b o n e ma r r o w me s e n c h y ma l p r o g e n i t o r c e l l s J Ce l l P h y s i o l l 9 9 9 l 8 l 1 1 6 7 7 3 Ka wa n o S Sh 0 I i S I c h i n o s e S e t a 1 Ch a r a c te r i z a t i o n o f Ca 2 s i g n a l i n g p a t h wa y s i n h u ma n me s e n c h y ma l s t e m c e l l s Ce l l Ca l c i u m 2 0 0 2 3 2 4 l 65 1 7 4 W o o d b u r y D Re y n o l d s K Bl a c k I B Ad u l t b o n e ma rro w s t r o ma l s t e m c e l l s e x p r e s s g e r ml i n e e c t o d e r ma l e n d o d e r ma l a n d me s o d e r ma l g e n e s p rio r t o n e u rog e n e s i s J Ne u r o s c i Re s 2 0 02 6 9 6 9 0 8 9 l 7 Z h o u Z J Z h e n g J E c t o f l o w s e r u m c u l t u r e o n t h e s y n c h r o n y o f c e l l c y c l e o f me s e n c h y ma l s t e m c e l l s Xi Ba o Yu Fe n Zi M i a n Yi Xu e Za Zh i 2 O 0 7 2 3 4 3 6 9 3 7l Wo o d b u r y D S c h wa r z El P r o c k o p D e t a l Ad u l t r a t a n d h u ma n b o n e ma r r o w s t roma l c e l l s d i f f e r e n t i a t e i n t o n e u r o n s J Ne u r o s c i Re s 2 O 0 0 61 4 3 6 4 3 7 0 l 5 l 6 l 7 l 9 2 0 2 2 2 3 2 7 2 9 De n g W Ob r o c k a M Fi s c h e r I e t a 1 I n v i tr o d i ffe r e n t i a t i o n o f h u ma n ma rro w s t r o ma l c e l l s i n t o e a r l y p rog e n i t o r s o f n e u r a l c e l l s b y c o n d i t i o n s t h a t i n c r e a s e i n t r a c e l l u l a r c y c l i c AM R Bi o c h e m Bi o p h y s Re s Co mmu n 2 0 0l 2 8 2 1 1 1 4 8 1 5 2 Lo n g X Ol s z e ws k i M Hu a n g W e t a 1 Ne u r a l c e l l d i f f e r e nt i a t i o n i n v i t ro f r o m a d u l t h u ma n b o n e ma rro w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s St e m Ce l l s De v 2 0 0 5 1 4 1 1 6 5 6 9 L e i Z Yo n g d a L J u n M e t a 1 Cu l t u r e a n d n e u r a l d i f f e r e n t i a t i o n o f r a t b o n e ma rro w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s i n v i t r o Ce l l Biol I n t 2 0 0 7 3 l f 9 1 9l 6 92 3 Ch a i LH W u SX Y a n W H e t a 1 Hu ma n b o n e ma rro w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s d i ffe r e n t i a t e d i n t o d o p a mi n e r g e n i c n e u r o n s i n v i t ro S h e n g Wu Go n g Ch e n g Xu e Ba o 2 0 0 7 2 3 2 2 5 2 2 5 6 余勤 连俊兰 郭莹 丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化 为神经 元样细胞 的试 验研 究f J 中国中西医结合 急救杂志 2 0 0 6 l 3 4 2l 0 2l 3 王勇 陆长青 王凡 黄芪诱导大鼠骨髓 间充质干细胞分化 为神经 元样细胞的研究f J 四川解剖学杂志 2 0 0 6 1 4 1 5 8 蔡光先 林琳 刘柏炎 等 地黄多糖诱导大鼠骨髓间充质干细胞分 化为神经样细胞的效应 中国临床康复 2 0 0 5 9 1 7 4 6 4 7 刘树辉 马云胜 曹 中伟 等 枸杞多糖诱导大鼠骨髓问充质细胞 向 神经 元样细 胞转 化 的实验 研究 华北 煤炭 医学 院学报 2 0 0 6 8 3 2 8 1 2 8 3 陈东风 杜少辉 李伊 为 等 龟板含药血清体外诱导成年大 鼠骨髓 间充 质 干 细胞 分 化 为 神经 元 f J 广 州 中医 药 大 学学 报 2 0 0 3 2 0 3 2 2 4 2 2 6 项平 李海标 黄连素诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样 细胞 中国病理生理杂志 2 0 0 4 2 0 1 5 1 5 3 赵汉宁 董晓先 董伟华 等 黄芩甙 诱导大 鼠骨髓 间充质干细胞分 化 为神 经元 样细 胞的 实验研 究 f J 现 代 中西 医结合 杂志 2 0 0 5 l 4 5 5 7 6 5 7 8 肖庆 中 李浩威 温冠媚 等 麝香多肽体外诱导成年大鼠和人骨髓 问充质 干细胞 定 向分 化为神 经元 的研究 f J 中国病理 生理杂志 2 0 0 2 l 8 1 0 l 1 7 9 l 1 8 2 沈骅睿 吕文科 杨松涛 中药仙茅对骨髓 间充质干细胞 向神经元 细胞定 向诱导的实验研究f J 1 成都中医药大学学报 2 0 0 5 2 8 4 8 1 1 Y a g h o o b i M M M o wl a S J T i r a i h i T Nu c l e os t e mi n a c o o r d i n a t o r o f s e l f r e n e wa 1 i s e x p r e s s e d i n r a t ma rro w s t r o ma l c e l l s a n d t u r n s o f f a f t e r i n d u c t i o n o f n e u r a l d i f f e r e n t i a t i o n Ne u ro s c i Le t t 2 0 0 5 3 9 0 2 8 1 8 6 Eg u s a H S c h we i z e r F E W a n g CC e t a l Ne u r o n a l d i f f e r e n t i 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