电化学发光免疫检测项目临床应用PPT课件.ppt

电化学发光免疫检测项目临床应用 1 标记免疫分析技术的发展 最先进的标记免疫技术 放射免疫测定法1960 酶免疫测定法1970 荧光免疫测定法1980 1990 化学发光免疫测定法1980 末电化学发光免疫测定法1997 2 免疫学的发展对临床的启示 1 20世纪90年代以来 随着分子生物学 细胞生物学 遗传学等多学科的深入发展和相互渗透 免疫学的发展跃上了新台阶 2 免疫学技术的发展和应用 诊断免疫学的不断完善 展示了免疫学瞩目的应用前景 3 1 从内科临床实际来看 常规诊断治疗措施的应用 已远不能满足临床需要 一些病种 需要借助免疫学手段才能作出早期诊断或最后明确诊断 hepatitis 一些疑难病症 往往要通过免疫学方法才能找到诊断思路 sterility 相当部分病种 临床疗效的高低 恢复程度或预后的判断 tumor 亦需借助免疫学方法监测各相关指标才能完成 2 总之 免疫学知识掌握 运用的多少 在一定程度上决定着临床诊疗水平的高低 免疫学的发展对临床的启示 4 ROCHE 罗氏诊断 全球诊断行业中最大的公司 全自动电化学发光免疫分析仪 5 ROCHE 罗氏诊断 全球诊断行业中最大的公司 全自动电化学发光免疫分析仪 MODULARANALYTICSE 6 Elecsys2010性能特点 完成第一测试时间 18分钟 急诊检测9分钟出结果 捆绑式液体试剂 一体化包装 100或200人份 一次性吸头技术 无交叉污染 样本用量少 每一测试10 50ul 测定的精确性好 灵敏度高 TSH分析灵敏度0 005uIU ml 检测线性范围最高可达7个数量级 试剂检测范围宽 如HCG线性达0 1 10 000mIU ml 不稀释时 标本血清 血浆 尿液 7 罗氏电化学发光免疫分析仪检测项目及临床应用一 甲状腺项目二 性激素项目三 肿瘤标志物四 心肌标志物五 骨标志物 六 糖尿病项目七 贫血诊断指标八 传染病项目九 过敏反应指标十 药物浓度监测 8 甲状腺功能检测指标临床应用 总三碘甲腺原氨酸总甲状腺素游离三碘甲腺原氨酸游离甲状腺素 促甲状腺激素 甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺过氧化物酶抗体 甲状腺球蛋白甲状腺结合力 9 甲状腺功能调节 下丘脑TRH 促甲状腺激素释放激素 垂体TSH甲状腺T4T3rT3 10 促甲状腺激素 TSH 指标简介 促甲状腺激素 thtroid stimulatinghormone TSH 为含211个氨基酸的糖蛋白类激素 分子量28000 由 和 两个亚基通过共价键结合而成 TSH主要受下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素 TRH 和血液中的T3 T4浓度的调节 TRH可促进TSH的分泌 T3 T4对TSH的分泌起负反馈调节作用 另外 下丘脑分泌的生长激素释放抑制激素 SS 和肾上腺皮质分泌的糖皮质激素可降低TSH的分泌 而雌激素则可增加其分泌 正常参考值 0 27 4 2uIU ml 11 临床意义及鉴别诊断 1 甲亢时TSH降低 超敏促甲状腺素测定为甲亢诊断的重要和灵敏的指标 2 甲减患者血清TSH明显升高 为血中T3 T4下降后对TSH的负反馈抑制减弱的结果 故在亚临床甲减患者 当血清T3 T4尚未发生变化时 血清TSH即可明显升高 为诊断甲减 尤其是早期和亚临床甲减最灵敏的指标 在应用甲状腺激素替代治疗的原发性甲减患者 血清TSH还是疗效判定的重要随访指标 12 3 慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者可出现血清TSH升高 是因为甲状腺滤泡破坏 甲状腺激素分泌减少 对TSH的负反馈调节作用减弱的结果 其血中甲状腺激素可正常 而TSH较前升高 4 血清TSH升高尚可见于地方性甲状腺肿 垂体分泌促甲状腺激素腺瘤 甲状腺激素应用过量等情况 降低尚可见于肢端肥大症 柯兴氏综合症以及应用多巴胺 糖皮质激素的患者 临床意义及鉴别诊断 13 总三碘甲状腺原氨酸 TT3 指标简介 3 5 3 三碘甲状腺原氨酸 triiodothyronine T3 是含碘的酪氨酸衍生物 体内的T365 由甲状腺合成分泌 35 由T4在肝肾等外周组织经5 脱碘酶作用下脱碘后形成 T3与甲状腺结合球蛋白 TBG 结合的亲和力比T4小 且其游离度约比T4大10倍左右 故其生物活性大于T4 T3具有广泛和重要的生物效应 与机体碳水化合物 脂肪 蛋白质 维生素 水和电解质等物质的代谢 以及全身多系统的功能密切相关 甲状腺激素是中枢神经系统的发育所必需 儿童缺乏甲状腺激素可影响生长发育 以至形成克汀病 正常参考值 1 3 3 1nmol l或0 8 2 0ng ml 2 5 97 5 n 514 14 临床意义及鉴别诊断 1 TT3增高可见于以下情况 1 甲状腺机能亢进症 毒性弥漫性甲状腺肿 多结节性甲状腺肿伴甲亢碘源性甲亢等各种类型的甲亢皆可出现TT3水平增高 尤以毒性弥漫性甲状腺肿 即Graves 病 最常见 T3是早期诊断甲亢的灵敏指标 多在T4升高之前就已明显升高 2 高TBG血症 TBG与T3有很强的亲和力 故妊娠 葡萄胎 口服避孕药及遗传性TBG增多症等TBG增高的病症 都可引起血中TT3升高 3 甲状腺炎 亚急性甲状腺炎和慢性淋巴细胞性甲状腺炎的早期都可因为甲状腺滤泡破坏 甲状腺激素释放过多而出现TT3升高 4 异位TSH综合征 绒毛膜上皮癌 葡萄胎 支气管癌等均可分泌TSH样物质而引起甲亢 15 2 TT3降低可见于以下疾患 1 甲状腺机能减退症 原发性甲减以及甲状腺手术活放疗等原因所致的继发性甲减 血中T3水平明显降低 2 甲状腺炎 亚急性甲状腺炎和慢性淋巴细胞性甲状腺炎的中期和晚期都可因为甲状腺滤泡破坏过多 甲状腺激素合成和释放减少而导致血清T3降低 3 低T3综合征 某些病情严重的疾病 如糖尿病 心肌梗塞 重症感染 恶性肿瘤等 可出现血中T3水平降低 而rT3水平升高 这是机体在病理状态下通过自身复杂的自我调节而实现的一种保护反应 4 慢性肾衰 由于T4向T3转化障碍 以及TBG自肾脏大量丢失 致使血清T3水平下降 16 3 TT3在临床上尚用于观察抗甲状腺药物治疗甲亢的疗效评价以及甲亢的复发 在治疗过程中 若血中T3下降 则说明药物疗效理想 若T3值仍较高 则还应继续使用治疗剂量的药物 对于已经控制的甲亢患者 若血清T3早于T4升高 则复发的可能性大 应注意观察病情发展 17 总四碘甲状腺原氨酸 TT4 指标简介 3 5 3 5 四碘甲状腺原氨酸 即甲状腺素 Thyroxine T4 是甲状腺分泌最多的一种激素 在血液中的浓度比T3高30 60倍 是T3的主要来源 在正常情况下 T4主要和甲状腺激素结合球蛋白 TBG 结合 TT4测定是甲状腺机能状态基本的体外实验之一 其测定常受含碘饮食 药物以及TBG浓度的影响 正常参考值 66 181nmol l或5 1 14 1ug dl 18 临床意义及鉴别诊断 1 TT4在甲亢时明显升高 T4型甲亢患者TT4浓度升高 而TT3浓度正常 甲减患者多明显降低 周围性甲减由于甲状腺激素受体或受体后的缺陷 致使外周组织对T4不敏感 T4代偿性分泌增多 2 亚急性甲状腺炎以及慢性淋巴细胞性甲状腺炎在早期 由于甲状腺滤泡破坏 甲状腺激素释出增多 TT4多增高 后期则因滤泡破坏过多 甲状腺激素合成与释放减少 TT4水平可降低 3 血中甲状腺激素结合球蛋白 TBG 浓度是影响TT4水平的重要因素 高TBG血症患者TT4浓度升高 相反 低TBG血症患者TT4浓度则相应降低 19 4 在甲亢治疗过程中 若同时合用甲状腺素片 TT4可增高 故测定前应先停用 甲减患者服用过量甲状腺素片亦可出现血清TT4增高 在应用抗甲状腺药物治疗甲亢时 由于甲状腺素的合成受到抑制 可出现TT4降低 但TT3可正常 5 多种药物可通过不同的环节影响TT4水平 如含碘药物 雌激素 避孕药 受体组织剂等 在测定甲状腺激素时 应注意排除其干扰 临床意义及鉴别诊断 20 游离三碘甲状腺原氨酸 FT3 指标简介 FT3是血中以游离状态存在的 可直接与T3受体结合而具有生理作用的三碘甲状腺原氨酸 约占TT3的0 3 其测定不受含碘杂质和TBG浓度的影响 因而比TT3更为灵敏 正常参考值 3 95 6 8pmol L或2 57 4 43pg ml 临床意义及鉴别诊断 与TT3基本相同 但同FT3相比 FT4更为灵敏 在亚临床甲亢患者 病人甲亢症状不明显 FT3可在正常范围 但FT4多已升高 其测定不受TBG浓度的影响 21 游离四碘甲状腺原氨酸 FT4 指标简介 FT4仅占TT4的0 04 与甲状腺的功能状态和机体的代谢状态相一致 可直接与甲状腺素受体结合而发挥生理作用 其测定不受TBG浓度的影响 是反映甲状腺功能状态的灵敏指标 临床意义及鉴别诊断 与TT4基本相同 但比TT4反应更为灵敏 且其测定不受血中TBG水平的影响 22 推荐的检测方案 高检测fT4 TSH 低检测fT4 正常 高垂体肿瘤 正常发展型亚临床甲减 低原发性甲状腺机能减退 低继发性甲状腺机能减退 正常发展型 亚临床甲减 高甲状腺机能亢进 23 常见甲状腺疾病及相应激素变化 24 甲亢诊断敏感性 sTSH FT3 T3 或FT4 T4对甲减诊断的灵敏性 sTSH FT4 T4 FT3 T3抗甲药ATD治疗 其恢复次序为FT4T4FT3T3 治疗后2周左右开始下降 TSH恢复最慢 约为12周左右才能完全恢复 25 甲状腺球蛋白 TG 指标简介 甲状腺球蛋白 thyrogbolulin TG 是由甲状腺滤泡上皮细胞合成的一种大分子糖蛋白 是甲状腺滤泡内胶质的主要成分 合成的甲状腺激素以球蛋白形式储存在滤泡腔中 在正常情况下 只有极微量的TG进入血液循环 正常参考值 1 4 78ng ml 5 95 n 130 26 临床意义及鉴别诊断 1 血清TG的改变较多见于甲状腺部位的恶性肿瘤 如TG在甲状腺滤泡状癌 甲状腺乳头状癌和间变癌都可出现不同程度的升高 而甲状腺髓样癌血TG可正常或降低 前者主要是因为甲状腺的破坏以及肿瘤组织亦泌一定量的TG 而致血中TG升高 后者的肿瘤组织来源于甲状腺C细胞 而非甲状腺上皮细胞 故其血清TG并不升高 2 甲状腺机能亢进症 甲状腺瘤 亚急性甲状腺炎以及慢性淋巴细胞性甲状腺炎等甲状腺疾病都可出现血中TG水平升高 27 甲状腺素结合球蛋白 TBG 指标简介 甲状腺素结合球蛋白 thyroxine bindingglobulin TBG 是有四个亚基构成的酸性糖蛋白 由肝脏合成 分子量为60KD TBG是甲状腺激素在血液循环中的主要载体蛋白 对甲状腺激素的贮存 运输 代谢以及维持甲状腺激素的浓度和游离甲状腺激素的动态稳定 均具有重要的作用 28 临床意义及鉴别诊断 1 甲亢患者血清TBG水平明显降低 病情缓解后 TBG可逐渐上升至正常水平 2 甲减时 TBG降解速率减慢 血中TBG浓度可明显升高 可随病情的缓解而逐渐下降 3 先天性高TBG血症和遗传性TBG缺乏症可出现TBG升高或降低 4 严重的肝脏疾病 由于TBG合成和释放增多而出现血中TBG增高 肢端肥大症 严重的糖尿病或营养不良等疾病血中TBG多降低 5 雌激素 糖皮质激素等多种药物均可影响血清TBG的水平 出现TBG升高或降低 29 甲状腺球蛋白抗体 TGA 指标简介 甲状腺球蛋白抗体 thyroglobulinantibodies TGA 是甲状腺疾病中首先发现的自身抗体 属IgG 具有高度的特异性 甲状腺球蛋白 TG 在致病因素的作用下从甲状腺滤泡内溢入血液 作为抗原对甲状腺组织产生自身免疫反应而产生TGA TGA与甲状腺滤泡胶质中的TG结合成复合物 还可与巨噬细胞或杀伤细胞结合 对甲状腺滤泡细胞起破坏作用 正常人血液中可存在少量的TGA 但并不引起自身免疫反应 正常参考值 115IU ml 30 临床意义及鉴别诊断 1 TGA在慢性淋巴细胞性甲状腺炎 Graves病 甲状腺机能减退等甲状腺疾病都可出现 其中 尤以慢性淋巴细胞性甲状腺炎阳性率和滴度为高 2 某些自身免疫性非甲状腺疾病 如类风湿疾病等 也可出现TGA阳性 31 甲状腺微粒体抗体 TMA 指标简介 甲状腺微粒体抗体 thyroidmieromosalantibodies TMA 属补体结合性IgG 是一种由甲状腺微粒体刺激产生的抗甲状腺组织的抗体 高浓度的TMA可是甲状腺产生淋巴细胞和浆细胞浸润以及纤维组织增生 从而破坏甲状腺上皮细胞 32 临床意义及鉴别诊断 1 有助于对自身免疫性甲状腺疾病做出诊断 慢性淋巴细胞性甲状腺炎阳性率可达70 Graves病阳性率稍低 亚急性甲状腺炎可呈低度阳性 炎症消退后滴度可降至正常 2 有助于判断抗甲状腺药物的治疗效果 Graves病患者服用抗甲状腺药物后病情好转者TMA滴度逐渐下降 其下降速度与促甲状腺激素受体抗体相平行 3 慢性肝炎 阿狄森氏病等疾病也可出现血清TMA阳性 少数正常人血中可检测到较低滴度的TMA 33 抗甲状腺过氧化物酶抗体 TPOAb 指标简介 甲状腺过氧化物酶 TPO 是甲状腺微粒体的主要成分 参与碘氨化 酪氨酸残基碘化及碘化酪氨酸的耦联 是甲状腺激素合成过程中的限速酶 TPOAb是甲状腺微粒体抗体 TMA 的主要成分 属IgG类的免疫球蛋白 临床意义及鉴别诊断 Graves病 原发性甲减 慢性淋巴细胞性甲状腺炎等自身免疫性甲状腺疾病 AITD 患者均可出现TPOAb阳性 目前仍可经常见到的 抗微粒体抗体 这一名词 从临床角度看 可认为是抗TPO抗体的同义词 因为TPO抗原发现较晚 但是检测方法不同 两者还是有区别的 尽管两种方法在临床诊断敏感性上可以