类风湿因子(RF)定量测定试剂盒标准操作程序.doc

黄骅市人民医院检验科生化室操作程序类文件类风湿因子（RF）定量测定标准操作程序文件编号：版本号：第一版类风湿因子（RF）定量测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中类风湿因子的浓度。RF的测定对类风湿性关节炎的诊断有一定的参考价值。2. 适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清、血浆中RF的浓度。3. 职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定RF浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。4. 检测方法 上海科华生物生产的类风湿因子定量测定试剂盒采用的是免疫透射比浊法。5. 原理 试剂中的人IgG包被于聚苯乙烯粒子上，样本中RF与试剂中包被于聚苯乙烯粒子上的人IgG结合，形成不溶性免疫复合物，该免疫复合物由于包被的聚苯乙烯粒子而使浊度进一步放大，在人IgG足量的情况下，其浊度与人血清中RF含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，通过剂量/反应曲线求出样品中RF的含量。6. 仪器AU5811自动生化分析仪7. 试剂12345677.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分： MOPSO缓冲液（PH7.4）、0.2M、NaN3、包被人IgG的聚苯乙烯粒子7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。试剂不可冰冻。R1、R2：打开后冷藏于分析仪中可稳定28天。7.4 试剂准备：试剂为即用式。8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用上海科华生物工程股份有限公司试剂盒内提供的标准品对自动分析仪进行校准。由a、b、c、d四只组成，浓度见说明书。按照公司标准品使用要求，使用前用0.5ml的生理盐水复溶，待完全混合均匀后（约30分钟）再使用。校准后，仪器自动对校准品吸光度通过合适的数学模型绘制校准曲线。8.2 质控品：使用罗氏公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。每日在测定前做一次质控，加试剂后做一次质控。该质控品为干粉包装，在2-8冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。 8.3 质控数据管理：按程序对检验后的质控结果进行转换，对质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。 8.4 质控判断规则：按Westgard多规则质控方法测定标准操作程序8.5 室间质评：分别参加河北省临检中心室间质评，对回报的室间质评结果按室间质量评价程序进行处理。9. 标本9.1 标本为新鲜血清标本，避免溶血。若不能及时测定，请尽快置于-20保存，避免反复冻融。9.2 标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单不符状况，一律要求重新留取标本。9.3标本处理：收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。12345678910. 测定程序10.1 分析参数：详见参数表。10.2 操作步骤：签收样本离心上机检测审核报告签发报告标本保存。10.3 获取结果：在AU5811仪器上或AU5811传送的中文系统电脑上查找相应结果。10.4结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。可报告的结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。11. 计算 校准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。无需手工计算，每个标本的结果自动打印12. 废液处理参阅检验科安全手册废液处理标准规程处理。13. 操作性能13.1 可报告范围：本法对RF检测范围为10-100IU/ml。当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L氯化钠溶液稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。13.2 特异性/干扰：当样品中胆红素浓度700mg/L，血红蛋白浓度8000mg/L，脂类低于4000mg/L时对测定结果的影响可忽略。极度溶血及脂血标本会影响测定。13.3 分析灵敏度：测试浓度为（305）IU/ml的样本，将测试结果换算成浓度为30IU/ml的样本时，吸光度差值（A）应0.01A13.4 精密度:批内变异系数CV10% 批间变异系数CV15%14. 注意事项14.1 试剂盒仅用于体外诊断。测定结果仅作为相关疾病的临床诊断依据。14.2 试剂中校准品采用献血者血清，经过测定HBsAg、抗-HIV1/2、抗-HCV、TP抗体均为阴性。但无法完全排除潜在感染的危险,应按有传染源的方式进行防护。14.3 试剂盒中含有防腐剂叠氮钠，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。如不慎接触，应用大量清水冲洗。如误服，应立即上医院诊治。15. 参考值健康成年人：14IU/ml。如果结果做为诊断指标应结合病史及其它临床检查结果。16. 临床意义类风湿因子（RF）是抗变性IgG抗体，常见于类风湿性关节炎病人的血清和滑液中，60-85的类风湿关节炎的病例RF为阳性，因此，一般认为RF的检测对于类风湿性关节炎的诊断有一定的参考价值。另外，在类风湿性关节炎药物疗效评价上，RF是否阴转或降低，被作为评价药物是否为致缓解性药物的一个指标。17. 支持性文件17.1 AU5811自动生化分析仪使用说明书。17.2 AU5811自动生化分析仪分析参数。 17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。18. 参考文献18.1 全国临床检验操