临床基因扩增实验室管理【精选-PPT】.ppt

临床基因扩增实验室管理 电话 0571 85239988 3307 3122 3891 3892传真 0571 85235131邮编 310014 网址 浙江省人民医院检验医学中心 刘建栋 随着现代医学技术的进步 临床实验室得到了飞速的发展 许多新技术 新方法 新仪器越来越多的在临床实验室应用 实践证明已经获得巨大的成功 21世纪的检验医学将以基因诊断技术 生物芯片技术 流式细胞技术 免疫标记技术为依托 从临床化学 临床血液学 临床免疫学 临床微生物学和分子诊断学等学科全方位地参与临床的诊断 治疗和预防工作 一 临床实验室管理学的背景 环境有害因素 接触 内剂量 靶剂量 生物学效应 疾病 临床前损伤 1 环境有害因素与疾病 环境监测生物监测 接触评估 健康监护 分布 代谢 环境有害因素有效暴露剂量 基因 蛋白 脂类表达改变 信号转导系统 细胞周期控制 细胞存活死亡分化 DNA修复 遗传变异 环境有害因素暴露 环境反应机构 疾病 环境有害因素 人体 有效 接触 环境反应机构 负荷 疾病 反应基因 基因功能 信号转导 预警系统 基因组学蛋白组学脂类组学 系统生物学 环境监测 风险预测 细胞验证 2 系统生物学方式评估 新型的危险度评价模式 二 现代生物技术研究热点与趋势 20世纪70年代在生命科学领域取得了两项对人类生活和经济活动具有深刻影响的技术突破 一个是重组DNA技术 另一个是淋巴细胞杂交瘤技术 这两项革命性技术的出现 带动了生物技术的迅猛发展 逐步形成了一个全新的现代生物技术群及新兴产业 第一次生物技术浪潮 医药和保健领域 后 迎来了第二次浪潮 重点发展以下领域 农业生物技术环境生物技术海洋生物技术生物制造和生物处理工艺及能源研究 二 现代生物技术发展趋势 生命科学和生物技术的发展是相辅相成 新世纪生物技术产业的竞争是大力发展生物技术 研究热点 基因组学技术 蛋白质组学技术生物信息技术基因克隆 重组 表达技术动物体细胞克隆技术生物芯片技术 微阵列技术和生物传感器的基础研究 干细胞研究 对某个生物体的所有基因进行基因作图 包括遗传图 物理图 转录本图 核苷酸序列分析 基因定位和功能分析的一门学科 具体研究内容为结构基因组学 比较基因组学 功能基因组学 蛋白质组学 目前基因组研究的对象主要集中人类基因组 和水稻基因组 并适度开展重要的动植物以及病原和特殊功能微生物基因组研究 1 基因组学技术 结构基因组学比较基因组学功能基因组学 基因组学包括 通过基因作图 核苷酸序列分析确定基因组成 基因定位的科学 其目的是确定界标或基因在构成基因组的每条染色体上的位置 以及同条染色体上各个界标或基因之间的相对距离 2 结构基因组学 RFLP 限制性酶切片段多态性STR 短串联重复序列SNP 单核苷酸多态性 图中所用标记 用遗传模式来描述DNA标记 基因或其它确定的DNA序列 在染色体上的相对位置 是通过遗传重组所得到的基因线性排列图 它是通过计算连锁的遗传标记之间的重组频率确定它们的相对距离 一般用厘魔 CM 表示 1CM代表1 的重组率 遗传图 是确定遗传标志或界标在染色体上所处的位置 图距以物理距离为单位 如bp kp等 物理图阐明了基因之间的精确距离的图谱 物理图 又称转录图 是指可表达的基因在染色体上或基因组DNA片段上的精确定位 表达图 基于基因组图谱和测序基础上 对已知的基因和基因组 通过对模式生物基因组之间或模式生物基因组与人类基因组之间 的比较 了解基因功能表达机理或物种进化的学科 2 比较基因组学 利用结构基因组学研究所获的各种信息 通过在基因组或系统水平上全面分析基因的功能 使得生物学研究从对单一基因或蛋白质的研究转向对多个基因或蛋白质同时进行系统的研究 3 功能基因组学 包括基因功能发现 基因表达分析及突变检测 力图从基因组整体水平上对基因的活动规律进行阐述 基因诊断基因治疗新药开发农业育种 4 基因组学的应用 阐明生物体全部全部蛋白质的表达模式及功能模式 其内容包括鉴定蛋白质的表达 存在方式 修饰方式 结构 功能和相互作用等 实现对所有蛋白质的分离 鉴定和图谱化是目前研究的主要内容 5 蛋白质组学研究 蛋白质组学研究难度比基因组学研究大 蛋白质组学应用目前主要进行药物筛选和毒性研究 三 目前临床实验室现状 检验仪器越来越多 从手工 半自动 全自动化 检验项目越来越多 检验分析速度越来越快 实验环境越来越好 检验结果越来越准 要求 患者或临床医生 越来越高 检验医学发展 实验室随时通过实验室信息系统 LIS 向临床提供大量的信息 临床在诊断 医治 判断疾病预后和评估疗效及各种生命科学研究等方面也越来越倚赖实验室的检验结果 因此临床实验室的作用 地位和经济等得到领导和临床各科的重视 实验室也因此快速地发展 随着医学技术的发展 各种检验项目还在不断地快速增加 效益和效率 检验质量管理 经济财务管理 信息情报管理 人材设备管理 技术服务管理 行政与法制管理 自动化 规范化 标准化 网络化 社区化和法制化 检验医学行业的生存与竞争将越来越重视 在新的形势下 随我国新的医疗事故鉴定条例颁发 检验报告的每一个符号和每一个分析数据都将起法律责任 就象不合格的产品会引起消费者的投述 法律申述和赔偿 有些检验结果还涉及许多社会因素 家庭 国事 公安 防疫 党纪 心理 隐私 等 追究检验结果报告的责任与后果 由于来自各方面的压力 患者 人民大众 政府部门 新闻媒体 法律法规 医疗保险 医德医风等 和监督 包括由于 知识经济的不对称 所引起的误解和其他出自各种各样目的或意图的医疗纠纷 知识经济的不对称 由于 利益启动 目前有不少医疗机构为贪图赢利 对检验医学新技术引入失控 有的将检验作为单纯的经济利创收的 摇钱树与印钞机 失控 教训 难忘的1995年 被称之为PCR临床检验爆炸年 天下大乱 到天下大治 1 缺乏对临床实验室管理系统理论的研究 走什么样的路 路在何方 怎么走 卫生部临床检验中心在积极推动实验室开展室间质量评价和室内质量控制 规范临床检验操作等方面做了大量的工作 但检验报告的正确与否与分析前 分析中和分析后的多种因素相关 如何使相关因素都得到控制 建立一套切实可行的质量控制体系 进而保证检验质量 是多年来一直未能解决的问题 问题 2 缺乏对临床实验室质量管理的强制性法规 实验室出具的检验报告是具有量值的特殊文字资料 为保证检测结果的准确性 国际计量组织和国际标准化组织均出台了一系列的质量控制规定和要求 由于临床检验自身的特点 相当数量的临床检验项目不能完全套用计量法的要求 卫生行政部门又没有强制性的管理措施以保证实验室检验的质量 这就使一些报告单在无仪器校准 室内质控等质量保证措施的情况下发出 甚至出现个别医疗机构为贪图赢利 故意将阴性结果作成阳性结果的事件 3 缺乏对检验质量足够重视和正确导向 有不少医院的领导对临床检验工作的性质不够了解 存在只要有人 有仪器 有试剂就可以对临床出具检验报告的错误认识 因而忽视临床实验室的质量管理 另外 近年来卫生行政部门和医院多强调检验报告要在尽可能短的时间发出 因此临床实验室往往都在 快 字上做文章 追求单位时间内仪器处理标本的速度 仪器也越来越贵 而对发出报告所必需的质量保证基本措施如仪器校准 维护 维修 室内质控 标准操作规程 记录等却强调不够 出现导向上的偏差 随着分子生物学 单克隆抗体 生物芯片技术 计算机技术的迅速发展 检验方法学也得到了迅速的发展 一些新技术 新仪器 新项目相继投入临床应用 在检验医学领域呈现出一片日新月异的景象 但是也有一些新技术 新项目在尚未成熟或者临床意义并不明确的情况下由于片面追求利益的因素而盲目地应用于临床 如 一滴血可检测任何疾病 容易误导临床的诊断与治疗 造成医疗资源的浪费 为适应社会主义市场经济要求 卫生部应尽快建立并落实检验医学技术准入制度 推动医学技术评估和循证检验医学的发展 4 对检验医学新技术引人无控制措施 1 从业人员的准入 2 检测仪器的准入 3 检验试剂的准入 4 检验项目的准入 6 实验室环境条件 5 各种合格消耗用品的准入 7 生物安全 卫生部临检中心在多年的实践和总结下 吸取经验教训和先进国家的科学管理方法 已在2000年初向卫生部提出制定 临床实验室管理办法 的建议并获同意 草案已经拟出 从实验室注册登记 实验室人员资格 仪器试剂管理 校准 室内质控 室间质评 标准操作规程 记录等8个方面提出具体明确的要求 规定不能达到要求的实验室不得开展相关检验项目 目前正在对草案进行讨论 修改 临床实验室管理办法 的出台 将意味着我国检验医学质量管理迈入法制化和规范化管理的轨道 为提高临床检验质量和诊治水平打下坚实的基础 他山之石 可以攻玉 当今我国与发达国家临床实验室的差距主要是管理 近年来我国也成立了中华医院管理学会和临床检验管理专业委员会 2000年 国际标准化组织专门针对医学实验室的管理制订了标准 即ISO FDIS15189 医学实验室的质量管理 标准从组织与管理 质量体系 审核与评审 人员 设施与环境 设备 质量和技术记录 报告 外部支持和供应品 申诉等方面提出了21项具体要求 目前国际上对临床实验室的管理标准与法规主要为ISO FDIS15189和CAP ISO FDIS15189和CAP是医学实验室质量认证 实验室认可的重要依据 医学实验室 临床实验室 公布的ISO15189 医学实验室质量管理 文件中的定义为 目的为提供诊断 预防 治疗疾病信息 或为判价人类健康对源自人体物质进行生物学 微生物学 血清学 化学 免疫血液学 血液学 生物物理学 细胞学 病理学或其它方面检查的机构 患者临床解释 医生 选择开展项目申请单 采集样本 样本运送 样本验收 样本处理 分析过程 结果计算和判定 可靠性分析 报告结果的审查报告主管技师 报告结果 存档 检验医生或专家核对整理 实验室复检 反馈信息 送出 特殊项目按规程送检 异常结果复检 忽视 检验循环系统 从我国目前颁布对临床基因扩增检验实验室管理暂行办法卫医发 2002 10号文件 并对临床基因扩增检验实验室的验收 其主要目的是逐步建立起一整套临床实验室资格认可的规范制度 目前是依靠卫生部临检验中心组建专门的评审机构 培训评审人员 建立评审员库 推动临床实验室资格认可工作 临床实验室管理办法 的出台和临床实验室资格认可制度的建立 将使我国的临床实验室管理模式与发达国家的管理模式接轨 必将有利于临床检验质量的提高 也可为其他学科的管理提供很好的借鉴作用 管理是一门科学 管理是一门技术 管理能出成效 ISO文件中也是将管理概括为 指挥和控制组织的协调的活动 二 临床基因扩增检验实验室管理 管理是对组织的资源进行有效整合以达成组织既定目标与责任的动态创造性活动 其中包括策划 组织 指挥 协调和控制等行为活动 是有效整合资源所必需的活动 管理的核心在于对现实资源的有效整合 管理定义 管理者应明确的目标 减少不确定性和减少不必要的损失 通过预先设立的标准 对工作进行及时的修改或纠正 最快最好地达到预期目的 就必须根据自身的条件 建立一整套的质量保证体系和操纵程序 实验室管理 包括各种规章制度 各种分析仪器的校准 维护 保养 检验试剂的准入 保存 检验人员的准入和培训 检验项目的操作程序 SOP 工作流程 检验环境 温度 湿度 稳压电源 空气 生物安全 实验人员的交叉感染 中毒 实验污染 有害废物的处理 与检验的申请 患者的准备 标本的采集 标识 保存 运送 验收 检测 结果的记录与保存 报告以及临床和患者等方面的抱怨 紧急防范措施等 人力资源管理 质量管理 设备 试剂与财务管理 信息管理和市场管理是临床实验室管理的主要内容 虽然目前我国的实验室 绝大多数都附属于医院和其它医疗机构 财务 人力资源 市场管理方面实验室缺乏自主权 管理工作重点是放在质量管理上 但对上述的管理工仍需要在我国目前管理体制下 寻找适合我国目前情况的管理办法和途径 人事体制上的改变是当务之急 单位人 行业人 社会人 执照许可证制度要求检验部门必须达到良好的实验室工作要求 goodlaboratoryPractice GLP 从事检验人员必须经有关部门考核合格领取检验执照方可 当然医生也有从业医生的执照 护士也有 不能随便行医和实验分析 否则将违反有关法规 病人有权告你 投诉赔偿 二十一世纪我国医疗卫生事业的发展 也将面临着医学生活化 受医者必将随医疗改革 大病保险以及涉及医疗的各种法规不断完善 医学科学知识的普及 律师行业的兴起和公众 社会和政府部门对医疗行业的监督 各级医疗机构中的临床和医技人员也必将认形势 端正态度 确保实验室诊断质量 全面提高和保证医院的医疗水平 实验室将接受认证评审 质量手册 质量管理程序文件 科室管理诊疗规范文件受控文件资料 质量记录表单 a b c d 医院质量管理体系文件的组成 文件审核 发布学习贯彻内部预审发现现有问题 质量管理体系的实施和运行 质量控制过程 组织内审验证质量管理体系有效性管理评审持续改进 质量管理体系的实施和运行 认证 外审 接受外审持续改进不断完善获证 临床基因扩增检验实验室管理文件书写 四 一 文件准备1 科主任 技术负责人 通常根据实验室实际条件负责书写质量手册和科室程序文件 室程序文件由组长或室内审员书写 其余文件应由那些直接与文件涉及的工作人员书写 所有文件必须是能在日常工作中真实可行 编写格式并不重要 重要的是要具体 细化 量化和规范化 有时要具体落实到人员 时间 地点 方法和物品等 要可操作性 即使是第一次接触SOP的人也能按要求完成相关操作 编写的SOP不是给别人看 而是用于自己实验室技术人员日常工作 做不到的就不要写进去 所有文件应有抬头 带有此文件所指明的信息抬头左侧第一行单位 如浙江省人民医院 第二行科室 检验医学中心 JYYXZX 第三行实验室 PCR Lab 可省略 抬头中间为文件名称抬头右侧第一行文件编码 如ZRY QMP03 04 第二行版序 A O 第三行生效日期 2002 11 18 第四行页码和总页数 第18页共52页 3 通常的文件格式 文件书写后 应组织有关人员进行学习讨论 充分领会文件精神和执行要素 并可对某些不明确或不妥当的内容提出修改 使文件清楚 简明 准确 适当 可行 最后提交科主任批准后执行 2 学习与讨论 关键是要提高实验室负责人和所有技术人员的观念和意识 明白所编写的SOP不是表面文章 花架子 并非是应付实验室的验收 而是要每一个人都要自觉按SOP进行规范性操作 才是确保检验质量的重要前提 科主任 技术负责人 负责编写 审核和批准质量手册和科室程序文件 实验室组长或其他指定负责人负责编写其管辖部门的操作程序文件 SOP 和各种记录要求及规章制度 实验室工作人员必须按要求真实记录 4 职责 准备发出的文件及其拷贝 在首页上由作者 审核者 批准者签字 这样准备好的控制文件由质量负责人或由他指定人员发出并进入主索引 应在文件发送记录表上登记并签字 5 批准 发布任何文件或者文件新版本 必须让所有有关人员知道文件内容 并在文件发送记录表上注明需要知道这些改变的工作人员姓名 发送表上的人员应该签字并注明日期 年 月 日 以表明他们已经阅过并知道新版本的改变或新版本内容 此文件发送记录应储存在文件库中 每一文件 不包括图 表 至少有两份核准文件 一份保存在文件库 另一在有关工作场所 复印件总数依据文件内容而定 科文件应发给每一部门作为参考 文件的主索引应记录每一复印件所在部门 6 发布 当新版文件核准使用后 应将原文件或多余文件回收并在文件回收记录表上登记 撤销日期应进入主索引 文件库中复印件决不能再作为工作文件 它们保存在文件库的存储部分可以作为历史回顾 7 取消多余的文件 任何工作人员都可以提出对控制文件进行修改意见 应由质量负责人对此建议进行审核 如认为是小修正 这些改变按规定书写在文件首页反面 如果修改大的程序或大于10个微小修正 应由作者或质量负责人加以改版 改版文件批准后 重新进入主索引 作为控制文件 改版文件必须标明它是由原版文本进行改编 8 文件修改 文件负责人将所有文件保存在适当标记的计算机的硬盘上 为安全起见必须有三个拷贝 两个为工作拷贝 第三个保存在一个安全地方 在安全地方的拷贝应经常更新 10 计算机盘存储 科主任应对文件进行审查 所有文件必须经过批准才能生效 对修改文件内的条款 应在修改表中按规定记录 所有文件应在规定存放场所中有序地存放 审查结束 应有记录 并督促有关部门及时改正 文件审查间隔 质量手册与科程序文件三年 室程序文件与工作站文件二年 图表一年 11 文件定期审查 通常的程序文件的抬头格式 科程序文件 色标记 室程序文件 色标记 工作站文件 色标记室文件之间可有一些差异 如文件上可有各室的特定标志 图表和程序文件有关表可在编码前加T 图加F 编码后加二位序号 通用图表在T或F后加四位序号 图表一律用白色纸打印 浙江省人民医院检验医学中心PCR实验室程序管理文件 撰写人 刘建栋吕火祥批准人 叶再元批准日期 2002年8月18日启用日期 2002年8月20日 二零零二年七月十日制 PCR验室设置和管理2进出PCR实验室各区的要求PCR验室的人员配置及管理4PCR实验室的人员配置及管理5生物防护6仪器设备的维护保养程序7校准文件 cal sop 1 移液器校准8实验材料的购买和管理9PCR核酸扩增检测的标本管理程序11仪器设备的操作使用程序13仪器设备维护保养程序14PCR检测实验操作程序17PCR试验记录的管理18PCR检测结果的报告20PCR实验室室内质量控制程序21抱怨的内部处理程序22仪器设备发生故障时的应急处理23HBV DNA扩增检测操作流程 SOP 1 26HCV RNA扩增检测操作流程 SOP 2 29结核分支杆菌 TB 核酸扩增检测操作流程 SOP 3 32沙眼衣原体 CT 核酸扩增 PCR 检测操作流程 SOP 4 34淋球菌 NG 核酸扩增 PCR 检测操作流程 KY SOP 5 36乙型肝炎病毒YMDD突变型核酸扩增检测操作流程 KY SOP 6 38Lightcycle仪器的操作程序 SOP 7 41MagNAPureLc的操作程序 SOP 8 44检验设备器材计划 请购与验收程序46温度校准程序 cal sop 2 52附表与附图 浙江省人民医院检验医学中心PCR实验室程序文件内容 关于 临床基因扩增检验属于室管理暂行办法 的解释 临床基因扩增检验实验室 以下简称实验室 近年来在我国发展很快 由于基因扩增检验技术的应用对实验室的环境条件 仪器设备 试剂耗材 人员技术操作和实验室质量控制等方面要求严格 如果不对实验室进行规范化的管理 检测质量就无法得到保证 影响临床诊断和治疗 为保证基因扩增技术的有效应用 经国内专家多次研究论证 并结合该技术在国内外的发展现状 卫生部于2002年1月10日发布了 临床基因扩增检验实验室暂行管理办法 含 临床基因扩增检验实验室基本设置标准 这是我国政府部门发布的第一个有关实验室质量保证的法规性文件 也是第一个对检验医学技术进入临床应用准入的规定 卫生部临检中心再2002年2月20日下发了 临床基因扩增检验实验室工作规范 等配套文件 临床基因扩增检验实验室管理最好的方法是严格按照卫生部及卫生部临床检验中心所颁发的有关文件 依法开展基因扩增检验 必须要认真学习和领会卫生部颁布的文件和卫生部临床检验中心的配套文件 临床基因扩增检验实验室暂行管理办法 主要针对以放大靶核酸技术扩增检测DNA或RNA用于临床诊断治疗的基因扩增实验室 包括PCR LCR TAS 3SR SDA等 明文规定二级以上医院 含二级医院 均有资格申请设置临床基因扩增检验实验室 不论综合性医院还是专科医院 特别强调以开展科研为目的的基因扩增检验实验室开展基因扩增时不得向病人收费 也不能为临床出具检验报告 适用范围 技术培训 从事临床基因扩增检验人员必须是具有卫生行政管理部门颁发的卫生技术资格证书 并经基因扩增上岗前的技术培训合格者 卫生部临床检验中心是指定的技术培训单位 各地的技术培训单位除了需要具备有临床基因扩增的理论和实际操作能力和条件外 还应有卫生行政管理部门的技术培训委托书和卫生部临床检验中心的资格认定证书 并采用卫生部临床检验中心组织的统编教材 在未经认定的培训机构获得的培训证书无效 申请 验收与批准 各医疗机构必须按卫生部颁布的 临床基因扩增检验实验室基本设置标准 建立实验室 也必须有由该医疗机构的法人代表人向卫生部临床检验中心提出技术验收的申请 由卫生部临床检验中心组织专家现场按标准和审