供试品溶液制备的主要原则.ppt

中药分析 第三章中药分析供试品的制备 要点导航 1 掌握常用中药样品的粉碎 提取 纯化和浓缩方法 2 熟悉中药样品的衍生化方法及不同类型中药样品的前处理特点 学习内容 第一节中药样品前处理方法第二节不同类型中药样品的前处理特点 第一节中药样品前处理方法 供试品溶液制备的主要原则 最大限度地保留待测成分 排除干扰成分 使待测成分在溶液中的浓度达到分析方法的要求 一 粉碎 粉碎的目的 确保取样均匀而具有代表性 提高分析结果的准备确度和精密度 有利于样品中的待测组分更快 更彻底地被提取出来 粉碎设备 粉碎机 研钵 铜冲 匀浆机等 二 提取 提取的目的 为了将样品中的待测成分溶解和释放出来 并制成一定浓度的溶液 浸渍法超声提取法回流提取法连续回流提取法水蒸气蒸馏法 消化法超临界流体萃取法微波辅助萃取法加压液体萃取法 三 纯化 一 沉淀法 1 沉淀除去杂质 2 沉淀为待测组分 三 纯化 二 液 液萃取法 1 直接萃取法 利用待测组分与干扰成分在有机溶剂和水两相中分配系数不同 多次萃取2 离子对萃取法 在一定pH介质中 某些有机酸 碱 性成分形成的离子与带相反电荷的离子 离子对试剂 定量结合为弱极性的离子对化合物 而易溶于有机溶剂 从而实现分离 BH 水相 In 水相 BH In 水相 BH In 有机相 三 纯化 三 色谱法 1 硅胶 根据吸附作用大小不同而实现分离2 氧化铝 极性吸附剂 常用中性氧化铝3 大孔树脂 分离纯化作用依赖其与被吸附分子间的范德华力4 聚酰胺 氢键吸附作用5 离子交换树脂 离子交换作用6 硅藻土 纤维素 分配作用原理 满山红油的鉴别 取本品0 1g 加正己烷5ml使溶解 置硅胶柱 120 150目 3g 内径为1cm 湿法装柱 上加无水硫酸钠3g 上 用正己烷50ml洗脱 弃去洗脱液 再用正己烷 乙酸乙酯 50 1 50ml洗脱 收集洗脱液 作为供试品溶液 小建中颗粒中白芍的鉴别 处方 白芍400g大枣200g桂枝200g炙甘草133g生姜200g取本品1 5g 加硅藻土1g 研匀 加甲醇30ml 加热回流1h 滤过 滤液浓缩至约2ml 加中性氧化铝2g 拌匀 干燥 加在中性氧化铝柱 100 200目 1g 内径为1cm 上 用甲醇100ml洗脱 收集洗脱液 蒸干 残渣加无水乙醇1ml 使溶解 作为供试品溶液 小青龙颗粒中的五味子醇甲的鉴别 处方 麻黄154g桂枝154g白芍154g干姜154g细辛77g炙甘草154g法半夏231g五味子154g取本品10g或5g 无蔗糖 研细 加甲醇50ml 超声处理30min 滤过 滤液蒸干 残渣用水20ml溶解 通过D101型大孔吸附树脂柱 内径为1cm 柱高为10cm 用水100ml洗脱 再用70 乙醇40ml洗脱 收集70 乙醇洗脱液 蒸干 残渣加甲醇1ml使溶解 作为供试品溶液 通乐颗粒中枳壳的鉴别 处方 何首乌地黄当归麦冬玄参麸炒枳壳取本品2g 研细 加甲醇30ml 超声处理30min 滤过 滤液蒸干 残渣加水10ml使溶解 加在聚酰胺柱 30 60目 5g 内径为1 5cm 湿法装柱 上 先用水100ml洗脱 弃去水液 继用35 乙醇100ml洗脱 收集洗脱液 蒸干 残渣加乙醇2ml使溶解 作为供试品溶液 肾复康胶囊中益母草的鉴别 处方 土茯苓366g槐花93g白茅根366g益母草93g广藿香28g取本品内容物3g 加甲醇30ml 加热回流1h 滤过 滤液蒸干 残渣用0 1mol L盐酸溶液5ml溶解 通过强酸型阳离子交换树脂柱 732型钠型 内径为0 9cm 柱长为12cm 用水洗至洗脱液近无色 弃去水洗液 再以2mol L氨溶液50ml洗脱 收集洗脱液 蒸干 残渣加甲醇1ml使溶解 作为供试品溶液 三 纯化 四 固相萃取法 基于相似相溶原理和HPLC GC固定相理论 五 微萃取技术 SPME LPME 四 浓缩 水浴蒸发法 适合对热稳定的非挥发成分自然挥散法 适合极易挥发溶剂或小体积提取液减压浓缩法 适合对热不稳定成分 可回收溶剂气流吹蒸法 适合少量液体 结构不稳定 易氧化成分冷冻干燥法 适合对热不稳定的生物样品 五 衍生化 甲酯化 脂肪酸及油脂 与甲醇酯化反应 GC分析硅烷化 活泼氢基团 硅烷化试剂 硅烷化 GC分析酰化 具有极性基团 酰化试剂 酰化不对称衍生化 加不对称 手性衍生化试剂 GC HPLC紫外衍生化 加具有紫外吸收基团的试剂 HPLC UVD荧光衍生化 加荧光衍生试剂 HPLC 荧光检测电化学衍生化 加电化学试剂 HPLC 电化学检测器 蓖麻油中蓖麻油酸的含量测定 取本品40mg 精密称定 置50ml圆底烧瓶中 加入0 5mol L氢氧化钾 甲醇溶液5ml 在60 水浴中回流30min 至油滴全部消失 再加入三氟化硼乙醚 甲醇 1 3 ml ml 4ml 回流5min 冷却 精密加入正己烷5ml 振摇5min 分取正己烷 用饱和氯化钠溶液洗涤两次 每次5m