医学检验毕业设计-念珠菌感染特性及耐药性分析.doc

念珠菌感染特性及耐药性分析医学检验专业指导老师 学生 摘要：目的 探讨念珠菌感染的特点及耐药性情况，为临床合理选用抗真菌药物提供实验室依据。方法 应用回顾性调查分折的方法，对我院1年间住院病人、门诊病人标本分离的193株念珠菌进行统计并对常用抗真菌药敏试验结果进行分折。结果 分离出的念珠菌以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；检出真菌最多的部位是呼吸道，占真菌标本的76.17%；其种类以白色念珠菌及热带念珠菌为主，分别占73.58%和15.54%；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。结论 加强临床真菌分离菌株对抗菌药物的耐药性关注，根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。关健词：念珠菌；感染特性； 耐药性【Abstract】 objective To investigate the characteristic of Candida infection and examine the drug resistance condition, so as to provide assistance to the reasonable use of antifungal agents clinically. Methods To analyze the status of drug resistance of 193 strains of Candida, which were isolated from inpatients and outpatients of our hospital. Antifungal agents susceptibility test was done to know the drug resistance. Results The Candida isolated in our hospital were predominant from medical unit, 136 strains of Candida were identified(accounted for 70.47%); The specimens where detected Candida were mostly from respiratory tract, accounting for 76.17%. The Strains of Candida albicans and C. tropicalis had the highst detection rates, accounting for 73.58% and 15.54% respectively. The rates of susceptibility of Candida to Amphotericin B, Nystatin were more than 90%, and the rates of susceptibility to Terbinafine was only 6.3% for Candida albicans, but 100% for C. tropicalis. Conclusion Pay more attention to the drug resistance to the Candida isolated from the clinical. Antifungal agents should be selected reasonably according to the result of drug susceptibility test.【Key words】Candida；infection characteristic；Drug resistance随着科学技术的发展，广谱抗生素、免疫抑制剂及各种侵入性诊断治疗的广泛应用，机会致病菌念珠菌感染在近年明显增多。真菌感染已成为白血病，淋巴瘤，免疫抑制，长期使用广谱抗生素，中心静脉插管，中性粒细胞减少，烧伤，低体重的早产儿，血液透析，骨髓或器官移植，胃肠道手术和机械通气等特殊人群的严重感染性疾病1 2。并且念珠菌对常用的抗真菌药物存在耐药菌株，给临床治疗带来很大困难。我们对临床标本分离的193株念珠菌属的感染类型及药敏进行分析，现将结果报道如下：1 材料与方法1.1 材料1.1.1 标本来源 193株念珠菌来自我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。1.1.2仪器 VITEK-AMS 32 全自动微生物分折仪，法国Bio-Merieux公司制造。1.1.3 试剂 YBC卡为Bio-Merieux公司配套产品，念珠菌chromG A显色培养基(法国科玛嘉公司提供)，8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬 (辉瑞公司提供)。1.1.4 质控菌株 白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28-39mm。1.2 方法1.2.1 细菌分离鉴定按全国临床检验操作规程3进行培养分离，分离所得念珠菌采用chromG A显色培养基或用VITEK-32 YBC卡鉴定到种的水平。1.2.2 细菌药敏试验 采用2003年美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton(MH)琼脂中补充2葡萄糖和0.5mgL美蓝4。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为11065106ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35孵箱， 24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合NCCLS质控要求。2 结果2.1 念珠菌的分布：193株念珠菌分布在10多个科室， 以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；外科系统分离出28株(占14.51%)。分布构成（见表1）表1 193株念珠菌分布的科室构成科室株数构成比%科室株数构成比%内科系统13670.47外科系统2814.51呼吸5126.42胸外84.15干部病房2211.40脑外52.59血液199.84外科重监室42.07内科重监室136.74肝胆42.07消化105.18骨科52.59神经84.15泌外、普外21.04心内52.59其它系统2814.51肾病科42.07儿科105.18内分泌21.04妇产科21.04风湿10.52门诊115.70中医10.52其它63.122.2 念珠菌的临床标本分布：念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出147株(占76.17%)；生殖系分泌物分离出10株(占5.18%)；尿分离出8株(占4.15%)；口腔分泌物分离出5株(占2.59%)；其它标本分离出23株(占11.92%)。2.3 193株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果（见表2）：白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出142株(占73.58%)；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。表2：念珠菌对抗真菌药物的药敏结果抗真菌药物白色念珠菌(n=142)热带念珠菌(n=30)其它真菌(n=21)合计(n=193)SIRSIRSIRSIR两性霉素95.072.112.8296.673.3371.4219.059.5292.754.153.115-氟胞嘧啶20.421.4178.1730106014.2923.8161.921.245.1873.58氟康唑70.4225.354.237026.673.3380.9519.0571.5022.805.70酮康唑43.6647.898.45604066.6728.574.7648.7044.566.74咪康唑25.3555.6319.02208038.1047.6242.8622.8046.1131.09制霉菌素97.890.701.4110095.244.7697.930.521.55伊曲霉素81.6910.567.5586.67103.3371.439.5219.0581.3510.368.29特比萘芬6.307.0986.6110041.1852.945.888.625.7085.063 讨论 31念珠菌的感染特性：调查表明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、消化、肿瘤等内科科室及儿科，尤其是呼吸科患者念珠菌感染所占比例高达26.42%，与一些有关报道不同5，原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。机体对真菌感染的易感性主要与宿主防御功能有关6,老年人因生理防御功能、免疫功能衰退，白细胞介素2(IL-2)的产生减少，致使T细胞增殖能力减弱，易引起念珠菌感染，本组病例50岁患者占78.24%，故真菌感染率升高；其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科，主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重，长期反复使用多种抗生素等因素，导致体内微生态的平衡紊乱，造成菌群失调，抑制了常见的条件致病菌，使真菌大量繁殖。各种临床标本中，痰液标本检出率最高7，事实上痰液的细菌检测多为混合型感染，由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌，使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检规范化8，告知患者正确的留取痰液的方法，念珠菌存在于自然界及正常人的口腔、胃肠、阴道、皮肤上，白色念珠菌是条件致病菌，当全身或局部免疫力降低时可出现临床症状。白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，占73.58%，白色念珠菌同时是致病力最强且具有抑制机体免疫功能的能力9，其感染可分为内源性何和外源性的。正常情况下，人体内部正常菌群与病原微生物相互抑制生长，处于相对平衡状态，当使用抗生素后，敏感细菌被抑制或杀灭，则使白色念珠菌繁殖，导致真菌感染。32念珠菌的耐药特性：抗真菌药的类型不同，对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异10。我院采用两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬8种抗真菌药物，念珠菌对其敏感率依次为92.75%、21.24%、71.50%、48.70%、22.80%、97.93%、81.35%、8.62%，传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广，但副作用较大，故用药过程中要严密观察其肾毒性11；而90年代推出的三唑类抗真菌药，仅氟康唑敏感率较高70%，酮康唑及其咪康唑的敏感率都低于50%，且存在40%以上的中介率；特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%；氟康唑敏感性较好、药物毒副作用小，可作为安全有效的抗真菌药物。综上所述，真菌的感染在临床上逐渐增加，对常用抗真菌药存在不同程度的耐药性，合理有效的预防性用药也为减少耐药菌株的产生具有一定的作用，根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。 参考文献：1 徐英春，王澎，陈民钧辉瑞公司全球多中心酵母菌敏感性监测结果J中国抗感染化疗杂志，2003，3(3)：1871902 Wenzel R, Brewer TF, Butzler JP, et al. fungi, A guide to infection control in the hospital(2nd Edition),international society for infection diseasesM.Boston,MA.USA,BC Decker Inc Hamilton.London,2002,157-1593 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）S.东南大学出版社出版发行.南京.1997，540-548.4 National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method for antifungal disk diffusion susceptibility testing of yeasts;proposed guidelineS.NCCLS M44-P,2003,123：65 常东，蒋伟，黄志红,等.真菌感染及耐药性分析J .中华医院感染学杂志，2005，15(3)：345-347.6 王亚霞，魏琴，刘亚琼,等.医院的白色念珠菌感染原因探讨及预防J .中华医院感染学杂志，2003，13(9)：885-887.7 沈翠芳，张晓祥，临床标本的真菌培养和药敏分析J .中华医学感染学杂志，2003，13(4)：382-383.8 张秀珍，胡云建，陶凤蓉,等.临床细菌室必须重视真菌检测J .中华检验医学杂志，2005，9，28(9)：888-