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文档简介

珠蛋白生成障碍性贫血诊断 分子生物学讨论课 第三部分 发病机理 珠蛋白合成减少 珠蛋白合成正常 二者结合后 珠蛋白过剩 珠蛋白包涵体 粘附于红细胞膜上 红细胞变形性下降 无法通过脾窦壁孔 停留在脾索 珠蛋白不稳定 自由基产生增加 氧化红细胞膜蛋白脂质 红细胞膜结构破坏 溶血 第三部分 链减少 链过剩 链聚集 幼红细胞异常 大多数幼红细胞在骨髓中死亡 少数异常红细胞存活 食物铁 铁吸收增加 铁负荷增加继发性血色病 低色素性红细胞 含包涵体的红细胞在脾破坏 骨髓膨胀 骨骼变化 溶血 第三部分 诊断方法 PCR RFLP PCR ASO AS PCR RDB 限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术 等位基因特异性寡核苷酸杂交法 等位基因特异性PCR 反向印记杂交 第三部分 PCR RFLP 基本原理 第三部分 PCR RFLP 突变型基因限制酶切位点消失 限制酶无法对其进行切割 电泳得到片段较大的结果 由此可以与野生型进行区分 第三部分 PCR RFLP 突变情况 17A T CAAG C TAG 使用酶 Mae 结果区别 正常 产生455bp片段 突变 产生72bp和373bp两个片段 第三部分 PCR ASO ASO技术 又称探针斑点杂交技术 是基于核酸杂交的一种基因检测方法 第三部分 PCR ASO PCR ASO检测结果 第三部分 PCR ASO 第三部分 AS PCR 第三部分 反向印迹杂交 反向印迹杂交 一般的斑点杂交 基因样品 基因样品 探针 探针 硝酸纤维素膜或尼龙膜 第三部分 反向印迹杂交 制作ASO探针 正常 突变 显示正常人RDB结果 父母RD
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