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酶学总结xyj范文 酶学总结-xyj陈清西酶学考试试题选集 一、名词解释（二十六选五，每个两分）1)2)3)4)5)6)7)8)9)10)11)12)13)14)15)16)17)全酶:由酶蛋白和辅助因子结合形成的复合物称为全酶。 辅助因子属于结合蛋白质的酶是由蛋白质部分和非蛋白质部分组成的，非蛋白质部分称为酶的辅助因子。 2+辅基与酶蛋白结合紧密，不能通过透析或超滤方法将其除去的辅助因子。 Eg羧肽酶A（Zn）辅酶与酶蛋白结合疏松，用透析或超滤方法可将其与酶蛋白分开的辅助因子。 Eg羧化酶（TPP）底物载体substrate carriers某些非蛋白质化合物，其不是酶的一个组成部分，但却是酶催化作用所必需的，在催化反应中起了携带电子、质子和功能基团的作用，因此这类物质通常被称为底物载体或辅底物。 Eg:NAD+。 酶蛋白属于结合蛋白质的酶是由蛋白质部分和非蛋白质部分组成的，纯蛋白质部分称为酶蛋白。 酶的专一性酶对底物的选择性称为酶的专一性。 一般可分为，绝对特异性，相对特异性和立体异构特异性。 反应专一性一类酶只能催化一类反应。 底物专一性一类酶只能作用于一类底物。 初速度:在反应初始的一段时间内，产物生成量与酶反应时间成正比，这时的速度为初速度。 （一般也以底物浓度变化在起始浓度的5%以下的速度作为初速度的近似值。 ）酶活力单位在最适条件下，每分钟催化1mmol底物转化为产物所需的酶量为一个酶活性单位，亦称国际单位。 酶活力及比活力酶活力是指酶催化一定化学反应的能力，亦即酶活性。 （其大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的速度来表示。 ）比活力每毫克蛋白所含的酶活力单位，用U/mg表示。 酶的克分子活力酶催化反应的动力学模型及动力学方程a.也称为动力学机理，是描述酶怎样与其底物和产物结合而形成中间物的方程式。 b.依据动力学模型，推导出的能够表示反应速度与底物浓度的方程式。 Haldane关系式酶的失活作用与抑制作用a.凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为酶的失活作用。 b.由于酶的必需基团化学性质的改变，但酶未变性，而引起酶活力的降低或丧失称为酶的抑制作用。 可逆抑制与不可逆抑制a.抑制剂与酶分子以非共价键结合而引起酶活力降低或丧失，但这种抑制可用物理方法除去抑制剂后被解除，使酶分子重新获得活性。 b.抑制剂与酶分子上的某些必须基团一共价键的方式结合，引起了酶活力的丧失，这种抑制不能通过物理方法除去抑制剂而恢复。 Ks型与Kcat型抑制剂a.此类抑制剂是根据底物的化学结构设计的，具有底物类似的结构，可以和相应的酶结合，同时还带有一个活泼的化学基团，能与酶分子中的必需基团反应，进行化学修饰，从而抑制酶活性。 b.此类抑制剂是根据酶催化过程设计的，它不但具有天然底物类似的结构，且本身也是酶的底物，能与酶结合发生类似于底物的变化，但抑制剂还有一个潜伏的基团，当酶对它进行催化反应时，该潜伏基团被暴露或活化，并作用于酶活性中心的必需基团或酶的辅基，使酶不可逆失活。 这类抑制剂的专一性极高，有人将之称为自杀性底物。 酶的稳定状态中间物和过渡状态复合物序列机理与乒乓机理Random BiTer mechanismBi UniUni ping pong mechanism酶原与酶原的激活a.无活性的酶的前身物质称为酶原。 b.酶原受某种因素作用后，转变成具有活性的酶的过程叫酶原的激活。 酶的活性中心与酶活性必需基团a.酶分子中的必需基团在空间结构中彼此靠近，形成一个能与底物特异性结合并催化底物转化为产物的特定空间区域。 这一区域称为酶的活性中心。 b.与酶活性密切相关的基团称为必需基团。 酶作用的“诱导契合”与“底物形变”酶作用的“邻近效应”与“定向效应”18)19)20)21)22)23)24)25)26) 二、简答题（五个，每个八分）及计算题（）1.酶分为哪六大类？说明各大类酶的作用特点。 1)氧化还原酶类oxide-reductases:催化氧化还原反应，主要包括脱氢酶和氧化酶。 Eg乳酸脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 2)转移酶类transferases催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。 Eg谷丙转氨酶催化氨基转移反应。 3)水解酶类hydrolases催化底物的加水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及酯酶等。 Eg脂肪酶催化的脂的水解反应。 4)裂解酶类lyases催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 Eg延胡索酸水合酶催化的反应。 5)异构酶类isomerases催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。 Eg6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。 6)合成酶类ligases又称连接酶，能够催化C-C、C-O、C-N以及C-S键的形成反应。 这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。 Eg丙酮酸羧化酶催化的反应。 2.假设混合液中有五种酶，E1,E2,E3,E4,E5,其分子量及值分别如下情况 （1）51234 （2）35124 （3）12453附凝胶过滤柱层析分子筛作用。 Sephadex G、Sepharose B、Bio-Gel P。 离子交换柱层析a.阳离子交换剂CM-cellulose、P-Cellulose、SM-cellulose、SE-cellulose。 b.阴离子交换剂DEAE-cellulose、PAB-cellulose、GE-cellulose。 c.pHpI，带负电；pH 离子交换凝胶过滤柱层析DEAE-Sephadex、CM-Sephadex。 3.何谓酶的活力和比活力？其大小说明什么问题？酶的活力酶催化一定化学反应的能力。 值大小，表示在一定条件下所催化的某一化学反应速度。 活力越大，反应速度越快。 比活力每毫克蛋白所含的酶活力单位。 值大小，可用来比较每单位重量酶蛋白的催化能力，比活力越高，说明酶的纯度越高。 4.假设提取液中含有三种酶，其性质如下，请设计实验方案来分离纯化这三种酶。 称取50mg某商品蛋白酶粉，配制成25mL酶溶液。 取出0.1mL酶液，在以酪蛋白为底物的测活体现中检测蛋白酶活力，得知，30min后，可以产生900微克的酪氨酸（Tyr）；另取5mL酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.40mg。 以每分钟产生1微克的酪蛋白（Tyr）的酶量为一个活力单位，请计算1)每毫升酶溶液的酶活力；2)酶的比活力；3)1g样品所具有的总活力单位。 答按蛋白质中氮的质量分数为16%计算，5mL酶液中，蛋白质量为0.4mg*6.25=2.5mg。 1)900ug/30min/0.1mL=300U/mL;2)300U/mL*5mL/2.5mg=600U/mg;3)300U/mL*25mL/0.05g=1.5*105U/g.5.何谓米氏方程？讨论米氏方程并说明Km的意义。 德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学说对酶促反应的动力学进行研究，推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式V=Vms/(Km+s)，称为米氏方程。 a)由米氏方程可知，当反应速度等于最大反应速度一半时,即V=1/2Vmax,Km=S。 上式表示,米氏常数是反应速度为最大值的一半时的底物浓度。 因此,米氏常数的单位为mol/L。 不同的酶具有不同Km值，它是酶的一个重要的特征物理常数。 b)Km值只是在固定的底物，一定的温度和pH条件下，一定的缓冲体系中测定的，不同条件下具有不同的Km值。 c)Km值表示酶与底物之间的亲和程度Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低;Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。 6.酶催化反应。 根据快速平衡理论，米氏常数Km等于Ks，若反应中有竞争性抑制剂存在，这时表观米氏常数（Km）增大，那么Ks值也增大吗？为什么？Ks值不变。 Ks值表示的是ES的解离常数值为K-1/K1，与底物和酶的性质有关，为一常量。 #7/8/9三题选其一考之。 7.说明三种抑制剂（竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制）的IC50与抑制常数的关系？（IC50为使酶活力抑制50%所需的抑制剂浓度。 ）C:=,I=,I=NC:UC:=,I=8.为什么在竞争性抑制类型中，抑制剂只改变Km值，而不影响Vm值？但在非竞争性抑制类型中，抑制剂只改变Vm值，而不影响Km值？9.某酶Km值为1.0mmol/L，在2.0mmol/L底物的测活体系中，假如抑制剂的抑制常数为1.5mmol/L，求三种抑制剂的IC50。 C:=,I=4.5mmol/L,I=1.5mmol/L,I=2.25mmol/L NC:UC:10.某酶作用于底物A的Km是210-3M,假定初始底物为10-5M,1min终了时，有2%底物转变成产物。 1)2)3)4)5)6)答米氏方程的积分形式.在3min终了时，底物转变成产物的百分数是多少?3min后，底物和产物浓度各为多少？底物转变8%为产物所需要的时间为多少？随着酶浓度的不断利用，可达到最大反应速度Vm为多少？S0为多少时可以测到Vm？在S0为这浓度下，3min底物会有百分之几转变成产物?这是产物浓度是多少？1)因为S0.01Km,所以Km+SKm，所以积分形式.2)3)4)5)6)因为T=1min,S/S0=0.98，所以T=3min时，S/S0=0.94，所以底物转变成产物的百分数为6%。 底物浓度为10-5*0.94=9.4*10-6M;产物浓度为6*10-6M。 S/S0=0.92时，t=4.58min。 代入T=1min,S/S0=0.98，得Vm=4*10-5mol/(Lmin)S范围大于等于100Km11.下面的曲线具有哪两种的动力学意义？非竞争性抑制。 不可逆抑制剂12.某酶的Km为510-4M，如果该酶制品的Vm为46.5uM/min，在底物为6.25mM和（a）竞争性抑制剂，（b）非竞争性抑制剂，(c)反竞争性抑制剂的浓度皆为5.00mM的情况下，其反应速度各为多少？K1在这三种情况下均为2.0810-3M。 （d）这三种情况的抑制程度多大？（e）若底物浓度增大10倍，这三种情况的抑制程度变化多少？同九题13.列表说明在Ordered Bi Bi和pingpongBiBi中产物的抑制情况。 10年期末题1.说