MM_FS_CNJ_0262 出口坚果及坚果制品中喹硫磷残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0262出口坚果 坚果制品 喹硫磷 残留量 气相色谱法 外标法定量MM_FS_CNJ_0262出口坚果及坚果制品中喹硫磷残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口核桃(包括核桃仁)、杏仁中喹硫磷残留量的检验。2.原理概要用丙酮提取试样中的喹硫磷，提取液经浓缩，残渣用乙酸乙酯溶解，溶液经与氯化钠饱和溶液进行液-液分配净化，净化后的乙酸乙酯溶液经蒸干后，制成丙酮样液。然后用配有氮磷检测器的气相色谱仪进行测定，外标法定量。如有必要可用气相色谱-质谱法确证。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂无水硫酸钠：经650灼烧4h，置于干燥器内备用；丙酮：重蒸馏；乙酸乙酯：重蒸馏；氯化钠溶液：饱和水溶液；喹硫磷标准品：纯度98%。；喹硫磷标准溶液：准确称取适量的喹硫磷标准品，用苯配成浓度为1.0mg/kg的标准储备液，用时再根据需要用丙酮稀释至适当浓度的标准工作液。3.2.仪器气相色谱仪：配备氮磷检测器及质谱检测器；微量注射器：1L；旋转蒸发器；离心机：3000r/min。4.抽样和制样4.1.检验批以不超过50t为一检验批。50t袋装核桃约为1000袋；袋装杏仁约为625袋。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量按式(1)计算抽样件数：a(1)式中：N全批件数；a抽样件数。注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。4.3.取样工具取样铲或取样勺；分样板；样品筒(袋)：可密封；分样布或适应铺垫物。4.4.抽样方法4.4.1.倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取4.2所规定的应抽样袋数的10%(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约成45倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出。查看袋内和袋间品质是否均匀。确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品，并立即将样品倒入盛样器中。每袋抽取样品的数量应基本一致，而且核桃样品不得少于20颗，杏仁样品不少于200g。4.4.2.袋内抽样：按4.2规定的应抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周的上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。将应抽取各袋拆开袋口缝线35针，用取样勺从开口处抽取样品立即缝好袋口，并将所取样品倒入盛样器内，每袋抽取样品的数量应与2.4.1基本一致。合并倒包和袋内抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分出核桃样品不少于500颗(杏仁样品不少于2kg)。倒入盛样器中，加封后标明标记，并及时送实验室。4.5.试样制备4.5.1.制样工具样品切碎机或粉碎机；筛子：2.0mm圆孔筛；分样板；盛样瓶：具塞广口瓶。4.5.2.制样方法将核桃去壳，取可食部分，杏仁取原样，用四分法缩分出约200g。用样品切碎机或粉碎机，将缩分出样品全部粉碎或切削成尺寸不大于1mm能通过2.0mm圆孔筛的碎粒。充分混匀，均分成两份试样，分装于洁净的盛样器内，密封，标明标记。4.6.试样保存将试样于5下保存。注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.1.提取和净化称取试样10.0g(精确至0.1g)，加水20mL，放置2h后。加入100mL丙酮，搅拌2min，于离心机上以3000 r/min的转速离心约5min。移取上清液于减压浓缩器中。于残渣中再加入50mL丙酮与上述同样操作。将上清液合并于减压浓缩器中，于40下除去大部分丙酮，再用氮气流蒸发至干。用乙酸乙酯将残渣溶解并转移入预先装有100mL乙酸乙酯和50mL饱和氯化钠溶液的500mL分液漏斗中。剧烈振荡5min，静置。移取乙酸乙酯层于一500mL锥形瓶。于水层中再加入100mL乙酸乙酯与上述同样操作。移取乙酸乙酯层，合并于上述锥形瓶中。加入适量无水硫酸钠，放置并不时振荡1h，过滤于减压浓缩器中。用250mL乙酸乙酯淋洗锥形瓶及滤纸上的残留物，合并于减压浓缩器中，于40除去大部分乙酸乙酯，改用氮气流吹至近干。残留物用丙酮定容至10.00mL，溶液供气相色谱仪测定。5.2.测定5.2.1.色谱条件色谱柱：石英毛细管柱，HP-1.30m0.32mm(内径)，液膜厚度0.25m；载气：氮气，纯度99.99%,1.0mL/min；尾吹气：氮气，20mL/min；氢气：3mL/min；空气：100mL/min；色谱柱温度：80(1min) 20/min 280(5min)；进样口温度：250；检测器温度：300；进样量：1L；进样方式：无分流，1min后开阀。5.2.2.色谱测定根据样液中被测农药含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。工作溶液和待测样液中农药的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。对标准工作液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，喹硫磷的保留时间约为10.9min。标准品色谱图见附录A中图A1。5.3.确证5.3.1.气相色谱-质谱条件色谱柱：石英毛细管柱，DB-5,30m0.25mm(内径)，液膜厚度0.25m，或相当者；载气：氦气，纯度99.99%,1.2mL/min；色谱柱温度：70(1min) 30/min 250(5min)；进样口温度：250；色谱-质谱接口温度：280；离子源温度：200；进样量：1L；进样方式：无分流，1min后开阀；电离方式：EI；电离能量：70eV；扫描方式：全扫描，50650 amu；溶剂延迟：8min。5.3.2.色谱-质谱确证对标准溶液和样液按5.3.1的条件进行测定时，若样液与标准溶液在保留时间相同的位置有峰出现，则用质谱图对其进行确证。标准品质谱图见附录A中图A2。5.4.空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。6.结果计算用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中喹硫磷残留含量：XhcV(2)hsm式中：X 试样中喹硫磷残留含量，mg/kg；h 样液色谱图中喹硫磷的峰高，mm；hs 标准工作溶液色谱图中喹硫磷的峰高，mm；c 标准工作溶液中喹硫磷的浓度，g/mL；V 样液最终定容体积，mL；m 称取的试样量，g。注：计算结果需扣除空白值。7.低限、回收率的测定7.1.测定低限本方法对于核桃(核桃仁)、杏仁中喹硫磷残留量的测定低限均为0.002mg/kg。7.2.回收率核桃样品中添加喹硫磷的浓度和回收率的实验数据：在0.002mg/kg时，回收率为85%；在0.020mg