实验一 头孢地尼在家兔体内药物动力学-1(1).doc

实验一 头孢地尼在家兔体内药物动力学过程的研究一、实验目的通过实验初步掌握兔体内血药浓度测定方法。掌握血药浓度法求解药物动力学参数。二、实验原理1.药物动力学原理药物的血管外给药是临床上的主要给药方式。血管外给药的吸收过程和消除过程在正常计量下一般均属于一级动力学过程。一级吸收药物动力学参数的求算，可以采用作图法或计算机拟合的方法求得。为了通过实验进一步理解和掌握药动学原理，本实验的数据处理采用作图法。头孢地尼在正常给药剂量下按表观一级吸收过程进入体内，又按表观一级过程消除，且在体内的分布过程符合双室模型。药物的表观一级消除速度常数k和一级吸收速度常数ka可以借助于血要浓度时间数据用线性回归法和残数法求得。具体过程如下： 依据简化的N室线性乳突模型 （图中，为给药剂量；F为吸收百分数；为吸收部位的药量；为一级吸收速度常数；为中央室内药物量；为周边室内药物量；、和含义同二室模型静脉注射给药。）可得出头孢地尼经血管外途径给药后，在体内的吸收、分布、消除及在各隔室间的转运符合下列方程：式中，为吸收部位药物的变化速度； 为中央室药物的转运速度； 为周边室药物的转运速度。上述方程组利用拉氏变换或解线性方程组等方法可解得： 以代入式（9-45），得到血药浓度C与时间t的函数关系式如下：这两个积分模型反映了二室模型药物血管外给药途径给药后，中央室内药物量及药物浓度即血药浓度随时间的变化规律。根据式这两个积分模型，即动力学方程，可求出算基本参数。将式以血药浓度表示的积分是简写成如下形式：该式中 我们知道，C的积分是简式是一个三项指数函数的曲线，以血药浓度的对数对时间作图，应用残数线可将式中的三项指数曲线分解出它的三个指数，从而求出参数，和。其原理如下图所示：将各组实验数据代入动力学方程并应用残数法绘出lnC-t图及相关的残数线。根据上述方法求得的双隔室模型的基本参数可求得双隔室模型的药物动力学参数。方法如下：（1）转运速度常数，： 由可解出计算公式： 从而可继续求出和，即：（2）中央室表观分布容积根据式可以得出（3）半衰期 根据血管外途径给药的二室模型的三个时相，相应有三个半衰期，即：吸收相半衰期：分布相半衰期：消除相半衰期：（4）.血药浓度-时间曲线下面积 根据AUC的定义，有：所以（5）.总表观分布容积为与之和。（6）总体清除率将所求得的双隔室模型基本参数分别代入上述公式，便可以求出本实验的所有药物动力学参数。2. 头孢地尼概述头孢地尼(Cefdinir)，是新一代的头孢第三代口服抗生素，其口服吸收好，不良反应少，抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有较高的抗菌活性。临床上主要用于治疗细菌的感染，特别是SJL呼吸道感染，疗效较好。头孢地尼的化学名称为(6R,7R)-7-(Z)-2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-羟基亚胺基乙酰氨基-8-氧代-3-乙烯基-5-硫杂-1-氮杂双环4.2.0辛-2-烯-2-羧酸; 分子式为 C14H13N5O5S2，分子量为395.42。结构如下图所示：头孢地尼(Cefdinir)为白色结晶性粉末。微溶于磷酸盐缓冲液,几乎不溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等一般有机溶剂,无明显熔点，170分解。空腹口服100mg、200mg，3.74.4h血药浓度达峰值(1.11.74g/m1)。半衰期：1.61.8h，024h尿中以原药形式排出给药量的25.933.3。由于头孢地尼是临床上常用的药物，所以难免与一些常用的药物合并使用，因此研究头孢地尼与一些常用的药物，包括一些内源性物质共存于体内时其药物动力学的变化是十分必要的。为了了解头孢地尼的体内药物动力学过程，本实验采用给家兔口服头孢地尼的给药方案，按照规定时间点测定头孢地尼血药浓度，并计算药物动力学参数。三、实验内容1. 头孢地尼的标准溶液以及标准曲线的制备精密量取离心后的空白血浆500L，至离心管中，精密加入加入50L 35%高氯酸, 涡旋混匀1 min；再加入头孢地尼浓度为0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0gmL-1的标准血浆100l 和100l 精密加入内标物甲硝唑（10g/ml），涡旋混匀1 min，于4000rmin-1 离心10min。取上清液（如有浑浊现象需用0.22m微孔滤膜滤过，取续滤过液）进样分析。根据测得数据进行线性回归，求得回归方程。2给药方案及样品处理取体重3kg左右健康家兔，口服（灌胃）头孢地尼（1片，每片100mg）。按照预先设定时间从家兔耳缘静脉采1ml，放入加肝素化的离心管中离心10min。精密量取离心后的血浆500L，至离心管中，精密加入加入50L 35%高氯酸, 涡旋混匀1 min；再加入100L 精密加入内标物甲硝唑（10g/ml），涡旋混匀1 min，于4000rmin-1 离心10min。取上清液（如有浑浊现象需用0.22m微孔滤膜滤过，取续滤过液）进样分析。3血药浓度测定色谱柱：汉邦C18（2504.6mm,5m）流动相：乙腈：0025 molL。1磷酸二氢钠缓冲盐溶液(PH 324)=15：85，流速：1.0ml/min柱温：35进样量：20l 检测波长：286nm用本法测定血浆中头孢地尼最低浓度0.1g/ml。四、记录与参数计算表 实验测定记录兔血药浓度g/ml空白0.511.5234.05.0AC(g/ml)数据整理及参数计算:以血药浓度为纵坐标，以时间为横坐标做血药浓度时间曲线，求其AUC0。以血药浓度的对数对时间做图，见图，判断药物的体内过程源于何种模型，求得消除速度常数k。根据残数法求ka 。计算参数tmax、Cmax、t1/2