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薄层紫外法测定如达六味散中栀子甙含量更新日期：2010-11-19 点击： 许良王青虎特木尔巴根 提要采用薄层紫外法测定了蒙药如达六味散制剂中的栀子甙含量。结果显示：栀子甙的平均回收率为98.23%， RSD为1.2%。该方法能够有效地控制制剂质量。 关键词如达六味散；栀子甙；薄层紫外法 Quantitative Determination of Cape Jasmine Glucoside in Mongolian Medicine Ruda Liuwei San by TLC-UV Spectrophotometry Xu Liang, Wang Qinghu, Temuerbagen Inner Mongolia College of Traditional Mongolian Medicine,Tongliao 028041 AbstractCape Jasmine Glucoside in preparation Ruda Liuwei San was determined by TLC-UV spectrophotometry here. The results showed that the average recovery for Cape Jasmine Glucoside is 98.23% and the RSD is 1.2%. The method could control the quality of the preparation. Key wordsRuda Liuwei San;Cape Jasmine Glucoside;TLC-UV spectrophotometry 如达六味散是由栀子、木香、全石榴、闹羊花、荜茇、苏格木勒等药材组成的制剂。在蒙医临床上主治“巴达干”“宝日”引起的呃逆、呕吐、胃痉挛等证。为控制本制剂的质量，本文采用薄层紫外法对其栀子的含量进行了测定。 1材料 1.1药品：木香、栀子、全石榴、闹羊花、荜茇、苏格木勒购自通辽市药材站，并均由蒙药鉴定教研室鉴定。木香为菊科植物木香 Aucklandia lappa Decnede 干燥根。栀子为茜草科植物栀子 Gardenia jasminoides Ellis 的干燥成熟果实。闹羊花为杜鹃花科植物羊踯躅 Rhdodendyon molle G.Don 的干燥花。荜茇为胡椒科植物荜茇 Piper longum L 的干燥果穗。苏格木勒为姜科植物砂仁 Fructus Amomi 的干燥果实。如达六味散，由哲理木盟蒙医研究所提供。批号为9709051。按文献1处方及方法配制的自拟制剂和缺栀子空白对照品。栀子甙对照品，中国药品生物制品检验所提供。 1.2仪器：754型紫外分光光度仪(上海分析仪器厂)；80-1型离心机(上海手术器械厂)；UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；微量进样器(上海医用激光仪器厂)。 1.3试剂：栀子甙对照品溶液(精密称取栀子甙对照品20 mg，置10 ml容量瓶中，加适量甲醇溶解后，用甲醇稀释至刻度)。摇匀，即得栀子甙对照品溶液。硅胶HF254(青岛海洋化工厂)。所用试剂均为分析纯。 2实验条件 2.1薄层色谱条件 2.1.1薄层板的制备：取硅胶HF254及0.5%CMC-Na水溶液13的比例研磨混合，均匀涂布于玻璃板(15 cm20 cm)上，自然晾干，105活化1 h，置于干燥器中备用。 2.1.2展开剂的选择：取适量样品甲醇提取液，栀子甙对照品溶液和栀子空白对照溶液点于同一个备用的硅胶HF254板上，以氯仿甲醇(31)为展开剂展开，取出晾干，在紫外光(254 nm)下观察结果如图1所示： 图1 如达六味散栀子甙的薄层色谱图 1.如达六味散供试品 2.栀子甙对照3.空白对照品 2.2紫外法测定条件 2.2.1测定波长的选择：分别精密吸取供试品溶液和栀子甙溶液对照品溶液，空白对照液点于同一硅胶HF254板上，展开，洗脱，定容。照洗脱率液测定相下操作。于200300 nm波长范围内扫描，绘制紫外吸收光谱图(如图2所示)，由图可知，栀子甙在236 nm处有最大吸收。 图2 如达六味散栀子甙的紫外吸收光谱图 a.如达六味散供试品 b.栀子甙对品c.空白对照品 2.2.2标准曲线的绘制：精密吸取栀子甙对照品溶液10、20、30、40、50 l于10 ml刻度试管中，加甲醇至刻度，摇均。以甲醇空白对照，在236 nm处测吸收度。其回归方程为A=0.00280.0272C，=0.9998 2.2.3栀子甙硅胶HF254薄层洗脱率测定；精密吸取栀子甙对照品溶液10、20、30、40、50 l点于同一块硅胶HF254薄层板上，以氯仿甲醇(31)为展开剂展开16 cm，取出晾干，在紫外灯下画出栀子甙的斑点范围，刮取该部分硅胶，甲醇洗脱，离心5 min，吸取上清液，反复3次，合并洗脱液，定容至10 ml。以同样面积的空白硅胶按上述洗脱法制备空白对照。测得平均回收率为98.50%， RSD%=1.50。 3含量测定2，3 3.1供试品溶液的制备：取成药、自拟制剂及栀子空白对照品各3份，每份10 mg，精密称定，置索氏提取器中，用100 ml石油醚脱脂，再用100 ml甲醇加热回流至无色。过滤提取液，用适量甲醇洗脱残渣2次。合并滤液和洗脱液，并浓缩至25 ml备用。 3.2精密度实验：在同一薄层板上点栀子甙对照品溶液30 l，各点6个点。展开，洗脱，定容，测的如同洗脱率测定。结果 RSD分别为1.4%和1.9%。 3.3稳定性实验：考察结果标明，栀子甙对照品溶液的吸收度在12 h内保持不变。 3.4加样回收率实验：精密称取自拟制剂适量，加入栀子甙对照品适量，其它同洗脱率的测定，计算回收率，结果见表1。 表1加样回收率测定结果 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 20 19.92 99.60 20 19.62 98.10 98.23 1.2 19 18.39 96.79 19 18.70 98.42 3.5样品含量测定：精密吸取成药及自拟制剂供试品溶液30 l各点于同一个硅胶HF254板上，其它同洗脱率的测定。结果见表2。 4小结 4.1本实验所用的展开剂，洗脱稳定，展开效果好，栀子甙斑点集中，重现性好，不存在背景干扰。实验回收率高。 4.2利用薄层紫外法测定制剂中栀子甙含量是可行的，可以把该方法用作本品质量控制手段。 表2样品栀子甙的含量测定(%) 样品 编号 含量 平均含量( s) RSD 1 0.5590 2 0.5773 成 3 0.5773 0.56970.013 2.2 药 4 0.5834 5 0.5651 6 0.5559 自 1 0.7822 拟