医疗：免疫学应用课件.ppt

一 复习上次理论课内容1 型超敏反应特点有何不同 2 型超敏反应可通过哪三条途径破坏靶细胞 3 型超敏反应临床常见疾病有哪些 4 引起 型超敏反应的IC是哪种 通过哪些方式导致组织损伤 5 型超敏反应临床常见疾病有哪些 6 型超敏反应发生机制通过哪2种方式完成 7 型超敏反应临床常见疾病有 二 引入新课 教学课题 第12章免疫学防治第13章免疫学检测 教学目标 1 掌握人工免疫的概念 常用生物制品及特点2 熟悉抗原抗体反应类型及意义3 了解体外抗原抗体反应的特点及影响因素教学重点 人工免疫的概念 常用生物制品及特点教学难点 免疫标记技术 第十二章免疫学防治 免疫学防治是根据获得性免疫的机制 应用人工免疫法预防和治疗疾病 第一节免疫学预防一 人工免疫的概念和种类 一 人工免疫的概念 二 人工免疫的种类1 人工主动免疫2 人工被动免疫3 过继免疫 是指给患者转输具有在体内继续扩增效应细胞的一种治疗方法 人工主动免疫 人工被动免疫过继免疫的特点比较 特点主动免疫被动免疫过继免疫输入物质抗原抗体骨髓细胞 LAK TIL 效应T细胞等免疫力出1 4周后注入后立较快现时间生效即生效免疫力维数月 数年较短不确定持时间用途多用于预防多用于紧急多用于治疗预防或治疗 二 用于人工主动免疫的生物制品死疫苗 乙脑 百日咳 狂犬病 钩体疫苗等 一 疫活疫苗 减毒或无毒 卡介苗 麻疹疫苗等苗亚单位疫苗重组抗原疫苗合成疫苗重组载体疫苗新型疫苗基因工程疫苗DNA疫苗结合疫苗转基因植物疫苗 二 类毒素何谓类毒素 常用生物制品有哪些 死疫苗与活疫苗的区别 三 计划免疫 planedimmunization 计划免疫是根据特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析 按照规定的免疫程序有计划地进行人群免疫接种 以提高人群免疫水平 达到控制以至消灭相应传染病的重要措施 四 预防接种的注意事项 第二节免疫治疗 指用免疫学原理 针对疾病的发生机制 人为地调整机体的免疫功能 以达到治疗目的所采取的措施 一 以抗体为基础的免疫治疗 一 抗感染的动物免疫血清 破伤风抗毒素 白喉抗毒素 抗狂犬病病毒血清 应用原则 早期 足量 二 人免疫球蛋白制剂 人血浆丙种球蛋白 胎盘丙种球蛋白 人特异性免疫球蛋白 三 单克隆抗体与基因工程抗体 抗细胞表面分子McAb 抗细胞因子McAb 抗体靶向治疗 用特异性的单抗为载体 将抗瘤药物 放射性核素等细胞毒性物质靶向性携带至肿瘤病灶局部 可特异性地杀伤肿瘤细胞 而对正常细胞损伤较轻 二 以细胞为基础的免疫治疗 一 肿瘤细胞疫苗将经过处理具有免疫原性但无致瘤性的自体或同种肿瘤细胞输给肿瘤患者 使机体产生抗肿瘤免疫效应 用于治疗肿瘤 二 过继免疫治疗 三 造血干细胞移植 二 免疫效应细胞过继免疫治疗 三 以药物为基础的免疫治疗 免疫调节剂 包括 一 免疫增强剂1 转移因子2 免疫核糖核酸3 免疫因子 IFN IL 2 TNF 胸腺素等4 微生物制剂 卡介苗 短小棒状杆菌等5 化学合成剂 左旋咪唑 西咪替丁等6 多糖类制剂 中草药 茯苓多糖 人参多糖等 二 免疫抑制剂1 化学合成制剂 硫唑嘌呤 环磷酰胺 糖皮质激素2 抗淋巴细胞和抗胸腺细胞丙种球蛋白3 抗生素类 环孢菌素AFK 506即大环内酯抗生素4 单克隆抗体 抗CD3 CD4抗体 抗细胞因子抗体5 中草药 雷公藤 大黄等 第十三章免疫学检测 概述免疫学检测 诊断 是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原 抗体 免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验手段及分子生物学技术在免疫学研究中的应用 免疫学技术的应用极为广泛 可用于疾病的诊断 疗效评价及理论研究等 第一节免疫细胞的检测一 免疫细胞的分离与纯化 一 免疫细胞的分离外周血单个核细胞 peripheralbloodmononuclearcell PBMC 的分离 PBMC主要包括淋巴细胞和单核细胞 二 免疫细胞的纯化1 T淋巴细胞数量检测方法 E花环试验 正常值60 80 T细胞特异性抗原的检测 通过检测T细胞CD抗原 了解外周血T细胞数量和亚群的变化 正常值 CD3 60 80 CD4 55 60 CD8 20 30 CD4 CD8 比值一般为2 1 2 B淋巴细胞数量检测方法 采用免疫荧光技术直接法 将荧光标记的兔抗人免疫球蛋白与已分离的人外周血单个核细胞作用 荧光显微镜下观察 发出荧光的细胞为SmIg 细胞 即成熟B细胞 正常值 正常人外周血成熟B细胞一般为8 15 二 免疫细胞功能检测 一 T细胞功能检测1 体外检测法 T淋巴细胞转化试验 PHA ConA等 2 体内检测法 注 T细胞检测的意义 1 检测机体细胞免疫功能2 判断临床治疗效果3 协助诊断某种传染病 常用结核菌素 OT 皮肤试验 取结核杆菌纯化蛋白衍生物PPD注射于前臂屈侧皮内 48 72h后观察结果 局部出现红肿 硬结 大于5mm者为阳性 结核菌素试验 阳性 二 B细胞功能测定方法 1 B淋巴细胞转化试验 用SPA2 抗体形成细胞测定意义 测定体液免疫功能第二节抗原或抗体的体外检测抗原抗体反应在体内表现为体液免疫的抗感染作用或引起免疫病理损伤 在体外可出现特异性结合的可见反应 抗原抗体反应体外检测的原则 已知抗原测定未知抗体已知抗体测定未知抗原 一 抗原抗体反应的特点 一 特异性 指一种抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合发生反应的专一性能 二 可逆性 是指抗原与抗体结合成复合物较稳定 但在低pH值 高盐条件下可解离 但仍保持原有的理化性质与活性 三 比例性及可见性 抗原抗体的结合能否出现肉眼可见反应 取决于两者的比例是否适当 若比例合适则形成大复合物 出现肉眼可见反应 四 阶段性1 特异性结合阶段 数秒至数分钟 无可见反应2 可见反应阶段 数分钟或数小时或更长时间 才出现肉眼可见反应 二 抗原抗体反应的影响因素 1 电解质 免疫学试验中多采用生理盐水稀释抗原和抗体 因电解质的存在使抗原抗体复合物失去电荷而凝聚 出现可见反应 2 酸碱度 抗原抗体反应最适酸碱度为ph6 8 ph过高或过低可改变抗原和抗体理化性质 影响反应结果 3 温度 最适温度为37 可增加抗原与抗体分子相互碰撞的机会 加快两者结合速度 三 抗原抗体体外检测常用的方法 一 凝集反应1 定义薄片法 定性 直接凝集反应试管法 定量 2 方法间接血凝试验间接凝集反应间接炭凝试验间接乳胶试验等辅助诊断传染病3 用途血型鉴定妊娠诊断 二 沉淀反应1 定义单向琼脂扩散试验2 方法双向琼脂扩散试验对流免疫电泳试验免疫比浊梅毒辅助诊断疾病3 用途鉴定菌型肝病 肝癌 乙型肝炎等 法医血迹鉴定各类Ig和补体成分的含量测定 单扩 三 免疫标记技术1 定义 是指用荧光素 酶 放射性核素等标记已知抗体或抗原进行的抗原抗体反应技术 2 特点 既可对样品作定性 定量检测 也可进行精确定位分析 敏感度高 特异性强 是目前应用最广泛的免疫学检测技术 免疫标记技术双抗体夹心法酶联免疫吸附试验间接法酶免疫技术竞争法等酶免疫组化法直接法3 方法荧光免疫技术间接法等放射免疫技术诊断病毒性疾病4 用途测定可溶性物质 AFP Ig CK 激素 维生素 药物