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计划类别科技攻关计划【精品资料】 计划类别科技攻关计划-成都市科技攻关计划申请表技术领域申请编号项目类别成都市科技计划项目申请书xx年度项目名称新型中药对牙周组织病理机制及细胞再生的分子生物学研究申请单位四川大学华西口腔医学院法人代表（盖章）起止年限xx-1-xx-12推荐单位四川大学申请日期xx-4成都市科学技术局制一申请单位信息表（类别为大专院校、科研院所、其它）单位名称四川大学华西口腔医学院组织机构代码40000919-4地址成都市人民南路三段落14#邮编610041邮件法人谢和平联系人杨青电话85403103手机类别经济类型项目负责人基本情况姓名黄萍性别女出生年月1965-1-29学历博士学位博士职称副教授所学专业口腔医学从事专业牙周病工作单位及职务四川大学华西口腔医学院牙周科电话85502343手真E-mail Huangping3yahoo.其它方式项目负责人曾承担各类科技计划项目情况计划名称项目名称名次政府资助额度（万元）起止时间完成情况省科技厅龈沟液中抗氧化酶水平与牙周炎的治疗和预防负责1.51999-xx完成省科技厅中药肉桂治疗牙周炎的实验基础和临床应用研究负责4.0xx-xx完成佳洁士口腔护理研究院Clonal Analysisof Porphyromonasgingivalis andassociation withAP负责1.0xx-xx完成项目负责人获奖情况其它承担单位名称在本项目分工一申请单位信息表（类别为企业）单位名称第一承担单位地址成都市人民南路三段落14#邮编610041邮箱组织机构代码40000919-4联系人杨青电话85403103手机类别经济类型职工人数550大专以上工程技术人员125从事研究开发的科技人员125推荐单位上年末企业资产信用状况单位:万元资产总额负债总额固定资产原值固定资产净值其中流动负债企业收入总额流动资产其中主营业务收入所有者权益总额税后利润总额注册资金（万元）开户银行帐号法人代表姓名性别出生年月电话职称院士学历现从事专业其它承担单位名称在本项目分工二申请项目信息表项目名称新型中药对牙周组织病理机制及细胞再生的分子生物学研究归口领域技术领域生物医学产品领域项目技术水平创新性本研究希望找到一中长期无毒副作用的中成药用于治疗牙周炎先进性目前还没有一种质量好,效果优的牙周炎局部应用中成药知识产权技术原创技术附件成果鉴定证书著作权证书登记证书合作开发协议立项证书其它院（校）地合作本项目是否院（校）地合作项目是否注若是，请提交相关证明。 院（校）名称联系人电话国际合作有无国际合作背景有无注若是，请提交相关证明。 合作方名称地址联系人邮箱电话融资及合作是否需要融资及合作是否融资方式、合作方式金额万元研究开发的目的、意义牙周病是牙菌斑引起的牙周组织感染性病变，通常可导致牙周组织结构破坏，直到牙周附着丧失，引起牙齿松动脱落，是造成成人失牙的主要原因。 因大量的研究表明牙周炎的发生主要与G厌氧菌及螺旋体有关，还有报道发现病毒和真菌也与牙周病的发生有关,有效的控制牙周致病微生物,消除炎症,诱导牙周组织再生是牙周炎治疗成功的关键，因此此WWH HOO将将其其列列为为重重点点防防治治的的口口腔腔疾疾病病之之一一为了控制菌斑，消除牙周病的始动因素，临床上使用抗菌疗法越来越广泛，并采用了多种给药方式（全身、局部、缓释，控释）。 但抗生素的使用具有局限性1不能同时作用于细菌、病毒、真菌;2有一定的毒副作用;3长期应用造成菌群失调,同时细菌易产生耐药性能不能从祖国的医学宝库中寻找一种安全可靠的纯天然药物呢？答案是肯定的随着中药基础理论的研究发现许多中药成分有抗菌消炎作用以往的研究表明许多中药如茶多酚，黄连，胡桃，忍冬等具有抑菌抗炎活性，但将这些药物用于牙周病的临床治疗国内外尚未见报道。 中药肉桂是一种新发现的对G厌氧菌、病毒和真菌有明显抑制作用的中草药由于桂皮醛抗菌，抗病毒，抗真菌及低毒非致癌性的特点，目前主要用在食品添加剂中作为防腐剂，以及作为食物的消毒剂。 另外小剂量的桂皮油对心血管系统和消化系统均有作用，可以和其它药物配伍达到补火助阳、疏通筋脉、温里散寒，止泻止痛的作用本课题在前人研究的基础上进一步证实中药桂皮醛对牙周优势菌如牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis），中间普氏菌（P.intermedia），具核梭杆菌等的体外抑菌作用，以及对大鼠实验性牙周炎的治疗作用，从体外,动物炎症模型及牙周再生细胞,抗癌方面全面探讨中药桂皮醛对牙周组织的作用关键技术内容、技术特点和创新点研究内容第一部分桂皮醛的体外抑菌活性(牙周优势菌,真菌,病毒)测定第二部分实验动物模型的建立及实验性牙周炎的治疗第三部分桂皮醛对牙周组织再生细胞的作用第四部分:抗癌作用技术特点:1从标准株和临床分离株全面探讨中药桂皮醛对牙周致病优势如牙龈卟啉菌,中间类杆菌,白色念株菌,病毒等的抑菌能力.2以动物炎症模型，研究治疗前后临床指标及GCF中的酶水平，细胞因子改变判断其抗炎活性.3以龈沟液作为测试对象取样易,量少,病人无痛苦,易接受,对牙周组织无损伤4以与人牙周膜成纤维细胞和小鼠成骨细胞共同培养，研究桂皮醛的牙周组织再生作用创新性以往的研究表明:许多单味中药如茶多酚,黄连,胡桃,忍冬等都具有抑菌抗炎活性,但将这些药物用于牙周病的临床治疗国内外尚未见报道.一些方剂如补肾固齿丸用于临床有明显的疗效.本研究希望找到一中长期无毒副作用的中成药用于治疗牙周炎.国内外相关行业现状、发展趋势、市场需求随着中医药基础理论的研究发现许多草药制剂如枣和厚朴的醇提取物对牙周病具有广谱的治疗作用,即对脆弱和损伤的牙周组织有再生作用,对引起牙周病的微生物有抗菌作用,对炎症有抑制作用.一些单味的中药茶多酚黄连胡桃忍冬等都具有抑菌抗炎活性;补肾固齿丸通过调节机体的防御体系对治疗牙周病也有一定的疗效.由于桂皮醛抗菌，抗病毒，抗真菌及低毒非致癌性的特点，目前主要用在食品添加剂中作为防腐剂，以及作为食物的消毒剂。 另外小剂量的桂皮油对心血管系统和消化系统均有作用，可以和其它药物配伍达到补火助阳、疏通筋脉、温里散寒，止泻止痛的作用本课题在前人研究的基础上进一步证实中药桂皮醛对牙周优势菌如牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis），中间普氏菌（P.intermedia），具核梭杆菌等的体外抑菌作用，以及对大鼠实验性牙周炎的治疗作用，从体外,动物炎症模型及牙周再生细胞方面全面探讨中药桂皮醛对牙周组织的作用第一部分桂皮醛的体外抑菌活性测定实验材料药物桂皮醛，由上海市医药公司提供，批号940915，比重1.0491.053,细菌牙龈卟啉单胞菌ATCC33277，具核梭杆菌ATCC10953，放线菌ATCC15987等标准菌株。 体外抑菌活性测定1.用BHI液体培养基按对倍稀世法将桂皮醛稀释成1024ug/ml,512ug/ml,256ug/ml,128ug/ml,64ug/ml,32ug/ml;2.将不同浓度的桂皮醛对三种细菌进行体外抑菌环实验;3.用BHI液体培养基稀释菌液使菌液浓度成3108CFU/ml;4.取菌液和不同浓度的药液各1ml于无菌试管中，然后在37度厌氧环境中培养48小时，测定MIC;5.用接种环取试管中的培养物于BHI-S血琼脂平板上，37度厌氧条件下培养48小时，测定MBC研究方法、技术路线（工艺、流程）抗真菌药物稀释液的制备:使用一次性使用的无菌96孔板进行药敏检测;对于每种受试真菌,使用不含抗真菌药物的RPMI-1640孔作为生长对照孔;首先吸取所有的稀释剂,在每一管中加入药物的储存液,顺次进行倍比稀释抗病毒:专业实验室测定第二部分实验动物模型的建立及实验性牙周炎的治疗用结扎丝在大鼠上颌左右第二磨牙颈部拴丝结扎，然后每天饲喂高糖水，每周测量牙周袋深度的变化，临床检查牙周袋达3mm左右，并且有牙槽骨的吸收，微生物检测出有牙周G-厌氧菌时，则牙周炎模型建立成功在大鼠实验性牙周炎模型(牙周袋=3mm)上采集左右两侧第二磨牙牙周袋内细菌，培养计数，并进行生化鉴定；桂皮醛用蒸馏水按测得的MIC的浓度配成药液，冲洗大鼠一侧牙周袋，另一侧用蒸馏水做对照，.在冲洗后治疗结束后，分别进行细菌培养记数（）及炎症指标检测（，）。 第三部分桂皮醛对牙周再生细胞的作用桂皮醛对人牙周膜成纤维细胞的作用，桂皮醛对小鼠成骨细胞的作用将不同浓度的桂皮醛分别与人牙周膜成纤维细胞和小鼠成骨细胞共同培养天后，检测细胞的碱性磷酸酶及细胞因子（，）其他:抗癌作用已具备的研究开发条件四川大学华西口腔医学院牙周科有较强和整齐的从事牙周病、基础理论和临床应用研究的学术梯队和技术力量，课题组成员前期曾对中药（固齿丸，桂皮醛等）在牙周病理机制中的作用的研究中担任负责和主研人2课题组已掌握了所需的，微生物学、分子生物学、免疫学、组织细胞学技术。 3四川大学华西卫生部口腔生物学工程重点实验室口腔微生物学、分子生物学、组织细胞学免疫学研究室能为本课题提供实验条件，四川大学华西实验动物中心能为本课题提供动物实验所需的条件，华西口腔医学院病理教研室可完成病理学检查。 黄萍博士，副教授，41岁，硕士导师，IADR会员，口腔种植专业委员会委员。 1987年毕业于华西医大口腔医学系，留校从事牙周病的临床、科研、教学工作。 曾先后负责5项科研课题(1:龈沟液中抗氧化酶水平与牙周炎活跃性的研究(校青年基金),2:龈沟液中抗氧化酶水平与牙周炎的治疗和预防(省科委),3:Clonal Analysisof Porphyromonasgingivalis andassociation withAP(佳洁士口腔护理研究院),4中药肉桂治疗牙周炎的实验基础和临床应用研究(省科委)5新型中药用于牙周炎的实验基础和临床应用研究(院基金)。 主研牙周炎敏感基因研制(四川省学术和技术带头人基金，排名第二)、牙周炎高危人群检测系统的研制(四川省应用基础研究，排名第二)、IL-1和TNF受体cDNA用于牙周周病基因治疗的实验研究(国家新药研究基金，“九五”攻关课题，排名第二)牙周炎自然进程的流行病学调查（华西北医宝洁公司联合科研，排名第二），牙周炎易感人群的相关基因的研究(四川省应用基础研究，排名第三)，发表论文30余篇.项目组总人数8高级3中级5初级其他主要参加人员姓名性别年龄学历职称专业工作单位周学东女48博士教授口腔内科四川大学徐屹女35博士副教授口腔内科牙周四川大学赵寰女34硕士讲师口腔内科牙周四川大学朱珠女38学士助理研究员微生物卫生部重点实验室卫生部重点实验室卫生部重点实验室付春华女37博士助理研究员助理研究员分子生物学李晓喻女47细胞学黄海云男37博士讲师口腔内科牙周四川大学主研人员在本项目中是否占有产权是否注若是，请提交相关证明。 三项目预期目标预期研究成果1通过动物实验寻找一种广谱,抵抗真菌,抗病毒的中成药,为今后的临床推广奠定实验基础2研究成果以论文形式发表，完成课题后可望在SCI和Medline收录的杂志上发表论文12篇，国内核心期刊23篇3通过本课题培养硕士研究生2名，博士研究生1-2名4:研究结果以成果方式转化,获取更大的社会效益技术指标经济指标项目执行期内预计能实现经济指标（万元）产值销售收入缴税总额净利润创汇（万美元）成果形式阶段目标xx完成中药桂皮醛的体外抑菌及抗病毒实验,确定其MIC完成相关论文1-2xx实验动物模型的建立及实验性牙周炎的治疗完成治疗后小鼠龈沟液内炎症指标的测定xx桂皮醛对牙周再生细胞的作用及抗癌作用四经费预算和用途 1、项目经费xx年xx年xx年年年合计市科技经费20.020.0省科技经费国家科技经费区（市）县科技经费其它政府部门拨款课题承担单位自筹经费银行贷款其他合计 2、项目经费支出科目xx年xx年xx年年年合计人员费1.00.81.02.8设备费能源材料费10.0试验外协费2.61.01.24.8差旅费0.80.8会议费0.40.4管理费0.20.2其他相关费合计10.0五附件目录企业法人营业执照企业财务报表（资产负债表，损益表）审计报告验资报告专利证书软件著权登记证书科学成果鉴定证书合作技术开发合同新药证书临床批文特殊产品入网许可证特殊产品生产许可证企业证书企业ISO质量体系认证