植物细胞质壁分离与复原详细实验步骤.doc

_植物细胞质壁分离与复原详细实验步骤（一）制作临时装片并观察1、制片、用拇指和食指夹住载玻片，然后取三层纱布沿一个方向擦拭载破片，直到对光看到载玻片光亮无污物为止。、在载玻片上滴一滴水。（注意胶头滴管的正确使用方法：握持方法是用中指和无名指夹住玻璃管部分以保持稳定，用拇指和食指挤压胶头以控制试剂的吸入或滴加量。不能倒置，也不能平放于桌面上。胶头滴管加液时，不能伸入容器）、A、洋葱：选用紫色特别深的洋葱外表皮，用刀片划“井”字，用镊子轻轻撕取中间的小正方形。（注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮）由于每种材料主要只在取材上有区别，其它步骤基本类似。下面老师演示一种洋葱鳞片叶外表皮装片。、将撕取的洋葱鳞片叶外表皮借助解剖针放在水滴中展平，主要是为了细胞尽量无重叠。、用镊子夹住盖玻片盖在载玻片上（同学们注意：盖盖玻片应让盖玻片的一侧以大约45先触及载玻片，然后轻轻放平，防止装片产生气泡）如果四周水过多可以用滤纸吸一下。2、观察洋葱细胞显微镜使用顺序：取镜安放对光（无载破片）打开光源低倍镜对准通光孔聚光器调到最高调节反光镜把宏光光圈打开（如果还不够亮可以稍微动一下粗准焦螺旋）放装片先用低倍镜调粗准焦螺旋至物像清晰，并调至中央，后扭转物镜转换器用高倍镜观察可以看到洋葱鳞片叶表皮细胞中紫色的中央液泡，还可以看到原生质层紧贴着细胞壁。（二）、观察质壁分离及复原1、观察质壁分离现象取下载玻片（如果不取下，在载物台上滴加蔗糖会一不小心滴漏在显微镜上，会损坏显微镜）从显微镜上取下装片，放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入0.3gmL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引，重复几次，为什么要重复呢？让盖玻片下面的洋葱鳞片叶完全侵润在蔗糖溶液中。高倍镜观察表皮细胞发生的变化。中央液泡变小，原生质层脱离细胞壁2、观察细胞质壁分离的复原现象取下载玻片（如果不取下，在载物台上滴加清水会一不小心滴漏在显微镜上，会损坏显微镜）从显微镜上取下装片，放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片另一侧用吸水纸吸引，这样重复几次。洋葱鳞片叶表皮浸润在清水中。用高倍显微镜观察，可以看到中央液泡逐渐胀大，原生质层又逐渐贴向细胞壁。实验结束后记得用纱布把显微镜擦干净放回原处，其他用具也清洗干净放回原处，下面3人一组，每组必须两种材料各做一个装片，三位老师各负责一个大组的指导工作。3、画出所观察到的图形并用表格记录现象。 观察结果记录处理方法观察到的现象液泡大小和颜色变化原生质层与细胞壁的关系实验前不做任何处理紫色的中央大液泡，原生质层紧贴着细胞壁。用蔗糖溶液处理后中央液泡变小，颜色加深原生质层脱离细胞壁用清水处理后中央液泡逐渐胀大，颜色变淡原生质层又逐渐贴向细胞壁4、用紫鸭跖草检测0.1gmL、0.3gmL、0.6gmL的蔗糖溶液。五、注意事项：1、 要节约实验材料，可以将洋葱鳞片叶切成小块分给学生。2、 在撕取洋葱鳞片表皮时，要注意不要让表皮细胞中的液泡破损，否则影响实验结果，判断液泡是否破损的依据是：完整的、液泡未破的洋葱鳞片叶表皮是紫红色的，而破损的则是无色半透明的。3、 用显微镜观察时，不能直接用高倍镜，应先在低倍镜下观察，再用高倍镜观察，若低倍镜下看得很清楚，就不必用高倍镜观察了。4、 不能直接在载物台上滴加蔗糖溶液和清水，必须在实验桌上进行，并且必须重复几次。5、 使用的外界溶液浓度要适当，浓度过大，质壁分离速度快，但会影响细胞的6、 注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮7、 整个过程中，观察细胞一定要保持活性。板书部分：四、实验步骤：（一）制作临时装片并观察1、制片擦 滴 取 浸 展 盖2、观察洋葱细胞（二）观察质壁分离及复原1、观察质壁分离现象滴蔗糖 吸引 观察2