周佩-新兽药那西肽.ppt

新兽药那西肽 复旦大学杭州汇能生物技术有限公司 饲料安全是绿色环保食品的基本点 我国是一个人口大国 随着人们生活水平的提高 人们对健康越来越重视 因此开发无残留无污染的绿色饲料用添加剂是十分必要的 2001年7月农业部颁发了 饲料药物添加剂使用规范 的通知 并列出了33种符合规范的饲料药物添加剂 那西肽是33种规定的饲料药物添加剂之一 它是一种新型的非吸收型的饲用抗生素 那西肽 又名诺西肽 英文名Nosiheptide 是生物工程的产物 由Streptomycesactuosus发酵产生 为含硫多肽类抗生素 其结构为12种氨基酸及衍生物合成的多肽 分子量为1222 那西肽结构 那西肽国外研究概况 那西肽系国外1961年发现的化合物 20世纪70年代法国朗普洛克公司进行研究 80年代末日本三菱公司开发1987年12月25日被日本政府批准为法定的饲料添加剂 列入了日本饲料安全法 其商品名为PrilnofaX Hess Clark 那西肽国内研究概况本课题1990年由复旦大学 原上海医科大学 立项1991年列入上海市科学基金发展项目 913213094 1992年7月被列入国家农业部 八 五 攻关项目 85 016 01 05 03 1994年6月通过农业部组织专家验收 专家一致认为那西肽是绿色饲料添加剂 有潜在的应用价值 1995年开始进行新药证书的申报工作1998年获国家农业部颁发的三类新兽药证书 原料和予混剂 经中国兽药监察所对那西肽样品的测试鉴定 产品质量与国外同类产品完全一致 2001年由上海市高新技术成果转化办公室主持 邀请有关专家对那西肽项目进行评审 认定那西肽项目为高新技术成果转化项目 2002年杭州汇能生物技术有限公司和复旦大学签订合作协议 由杭州汇能公司独家生产 经营销售和推广应用 复旦大学担任技术支撑 并继续进行产品的活力提高研究 那西肽目前生产状况 目前国外由日本三菱公司生产 1997年日本三菱公司拟将该产品在农业部登记注册 进入中国市场 但因检验不合格而被拒绝 目前国内只有浙江汇能生物技术公司生产 产品名称 诺农 那西肽发酵生产 菌种斜面孢子 种子罐 发酵罐 终止发酵 提取 初始阶段我们采用传统诱变技术使菌种活力提高到1200mg L 采用原生质体再生和基因组重排等手段 改变菌种代谢并采用基因工程手段 将透明颤菌血红蛋白基因VHb基因整合 转化 至那西肽产生菌染色体上 利用血红蛋白在贫氧状态下可提高氧利用率的特点 改善了那西肽产生菌能量代谢 使工业生产上那西肽产量大幅度提高 PCR BamHI EcoRI BamHI EcoRI BamHI HindIII BamHI HindIII vhb转化表达质粒构建 Nde Hind Nde Hind EcoR EcoR 含vhb整合载体的构建 采用正交设计和星点设计方法 利用完全国产的原料优化出发酵培养基的最佳配比和发酵工艺 那西肽的作用 那西肽对革兰氏阳性菌均具有较高的活性 尤其是对葡萄球菌 枯草杆菌 对某些革兰氏阴性菌如巴氏杆菌和萘瑟氏球菌也很有效 2020 3 15 21 可编辑 那西肽的作用机制 那西肽的作用机制是阻碍细菌的蛋白质合成 在低浓度时呈抑菌作用 在高浓度时呈杀菌作用 由于那西肽阻抑了肠内有害细菌的生长 使肠道管壁吸收机能正常 因而促进了动物生长 提高了饲料利用率 那西肽饲料添加剂具有以下特点 有明显的促进畜禽生长及改善饲料利用率的效果 用量低 鸡为2 5 5 0ppm 猪为2 5 20ppm就可以促进生长 水产为0 5 2 0ppm 动物专用 只有抑菌作用而无杀菌作用 对革兰氏阳性菌有效 不产生由R 质粒所引起的耐药性 不被消化道吸收 无残留问题 对动物特别对人是安全的 对环境影响小 属环保型饲料添加剂 那西肽饲料添加剂应用 目前国外那西肽在欧洲共同体和美国 日本和东南亚等被广泛使用 我国已在猪 鸡 鸭及水产方面推广应用 且在四川 广西 广东 湖南 湖北 黑龙江 辽宁等地使用 取得良好的社会效益和一定的经济效益 动物应用验证性试验 对肉仔鸡的应用效果和对猪的应用效果与日本三菱公司报道完全一致 扩大动物应用范围实验 对肉鸭 鲈鱼 罗非鱼 南美白对虾进行应用试验 那西肽对鸡的应用效果 据日本三菱公司报道 那西肽可促进肉仔鸡增重 改善饲料报酬 提高雏鸡成活率 1995年本课题组对那西肽进行了鸡的笼养饲喂试验 那西肽 mg kg 1 52 55 010增重提高 9 212 812 612 6饲料报酬提高 1 7 12 1 15 3 17 6全期成活率提高9 1 14 9 那西肽添加2 5 5 0mg kg为最佳 2002年浙江大学饲料研究所等单位对诺农 那西肽 进行肉鸡试验诺农mg kg1 252 55 0日增重提高 2 044 016 05 空白 2 084 063 06 黄霉素5mg kg 料重比降低 7 737 2210 82 空白 3 351 68 黄霉素5mg kg显示出较好的促进增重 提高饲料转化率效果 经济效益分析效美素晶绿福诺农空白饲料转化率2 082 061 992 26 F G 饲料成本1 62411 60631 62001 6000 元 kg 增重成本3 37813 30903 22383 61 元 kg 节约成本0 47580 61400 7844 元 2kg鸡 获取利润4 7586 1407 844 万元 10万鸡 诺农日增重和饲料利用率最高 经济效益最好 那西肽对猪的应用效果据日本三菱公司报道 5 20mg kg那西肽能明显促进仔猪和生长猪的增重 并能提高饲料转化率 防止腹泻 提高仔猪的存活率 Cromwell 1984 试验报道 结果 在6 8mg kg时 可使生长猪的日增重提高5 3 在5 5mg kg时料肉比提高13 1 且在冬天的环境条件下特别有效 2003年5 28 6 24在170头杜长大三元杂交猪进行实验组别空白那西肽mg kg维吉尼亚mg kg2 551020实验头数3434343434初重 kg 24 724 924 724 824 9末重 kg 41 944 044 244 943 2日增重 g 617 8680 9695 1717 5660 7料肉比2 492 272 202 122 17 对肉鸭的应用效果2002年那西肽预混剂对肉鸭的饲养试验那西肽mg kg金霉素mg kg硫酸抗敌素mg kg0 5126020增重 4 885 155 673 971 93其中那西肽组的增重显著优于金霉素组和硫酸抗敌素组 扩大规模试验 结果进一步表明 在肉鸭饲料中添加0 5mg kg和1mg kg的那西肽可显著促进肉鸭生产 提高饲料效率 那西肽在水产的应用效果2003年对宝石鲈鱼幼鱼生长性能的影响 50天 添加1 25mg kg的那西肽组 同空白对照组相比日增重提高7 14 同2 5mg kg黄霉素组相比日增重提高4 65 添加1 25mg kg那西肽试验组 鲈鱼饵料系数显著低于两对照组 肥满度同两对照组差异不明显脏体比稍低于空白对照组 试验结果表明 饲料中添加1 25mg kg那西肽可以显著促进鲈鱼的生长 那西肽对宝石鲈肠道绒毛的影响由图1 2可见 那西肽组宝石鲈鱼小肠绒毛发育完整 分布均匀 大小一致 而空白对照组绒毛相互之间有差异 且小肠绒毛表面部分绒毛脱落 从图3 4可见 那西肽组宝石鲈小肠绒毛的平均高度大于空白对照组 排列更加紧密 规则 而空白对照绒毛高低不等 相互之间间隙明显较大 且凌乱 萎缩 那西肽对南美白对虾的饲养效果2003年对南美白对虾的饲养试验饲料中添加1 25 2 5mg kg 可以较好的促进南美白对虾的生长 并且能提高南美白对虾对于饲料的利用效率 降低饵料系数 饲料中添加2 0mg kg那西肽效果显著 那西肽具有抑制有害菌群促进有益菌群生长的作用 从而能够促进肠道对营养物质的消化吸收 提高了南美白对虾对饲料的利用率 那西肽在动物体内不残留日本小林功等 1988 报道 给鸡添加那西肽0 250ppm 连续8周 给猪添加最大量的10倍以上 200ppm 连续90天 在给药中间以及停止给药后的0 7天屠宰 检测结果显示 肝 肌肉 脾 心脏等的残留量均小于0 025ppm 临界值以下 显示脏器和组织内无残留 本课题组对喂养那西肽2 5ppm 5ppm的肉鸡在停药16 48以及72小时后屠宰 对鸡的肌肉 肝 脾 肾 心等脏器进行了不同方法的检测 结果显示 那西肽的残留均低于0 01ppm 仪器和实验可检出最低剂量 对C14标记的那西肽进