参比波长和检测波长.doc

。这几天看到大家对参比波长和检测波长出现比较多的疑问，故整理下帖子，供板油们参考：是用紫外可见分光光度计进行全扫描,然后选择最大吸收的波长，如果有几个最大吸收波长的时候，选择杂质峰较少的波长做测定波长。检测波长不是参比波长，只有很少物质测定需要用到参比波长，参比波长主要起到消除噪音的影响选择参比波长的依据是被测样品在参比波长处没有吸收，参比波长应尽可能的接近检测波长。说白了，参比波长就是空白对照的作用如果把参比波长值设成检测波长，样品在紫外光下无吸收。参比波长应设在样品没有吸收的地方，且越靠近样品的检测波长越好。选择参比波长是为了更好的消除噪音的影响。一般参比波长的选择依据是样品在参比波长没有吸收，同时跟检测波长相差不是太大，应尽量靠近，以便消除干扰物质的影响。就象做紫外分光光度计的实验，选择参比溶液一样，为了消除空白溶液中物质的干扰。下面是一个关于参比波长选择的例子：例：X和Y是两种吸光物质的吸收曲线，现采用双波长吸光光度法对它们进行分别测定。如图所示如何选择参比波长及测量波长。（1） 测量X时，Y可视为干扰物质。则选择l1作为测量波长，l2作为参比波长，因为l1和l2两处Y的吸光度相等，可以用以消除Y对X的干扰。（2） 测量Y时，X可视为干扰物质。则选择l3作为测量波长，l4作为参比波长，因为l3和l4两处X的吸光度相等，可以用以消除X对Y的干扰。 如果你的检测器可以设参比波长，应该是dad或者mwd 检测器。这类检测器的。检测的不是你实际设的波长，比如你设的234，16nm .450,80.表示检测器检到的从226-242nm的紫外吸收图，再平均得到一个数据，参比设置也类似，然后2个相减，就是工作站上显示得到峰高和峰面积。（2） 如果你的样品刚好在234nm,吸收最强，你可以设到234，2nm.（资料上一般写频宽宽度设置是最大吸收峰的半峰宽的宽度） 如果你的样品在410-530nm有紫外吸收，你可以把参比设的更高，或者干脆不设参比。岛津紫外检测器波长不准故障的检修 1 波长不准故障的检修 在正常使用下，如果显示波长不准，根据波长自检和自校原理，故障是由光电管没有检测到亮线引起的。当显示波长不准时，应首先检查出流动相使用得是否合适，波长设定是否超出仪器的使用范围。当排除了这些人为因素后，利用仪器的自校功能进行一次波长校正（校正方法见使用说明书）。校正后如仍显示波长不准，则按面板上的Func键，把波长设定为254nm，并且使检测池充满甲醇或乙晴，查看SMPL EN（流通池）和REF EN（参比池）的吸光度值。如果流通池和参比池的值相差很大，则故障是由光栅部分污染或氘灯能量降低引起的，按面板上的VP和Func键，查看氘灯的使用时间是否超过2000小时。如果氘灯使用时间过长，即使氘灯能够正常启动，有时也发不出0nm,486nm和656nm亮线，从而引起波长不准。这时，需要更换新的氘灯。如果氘灯使用时间不长，则故障是由光栅部分引起的。 2 光栅部分的检修与调试 光栅部分主要是由M1、M2、M3、石英窗口和光栅组成的，是整个光路的核心。反射镜镜面的光洁度越高，光电池接受到的光就越强，仪器的灵敏度就越高。如果紫外光长时间故地功能照射镜面的一个地方，会在镜面上产生光斑。如果使用环境不干燥，会在镜面上生成霉斑。如果使用环境不洁净，灰尘也会对镜面造成污染。这些都将使镜面的光洁度