柑桔黄龙病.doc

1、 应用Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的柑桔黄龙病带菌率应用PCR 及Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的结果表明:PCR 只可检测最低2头带菌木虱,Nested PCR可检测到单个带菌木虱.100头带菌木虱中,单虫检出率为96%.检测田间重、中等、轻病的柑桔园内的木虱,其带菌率依次为87%、53% 和21%.在病芦柑上饲菌不同天数的木虱均能检测出带菌,其饲菌时间最短为1d.城市九里香叶片及在其叶上取食的木虱单虫,均能用Nested PCR检测出病原.饲菌木虱接种九里香及芦柑健苗,在植株尚未表现症状时,常规PCR难检测出病原,但用Nested PCR则能检测到病原,说明九里香不仅是木虱的寄主,而且是黄龙病病原的隐症寄主.2、 应用多聚酶链式反应(PCR) 技术检测和定量分析柑桔黄龙病病原3、柑桔黄龙病病原DNA 片段的克隆及序列分析4、柑桔木虱(Diaphorina citri Kuwayama)与柑桔黄龙病流行关系的初步研究赵学源 蒋元晖 李世菱 邱柱石 苏维芳 【摘要】：1973-1978年用从田间病树上采集的柑桔木虱成虫放饲在398株健康柑桔苗上,有32株发病。用病树上采集的柑桔木虱高龄若虫置健苗上所羽化的成虫放饲的56株,有5株发病。未接虫的110株没有发病。初步说明柑桔木虱成虫可以传病。1973-1977年在广西境内的合浦、三江等27个县(市)调查柑桔木虱分布和柑桔黄龙病流行的关系。从总的趋势看,在北部未见木虱的地区,黄龙病不发生或不流行;在南部有木虱的大多数地区,黄龙病就会流行。北部未见木虱的桔林,从柳州重病苗圃引入的苗木,或用其接穗繁殖的苗木或高接的植株,均有发病,但未见蔓延。在南部有木虱分布的地区,有的果园多次喷洒杀虫剂,较好地防除了木虱,黄龙病很少发生。南部的梧州市红旗公社1965年从病区引进苗木,一部分种在地处缓坡丘陵柑桔木虱发生多的果园,1977年调查时大部植株已挖除,余下少数均为重病株。另一部分种在山冲,1977年调查时未见木虱,园中基本无缺株,查80株仅3株发病。上述情况说明黄龙病的流行与柑桔木虱的分布密切相关。因此严格防除柑桔木虱应列为预防黄龙病的一项重要措施。【作者单位】： 中国农业科学院柑桔研究所中国农业科学院柑桔研究所中国农业科学院柑桔研究所广西壮族自治区农业科学院柑桔研究所广西柳州地区农科所【关键词】： 柑桔木虱 柑桔黄龙病 缓坡丘陵 密切相关 杀虫剂 尤力克柠檬 苗木 植株 果园 实生苗【正文快照】：柑桔黄龙病是我国南方柑桔产区的严重病害,在田间有明显的自然蔓延迹象。六十年代,在进行蚜虫传病试验的同时,有关单位开展了柑桔木虱传病试验。广东省农业科学院原园艺系做过试验,接木虱的植株半数发病而未接虫的对照株有三分之一发病,当时没有作出明确的结论。广西柑5、快速检测单头柑橘木虱体内黄龙病病原A simple and effective method for quick detection of Huanglongbing agent from Asiatic psyllid(Diaphorina citri)摘要： 本研究通过采用简易的柑橘木虱制样方法,利用PCR检测技术在单头柑橘木虱体内检测到黄龙病病原,并利用Xba 限制性内切酶将从柑橘木虱体内扩增的黄龙病病原16SrDNA酶切成520bp和640bp两个片段,证实了木虱体内黄龙病病原为亚洲种.本研究成功地建立了一套快速检测柑橘木虱体内黄龙病病原的方法,可为检疫工作者和相关研究人员提供重要参考.6、 柑橘黄龙病入侵与疫情扩散模型研究为了提示柑橘黄龙病入侵发病扩散规律,评估防控成效,有效控制疫情,2002-2007年在柑橘黄龙病初发生区采用设立自然条件、治虫防病和综合防控三处理类型,监测柑橘黄龙病发生扩散动态,结合面上疫情普查资料,创建柑橘黄龙病自然条件下、治虫防病条件下以及综合防控条件下的疫情扩散模型,分别为:P1=12.9690N1-18.10(n=6,r=0.9945*)或P1=0.2293N12+11.135N1-14.89(n=6,r=0.9948*),P2=7.8857N2-10.2667(n=6,r=0.9675*)或P2=1.4107N22-1.9893N2+2.90(n=7,r=0.9996*)和P3=-0.1398xN32+1.1248N3-1.141(n=6,r=0.8396*),结果表明柑橘黄龙病在自然条件下从发病到毁园需要9a时间,单一治虫防病措施难以达到持续控制效果,只有采取综合防控措施,才能达到可持续控制,保障柑橘优势产业持续健康发展.7、柑桔黄龙病病原物提纯方法和血清学的初步研究从感染柑桔黄龙病的长春花中,用0.1mol/L MgCl_20.5mol/L甘露醇-0.6mol/L甘氨酸的混合溶液作黄龙病病原物(YSO yellow sbootO rgancism)分离溶液(pH7.4),然后用纤维素酶酶解法和差速离心相结合的提纯程序,反复试验结果表明该提纯方法重复性稳定,黄龙病病原物(YSO)的提纯产量较高,完整性较好,内外结构清晰。用提纯液备制小鼠腹水抗体,得到微量沉淀反应效价为1:640,环状界凝集反应效性为1:8,免疫电镜效价1:320,琼脂双扩散反应阴性,对照为阴性反应,从而认为YSO具有特异抗原性。我国的柑桔黄龙病和亚洲,非洲的柑桔青果病(病原oreening organism简称00)巳被认为属于同一种病害,其病原为类细菌,或称为类立克次氏体,.。最近,联合国粮农组织亚太区域防治柑桔黄龙病项目协调员B.Aubert博士认为:黄龙病的传染性最早于1956年由华南农学院林孔湘教授鉴定,而8、 柑桔黄龙病病原和检测方法研究进展介绍了柑桔黄龙病病原认识过程、病害田间诊断、指示植物鉴定、病原显微镜观察、血清学、DNA-DNA杂交和PCR检测等方法.9、以控制木虱为重点的柑橘黄龙病综合防治技术研究柑橘黄龙病是全株系统性发生的毁灭性病害,目前尚无有效的治疗药剂和有效的给药方法,感病后只有挖掉,以免传染,所以俗称柑橘上的癌症.根据桂林市2004年底的调查,全市危害最轻的县病株率达5%,危害最重的县病株率已达到40%50%1.目前该病和其传媒昆虫-柑橘木虱在全广西都有分布,已成为广西的优势产业-柑橘业发展的最大障碍.10、柑桔黄龙病对青霉素和四环素的反应赵学源 邱柱石 苏维芳 蒋元晖 【摘要】：正 近年,植物类菌原体病害的病原大体上被归于三个类群:螺原体,类菌原体和类立克次氏体或类立克次氏体细菌、亦有人称为类细菌。前两者缺乏细胞壁,对四环素敏感,对青霉素无反应,而类立克次氏体或类立克次氏体细菌则有细胞壁,对四环素和青霉素都敏感。目前,细胞壁的有无和对四环素青霉素的反应是区分有关病原物类群的重要依据。 在柑桔黄龙病研究中,广西柑桔黄龙病研究【作者单位】： 中国农业科学院柑桔研究所广西柑桔研究所柳州地区农业科学研究所中国农业科学院柑桔研究所【关键词】： 柑桔黄龙病 类立克次氏体 青霉素 四环素 细胞壁 植物类菌原体 螺原体 病原物 类细菌 黄龙病病原【正文快照】：近年,植物类菌原体病害的病原大体上被归于 三个类群:螺原体,类菌原体和类立克次氏体或类 立克次氏体细菌、亦有人称为类细菌。前两者缺乏 细胞壁,对四环素敏感,对青霉素无反应,而类立克次民律或类立克次氏体细菌则有细胞壁,对四环素和青碑素都敏感。目前,细胞璧的有无和对四11、 柑桔黄龙病和柑桔衰退病在赣南脐橙上的典型症状及防治要点（2012） 赣南是我国最大的脐橙主产区，为国家重点建设的“赣南一湘南一桂北优质脐橙带”的核心区与优势区。据统计，截至2011年，脐橙种植面积116万hm2，总产量133万t。柑桔黄龙病和柑桔衰退病对柑桔生产为害严重，在赣南脐橙产区均有发生，易龙等调查表明，赣南脐橙衰退病发生率达449。近年来，由于受气候、栽培、流通等因素影响，柑桔黄龙病和衰退病在赣南脐橙产区病情有扩大的趋势，须引起高度重视。现将这两种病害在赣南脐橙上田间发病较严重时的典型症状和防治方法作简要介绍。12、 金柑黄龙病表现“红鼻果”症状柑桔黄龙病（huanglongbing,HLB）是柑橘类果树的检疫性病害，田间柑桔黄龙病诊断主要是通过叶片不规则斑驳黄化与果实“红鼻果”症状来识别。叶片斑驳黄化因易与缺素症混淆，不易掌握，而用“红鼻果”诊断黄龙病，兼具有可靠性与高效性。柑橘属（Citrus）感染黄龙病表现“红鼻果”症状，在田间多见于狂批柑桔（C.reticulata）上，甜橙类（C.sinensis）品种则不易表现典型症状，柚类（C.grandis）虽不表现红鼻果，单冰果果型变小与比重显著减轻，还买内层异常增厚。金柑属（Fortunenellla）感染黄龙病后的症状描述尚未见报道。在田间多见于款皮柑桔12、 柑橘黄龙病检测方法研究进展黄龙病是柑橘生产上的一种毁灭性病害,该病在北美、南美、西亚、东亚和南亚的一些国家和地区时有发生、造成巨大的经济损失,严重威胁着世界柑橘产业.柑橘黄龙病的传统检测方法有病害田间诊断、指示作物鉴定、病原显微镜观察、血清学、DNA-DNA杂交和P