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槐米中芦丁的提取与分离（欢迎转载）一、题目：槐米中芦丁的提取与分离二、作者：三、摘要：从槐米中提取芦丁的实验研究。芦丁亦称芸香甙,是由槲皮素C3位上的羟基和芸香糖结合而形成的双糖甙，产品为黄绿色或淡黄色针状晶。芦丁在沸水中溶解度相当大（1:200），所以本实验采用水提法提取。芦丁与其他水溶性化合物可借助聚酰胺柱色谱予以分离，用乙醇作洗脱剂回流。关键词：槐米；芦丁;水提法；色谱；乙醇四、引言：随着人们生活水平及质量的不断提高，心脑血管疾病的发病率也呈上升趋势，而且死亡率居各种疾病之首。因此对治疗和预防心脑血管疾病的药品与保健品的开发研究就显得尤为重要。黄酮类化合在心脑血管疾病的治疗上起到了举足轻重的作用。芦丁存在于槐花米和荞麦叶中,槐花米中芦丁含量高达12 %16 %。,芦丁有维生素P类药物的作用,能调节毛细血管的渗透性,保持和恢复血管的正常弹性,临床上主要用于治疗高血压及毛细血管出血。此外，对放射性伤害所以起的出血也有一定的治疗作用。芦丁分子式: C27H30 O16;相对分子质量: 610. 52，为淡黄色粉末或极细的淡黄色针状结晶,无臭无味;可溶于乙醇、吡啶、甲酰胺、甘油、丙酮、冰乙酸、乙酸乙酯中,而不溶于苯、乙醚、石油醚中;易溶于甲醇,微溶于水。芦丁的溶解度在冷水中为1 g /1 000mL;沸水中达1 g/200 mL;沸乙醇中为1 g/60 mL;沸甲醇中1 g /7mL。熔点: 176 178。五、实验部分 1、仪器与试剂紫外灯，蒸馏装置一套，500mL烧瓶（2只），100mL三角瓶（6只）色谱柱：（1.5*30cm）玻璃板（2.5*7.5cm 6片）硅胶G；层析用聚酰胺（60100目）；甲醇；70%工业乙醇；槐米；芦丁标准样 2、实验步骤1）芦丁的提取：将粉碎好的槐米14g倒入500ml烧杯中，加沸水150ml，煮沸1（在煮的过程中，可补加水），趁热用纱布过滤（2层），残渣中加入100ml水，再煮沸30min，共进行两次，将两次滤液合并，放置冷却，既有大量黄色沉淀生成，抽滤。2）芦丁的提纯：将以上得到的粗芦丁产品约1.5g，加甲醇34ml，使之溶解，在加柱层析用硅胶（60100目）1g，用刮刀轻轻搅拌，在水浴上赶去甲醇（通风橱内进行），待用。 将色谱柱垂直夹在铁架台上。关闭柱塞，加蒸馏水约至色谱柱一半高。将4.5g（60100目）倒在烧杯中，加蒸馏水50g，轻轻摇动烧杯使之均匀，再打开柱塞使柱内水不断流出的同时，把烧杯内聚酰胺缓缓加入，使填料装填均匀，无气泡。当色谱柱顶部下降到距聚酰胺层高约1.5cm时，关闭柱塞。将上述拌好硅胶的粗芦丁样品倒入柱内，用刮刀轻轻铺平，勿有气泡，再盖上剪好的圆形滤纸。用70%工业乙醇洗脱，当有淡黄色的液体从柱下流出时开始收集洗脱液，每次约25ml，共6瓶，依次编好接收瓶号。 取2.5*7.5cm的硅胶G板，每板上点芦丁标准样与接收瓶中的溶液，放入层析缸中，加盖，进行展开（展开剂为：乙酸乙酯：丁酮：甲酸：水=5:3:1:1，当展开剂前沿距板端约1cm时，取出，晾干。在紫外灯下观察斑点，将只含芦丁的接受瓶溶液合并入一圆底烧瓶中，蒸馏，蒸去大部分溶剂后（约留25ml溶液），趁热倾入一只100ml的三角瓶内，冷却摩擦即有芦丁析出，抽滤，晾干，计算收率。六、结果与讨论M=槐米m=14g收率=M/m*100%七、问题与讨论1、为什么从槐米中提取芦丁时开始不能加冷水慢慢煮沸，而要直接加沸水提取？答：避免在提取过程中黄酮苷类化合物发生分解，故用沸水事先破坏其酶的活性2、芦丁和其甙元槲皮素在聚酰胺柱色谱上用70%工业乙醇洗脱时，哪个先被洗脱下来？答：聚酰胺是一种常用的吸附剂，其分子中存在许多酰胺键，可与酚类酸类醌类硝基类化合物形成氢键缔合而产生吸附作用；又由于不同结构的化合物与聚酰胺形成氢键的能力不同因而产生的吸附力大小也不相同，所以聚酰胺特别适合用来分离上述化合物。芦丁和槲皮素均属于黄酮类化合物，前者为黄酮苷，后者是其苷元，芦丁分子中有4个酚羟基能与聚酰