小胶质细胞在青光眼视神经病变中的作用机制研究进展-评价证书.doc

科 学 技 术 成 果 评 价 证 书证书编号： 成 果 名 称：小胶质细胞在青光眼视神经病变中的作用机制研究进展完 成 单 位： 泰山医学院（公章）评 价 形 式： 会议评价评价批准日期：2016年11月19日评 价 日 期： 2016年11月19日泰安市科学技术局简 要 技 术 说 明 及 主 要 技 术 性 能 指 标本研究发现小胶质细胞具有激活青光眼模型RGCs的作用其原理有待进一步研究。我们推测抑制小胶质细胞的增生和活化可能是其重要的机制之一。主要技术说明： 本研究首次选用了房水抽吸联合激光房角光凝法用于建立青光眼大鼠模型，这在之前的国内外研究中从未运用，而该模型更能模拟闭角型青光眼，本研究大鼠慢性青光眼模型制作方法操作简单、价格低廉, 实验动物容易饲养和控制、激光光凝法产生的眼压变化和 RGCs损伤与临床患者相似, 产生的特征性病理改变与人青光眼损伤所致的病理改变拟合性较好, 是较为理想的慢性青光眼模型。 主要技术性能指标： 本课题为国内外较为系统的小胶质细胞在青光眼发病机制中作用的研究，采用免疫组化、HE染色、尼氏染色等技术方法，在整体、组织、细胞、分子水平等不同层面上揭示了小胶质细胞在青光眼发病中的作用机制，并首次揭示了雷公藤甲素能够不影响眼压的状态下保护视神经。推 广 应 用 前 景 与 措 施青光眼是一种以眼压升高引起的视乳头凹陷性萎缩和视野缺损的神经退变性疾病，以视网膜神经节细胞（RGCs）及其轴突的进行性死亡为特征，最终导致视力不可逆性丧失。世界卫生组织（WHO）的调查显示在全球范围内青光眼是继白内障后第二大致盲疾病。大部分临床和实验研究均能证明青光眼患者存在明显的免疫反应异常。免疫反应在青光眼中如何发挥神经保护抑或神经破坏作用，仍是极具探讨性课题。青光眼中视网膜RGCs 的存活完全取决于免疫微环境的稳定和免疫系统作用途径的平衡与否。小胶质细胞因其作为中枢神经系统中最有代表性的免疫细胞而成为青光眼免疫学发病机制的研究热点。其神经保护与神经毒性的双重作用归因于它对一系列病变做出反应后所能合成和分泌的物质不同。由于小胶质细胞在中枢神经元的变性中扮演双重的角色,前期是保护视神经节细胞，后期是通过释放炎性介质和毒性因子直接作用于视神经节细胞的凋亡视网膜和视神经是中枢神经系统（CNS）重要组成部分，也是CNS在眼部的延续，在青光眼中也是主要免疫调节部位。而视网膜其他细胞的作用机制也尚未确定, 作为中枢神经组织的纽带,对于视网膜小胶质细胞是否具有明显激活作用, 其作用机制和信号转导途径尚需进一步验证。为我们以小胶质细胞为靶向保护视神经治疗青光眼提供了新的思路。因此寻找能够抑制小胶质细胞激活的药物以调节炎症反应介导的神经元损伤就成为一个具有创意的研究方向。雷公藤甲素及决明子,是目前我国中药现代化研究的热点,鉴于它们的两面性(生物活性及毒性),利用现代高科技手段,开发高效低毒的新剂型是一项非常有意义的工作。本课题对雷公藤甲素抑制小胶质细胞活性的相关研究以及决明子的降眼压机理和视神经保护作用，对于科学系统地评价雷公藤甲素，推动中药防治相关疾病的研究，以及中药的深度开发利用都具有重要意义。随着雷公藤和决明子茶逐步被中国消费者接受，本课题的研究成果也开始受到关注，这对于公众科学认识此类中药的进一步开发利用都有良好的推动作用，产生了较好的社会效益。（1）前期研究发现，除雷公藤甲素以外，决明子茶具有良好的降眼压作用和视神经保护作用，但其作用机制并未完全阐明，估计与抑制小胶质细胞活性有关，可在前期研究的基础上，进一步研究决明子的物质基础及作用机制。（2）在阐明药效学物质基础及药物作用机制基础上，可考虑提取有效单体，促进新药的研发。（3）未来旨在应用功能性核磁共振定位不同类型青光眼患者脑中枢改变的基础上，证实存在眼压调节中枢，并利用前房穿刺联合激光房角光凝法建立青光眼大鼠模型，给予周期性压力和电击脑中枢，利用 fMRI 技术，定位存在于脑中枢的眼压调节中枢位点；通过提取脑组织，借助将所培养原代细胞进行免疫组化染色，应用实时定量 PCR 检测 Cry 基因， 使用 Western blot 法检测 Cry 蛋白。以期获得生物钟 Cry 蛋白与眼压调节中枢直接相互作用的可靠证据，探讨眼压正负反馈调节机制。主 要 技 术 文 件 目 录 及 来 源 1.研究工作报告2.研究技术报告 3.查新检索报告 4.已发表的相关论文 5.已授权专利评 价 委 员 会 专 家 测 试 意 见测试组长： 副组长： 、 年 月 日评 价 意 见2016年11月19日，泰安市科技局组织专家对泰山医学院完成的小胶质细胞在青光眼视神经病变中的作用项目进行了成果评价。评价委员会听取了课题组汇报，审阅了资料，经过质询、讨论，形成评价意见如下：1. 评价材料完整齐全，研究资料真实可靠，符合科技成果评价要求。 2. 本课题为国内外较为系统的小胶质细胞在青光眼发病机制中作用的研究，采用免疫组化、HE染色、尼氏染色等技术方法，在整体、组织、细胞、分子水平等不同层面上揭示了小胶质细胞在青光眼发病中的作用机制，并首次揭示了雷公藤甲素能够不影响眼压的状态下保护视神经。该研究设计合理，手段先进，技术路线清晰，数据可靠，结论可信，研究具有一定的创新性，为青光眼视神经保护提供理论依据。经评价委员会专家讨论，一致认为该研究水平达到 水平。 建议： 评价委员会主任： 副主任： 、 年 月 日泰 安 市 科 技 局 意 见 （盖章） 年 月 日11科 技 成 果 完 成 单 位 情 况序号完成单位名称邮政编码所在省市详细地址隶属省部单位属性1.泰山医学院271016山东省泰安市长城路619号山东省大专院校2.3.4.5.6.7.8.主 要 研 制 人 员 名 单（第一完成单位盖章）序号姓 名性别出生年月技术职称文化程度工 作 单 位对成果创造性贡献1王艺男1984.5讲师博士泰山医学院附属医院课题主持人2袁久民男1960.2主任医师专科泰山医学院附属医院模型构建与药物干预3刘广玲女1956.8副教授学士泰山医学院附属医院实验动物取材4陈迪男1978.1讲师本科泰山医学院附属医院电生理实验技术实施5李文男1990.10住院医师硕士泰山医学院附属医院病理学与免疫组化检测6李晓梅女1977.7副教授硕士泰山医学院实验数据分析7孔伟男1981.1主治医师硕士泰山医学院附属医院细胞培养8910111213评 价 委 员 会 名 单序号评价会职务姓 名工 作 单 位所 学 专 业现从事专业职 称 职 务签 名1主任委员王智崇中山大学中山眼科中心临床医学眼科主任医师2副主任委员王建荣济