输血科常见问题PPT课件.ppt

输血科 血库 实验室及输血中常见问题 孙利 1 基础概念 抗原 是能与特异性抗体或免疫细胞在体内 外发生反应的物质 并常常可引起特异性免疫应答 抗体 是指体内免疫系统所产生的蛋白质 为对某种抗原引起反应所形成 且能与该抗原或相近的抗原发生特异性反应 不完全抗体 在生理盐水中与相应的红细胞不产生可见反应 不凝集 需通过其它介质 胶体 酶 抗人球蛋白血清等 才能出现可见的抗体 不规则抗体是指抗A和抗B以外的血型抗体 2 基础概念 血型 早期仅指存在于红细胞上表面抗原的差异 现在包刮白细胞 血小板表面抗原的差异 血型 可分ABO RH MNSs等血型系统 共有29系统 共有400多种抗原 亚型 指虽然属同一血型抗原 但结构和性能上有一定差异 血型抗体 IgGIgMIgAIgDIgE天然IgM免疫IgG前两者最多见 3 基础概念 ABO血型系统 1900年卡尔兰德斯坦那发现根据红细胞上是否有A和B抗原将人类分四种血型 A型 红细胞含有A抗原 血清 浆 中有B抗体 B型 红细胞含有B抗原 血清 浆 中有A抗体 AB型 红细胞含有A B抗原 血清 浆 中无AB抗体 O型 红细胞上无A B抗原 血清 浆 中有A B抗体 4 基础概念 血型物质 每个人专有的血型抗原物质 主要存在于红细胞 广泛存在于其他组织和体液中 两种形式醇溶性水溶性意义鉴定血型鉴定抗体性质可测脏器和组织血型 5 血型鉴定 卡式微量凝胶法 具体操作见操作规程 操作要点 被检者1 红细胞悬液 前四孔加50微升 后两孔加血浆50微升 前2孔是正定型 第3孔是D 第4孔是对照 第5 6是反定型 放专用的离心机离心5分钟 沉底部的是阴性 在上层或中层算阳性 注意观察 1 正反结果是否一致 2 D孔红细胞是否沉降 在上层或中层结果是阳性 红细胞沉底部阴性者 需进一步用手工法 单克隆抗D试剂确定 操作方法 2 3 红细胞悬液 2滴单克隆抗D试剂 放置37 水域15分钟 用1500转 分 离心3分钟 在显微镜下看结果 凝集为阳性 无凝集为阴性 6 血型鉴定及影响因素 凝胶微柱法专用仪器试剂标准化微机化质量控制正反定型结果不一致技术失误假阴性假阳性血清问题被检者红细胞问题免球致敏遗传或获得性表面异常多凝集 7 血型鉴定影响因素 异常基因亚型中弱抗原近期输血呈混合外观凝集嵌和体血型疾病因素导致抗原减弱白血病MDS血型特异物质过高卵巢囊肿血型物质高获得性B由革兰阴性杆菌的作用红C有类B多凝集 全凝集细菌感染 8 血型鉴定影响因素 血浆置换异常血浆蛋白不规则抗体存在低丙种球蛋白血症不凝集弱凝集药物等因素右旋糖酐激素青霉素年龄因素 9 血型鉴定 正反定性不一致的解决办法 重复试验洗涤被测红细胞换试剂或方法测用相关亚型试剂相关试验加以鉴别吸收试验放散试验 10 h血型鉴定 卫生部要求 鉴定 h 阴阳性试管法抗 血清 滴 被检2 3 红细胞悬液 滴混匀1500转 分离心2分钟凝集为阳性 阴性 要求37 水浴15分钟 离心检测 卡式凝胶微柱弱D者 受血者划定 h阴性 供血者划定 h阳性 11 12 注意 在交叉配血中 如发现某孔弱凝集 凝胶层中有拖带 必需复检 包刮 供 受两者血型鉴定 原方法 凝聚胺交叉配血法 确认安全 才可发出 如 在卡式交叉配血中出现 次侧不合 首先复检受 供血者的血型 ABO和RHD血型相同 应加做抗人球蛋白试验 如患者阳性 与临床联系 说明 患者血球上有不完全抗体 建议临床改输洗涤红细胞 并马上向市血站约出洗涤红细胞 如出现正反鉴定不一致 必须重新鉴定 并用手工试管法进行正反血型鉴定 以试管法为准 如仍然不一致 马上反馈给主任处理 13 凝聚胺原理 红细胞表面带有大量的负电荷 以避免其产生自发性聚集 当红细胞悬浮在电解质时 阳离子会被红细胞的负电荷所吸引 此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕 而形成Zeta电位 Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用 凝聚胺技术首先利用底离子溶液 LIM 降低介质的离子强度 减少红细胞周围的阳离子云 以促进红细胞和血清 血浆 中的抗体结合 其后 加入凝聚胺 Polybrene 溶液 它是一种高价阳离子多聚物 肝素中和剂 溶解后能产生很多正电荷 可以中和红细胞表面带有的负电荷 使红细胞Zeta电位降低 缩短红细胞之间的距离 使红细胞产生非特异性的凝聚 最后 加入悬浮液 Resuspending Resuspending具有中和凝聚胺 Polybrene 阳离子的作用 使正常的红细胞非特异性凝聚散开 试验结果为阴性 但如果红细胞被应的抗体致敏 则会被凝聚胺凝结 凝集就不会散开 试验结果为阳性 14 凝聚胺法 1 取3支试管分别标记 主 次 混 2 5 红细胞制备 取25ul样本压积红细胞悬浮于500ul生理盐水中 3 主侧 受血者血浆2滴 5 供血者红细胞1滴 4 次侧 供血者血浆2滴 5 受血者红细胞1滴 5 将主侧管和次侧管所加的所有成分都加入混合管中 6 主侧管 次侧管 混合管中各加入低离子介质溶液600ul 混合均匀 室温放置1分钟 7 再分别向3管中加入凝聚胺溶液2滴混合均匀 室温放置15秒钟 8 置离心机内3400rpm 15秒 倒去上清液 使管底保留约0 1ml的液体 9 目测管内有无红细胞凝集块 若没有凝块 则必须重做 10 向红细胞已发生凝集的试管内加入2滴复悬液 轻轻混匀 显微镜下观察结果 红细胞凝块散开为阴性反应 示血交叉配型相合 若红细胞仍凝集成块为阳性反应 示血交叉配型不合 15 交叉配血注意点 标本是关键核对采集操作规范决不放过疑点弱凝集溶血现象输血基本原则 ABO Rh 血型相同 配血相合可输标本保存7天以上 16 主要起血清学问题的一些临床疾病 多发性骨髓瘤ABO同种抗体缺乏或减弱低 无 丙种球蛋白血症免疫性ABO抗体减低新生儿 妊辰自身 同种 抗N血液透析病人HLA抗体经产妇 移植病人 多次输血者ABO同种抗体的缺乏或减弱 3岁新生儿 70岁老年人 17 抗人球蛋白试验 测定 不完全抗体卡式凝胶微柱法又分为间接法测患者血清中不完全抗体直接法测患者红细胞上有无不完全抗体配受检者1 红细胞悬液 取50微升 加入到抗人球打蛋白卡中 放专用离心5分钟 红细胞在上层或中层是阳性 18 不规则抗体筛查试验和性质鉴定 200年 卫生部 临床输血技术规范 第十七条规定 交叉配血不合时 对有输血史 妊娠史或短期内需要接受多次输血者 不规则抗体筛查试验123标准抗原血型抗体性质鉴定标准红细胞谱1 10测定 是指抗A和抗B以外的血型抗体 完全抗体与不完全抗体 19 血型不规则抗体的检测 卡式微量凝胶法 具体操作规程见操作卡 操作要点 取被检者血清 血浆 每孔加50微升 共三孔 标准不规则抗体筛查约1 红细胞悬液50微升 放置专用37 箱15分钟 取出放专用离心机 离心5分钟 红细胞沉底部为阴性 在上层或中层是阳性 20 血型抗体筛查表 21 22 23 24 25 26 临床输血的基本程序 输血前 符合临床输血标准的患者或可能需要输血的患者 医师必须与患者或家属谈话 征得同意 并签订 输血治疗同意书 填写 临床输血申请单 检测输血前规定的检测项目 采血 受血者血标本和申请单 于预定日期前送交输血科备血 双方逐项核对 输血科 核对受血者标本与申请单信息 鉴定ABO血型 正 反 并常规检查患者RH D 血型 急诊抢救患者紧急输血时RH D 检查可除外 交叉配血及血样保存 发血 取血 医护人员 或经过培训的专业人员取血 与输血科发血双方核对并签字 输血 护士输血前核对 输血时床边核对 输血 先慢后快 速度调整 记录 开始时间 15分钟情况 结束时间 输血后 将交叉配血报告 同意书 记录单贴在病历中 填写输血反应反馈卡 血袋送回输血科保存 至少保存1天 27 输血知识 输血前 必须对患者进行乙肝表面抗原 HbsAg 丙型肝炎抗体 HCV 梅毒抗体 RPR 艾滋病抗体 HIV 和谷丙转氨酶 ALT 检测 阳性结果必须记录并告知患者 家属 输血指针 Hb 100g L HCT 30 PT或APTT检测结果各专科有各自的输血指南 如血液病 白血病老人等 28 输血知识 输血基本原则患者缺什么输什么提倡成份输血全血不全充分认清输血风险 输血可能会出现输血相关病毒感染风险检测病毒种类的局限性新病毒不断被发现检测技术的局限性输血相关肺损伤输血相关性移植物抗宿主病TA GVHD 29 新生儿溶血病输血选择 新生儿溶血病 一般指母婴血型不合而引起胎儿或新生儿的免疫性溶血病 简称HDN 原称胎儿有核红细胞增多症 ABO新生儿溶血病换血 选择 O 型红细胞 AB型血浆混合血输注 RhD新生儿溶血病换血 选择ABO与婴儿同型的Rh阴性血输注RhD伴有ABO新生儿溶血病换血 选择 O 型Rh阴性红细胞加AB型血浆混合血输注 ABO和RhD以外的其它抗体原因的换血 必须选择不含有特异性抗体的相应抗原ABO同型的血输注 其它任何新生儿黄疸病患儿换血 不选择ABO Rh与婴儿同型输注 30 嘉兴市第一医院 嘉兴医学院附属第一医院 临床输血申请单No 000000预定输血日期 年月日时 肯定输血 手术备用 酌情备用受血者姓名 性别 男 女 年龄 病案号 科别 病区 床号 临床诊断 输血目的 继往输血史 有 无 孕产受血者属地 本市 外埠 预定输血成分 类型 预定输血量 受血者 ABO血型 Rh D 血型 血红蛋白 HCT 血小板 ALT U L HBsAg Anti HCV Anti HIV1 2 梅毒 申请医师签名 主治医师审核签名 申请日期 上 下午时采血者签名 收样本者 血库 签名 注 请医师逐项认真准确填写 请于输血日前送输血科 血库 受血者姓名 受血者姓名 No 000000病案号 病区 床号病案号 病区 床号 血型 No 000000血液类型 申请量 31 用血及互助金审核单姓名性别年龄血型 ABO Rh 科别床号住院号诊断申请用血种类用血量医师签名 此栏由医师填写 何地病人市区外省市病人身份证 无偿献血证号码 献血日期 年月日 献血地点 献血量 ml应交血费元 大写 预交用血互助金元 大写 此栏由医院输血科填写 已交用血费元 大写 收据号码已预交用血互助金元 大写 收据号码 医院财务科收费处盖章 收费员 年月日 此栏由收费处填写 经审核按嘉政发 1999 82号办法第十五条第十六条免交互助金 免交用血费经审核按嘉政发 1999 82号办法第十七条第二十条应交互助金 应交用血费同意用血 种类 少浆血 血浆 血小板 全血或数量 医院输血科 盖章 审核人签名 年月日 此栏由医院输血科填写 注 凡18 55周岁本人及直系亲属未参加献血 需交纳互助金 32 输血知识 1全血一般200 400毫升2红细胞悬液 少浆血 1 2单位3照射红细胞 少浆血 1 2单位如 伽玛线照射4洗涤红细胞洗涤后 只有24小时有效期 5冰冻保存红细胞 溶解洗涤后只有24小时有效期 6除白细胞红细胞1 2单位 33 血库人员接到输血标本和输血单注意 核对输血单子与患者标本姓名病区床号要一致有输血标本 要有护士签名注意要血时间种类时间无血型的正反鉴定血型RH D 不规则抗体检测交叉配血同型相合 发血 手术备用 酌情备用输血单子 血型必须及时鉴定 34 血浆 发血浆注意1 无血型的 必须进行正反血型鉴定并且需复检血型确认 同型发血浆 2 患者红细胞上有不完全抗体存在 一般情况下 不发血浆 如患者确实需要血浆 需用凝聚胺交叉配血后 相合 相容可发 3 因市血站给我院是少浆血和血浆是1 1供给 故血浆紧缺 一般情况下 单要血浆 我们只能供给1 2包 除临床说明患者病情危急 我们尽量满足临床 35 血小板 马上向是血站要或预约好 并且在单子上注明 已约 几月几日 发机采血小板与血浆一样 只要同型输注 如手工血小板必须进行交叉配血 相合 相容才可发血小板 36 输血知识 血小板输血机采血小板一般10个单位一袋 纯输注效果好 同型输注手工血小板一般1 2个单位一袋 必须交叉配血 相合可输 37 输血知识 冷沉淀同血型输注 同血浆 冷沉淀输注的适应证先天性凝血因子缺乏甲血友病血管性血友病 VWD Fg缺陷 FXIII缺陷获得性凝血因子缺乏DIC严重肝病尿毒症纤维结合蛋白水平降低恶性肿瘤重症感染DIC严重创伤 烧伤大手术 38 两利相存取其重 两害相存取其轻 Rh D 阴性患者输Rh D 阳性血 两难选择 不输血 生命危险 行政不作为 输血 中央台医疗纠纷官司报道 1 几年前天津某医院年轻女性RH D 阴性 因车祸 急诊输RH D