白血病免疫分型-刘艳荣PPT课件.ppt

白血病的免疫分型 北京大学血液病研究所 刘艳荣 1 一 急性白血病FAB分型 1976年提出 以形态为基础 ALL AML M0微小分化型急性髓细胞白血病 原始细胞 30 M1急性髓细胞白血病未分化型 原始细胞 90 M2急性髓细胞白血病部分分化型 原始细胞30 89 M3急性早幼粒细胞白血病 异常早幼粒细胞 30 M4急性粒单核细胞白血病 原始细胞 30 单核20 80 M5急性单核细胞白血病 原单 幼单 30 M5a未分化型 原单细胞 80 M5b部分分化型 原单细胞30 有核红细胞 50 M7急性巨核细胞白血病 原巨核细胞 30 L1以小细胞为主 大小一致L2以大细胞为主 大小不一L3以大细胞为主 大小一致 2 二 急性白血病的MIC分型 1985 1986提出MIC MorphologyImmunologyCytogenitics 80年代免疫学研究的进展 单克隆抗体的大量涌现 利用特异的单抗可以明确区分ALL AML及进一步鉴定亚型 对研究白血病的生物学特性 指导临床治疗及判断预后起着重要的作用 三 免疫分型的作用 1 区分ALL AML 形态 组化难以诊断的病例 不典型 治疗后 2 将ALL分为B T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型3 对M0 M6 M7具有诊断意义 M0 形态似ALL 组化 髓标志 T B M6 GlyA CD71 M7 CD41 CD61 IIb IIIa 3 四 正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及白血病细胞免疫标志特点 常用各系血细胞CD抗原1 T系 CD1 CD8 CD6不用 2 B系 CD10 CD19 CD24 FMC73 髓系 CD11b CD13 CD16 CD33 CD644 干祖 CD34 CD117 CD38 HLA DR 4 一 正常B细胞标志 CD19CD22TdTCD34CD10CD20FMC7CD23I期 II期 III期 期 泛B标志 CD19 HLA DR cCD79a CD22幼稚B标志 CD34 TdT CD10 成熟B标志 CD23 FMC7 5 B ALL的分型 亚型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIg急性早期B前体细胞白血病 earlyB precursorALL急性前B细胞白血病 PreB ALL急性B细胞白血病 B ALL 意义 CommonB ALL预后相对较好 CD34 B ALL比CD34 预后好 但CD34 患者伴Ph1 预后差 B ALL预后相对差 但随化疗方案改进 预后有所改善 6 CD7CD2CD5CD34CD1aCD3c mCD4CD8I期 II期 III期 期 泛T CD2 CD5 CD7 cCD3幼稚T CD34 TdT CD1a CD4 8 成熟T CD3 CD4 CD8 二 正常T细胞标志 根据在胸腺内发育阶段分4期 7 T ALL的分型 分型CD7CD2TdTCD3c m急性早期T前体细胞白血病 earlyTprecursorALL急性T细胞白血病 T ALL T ALL特点 1 幼稚T细胞数量增多 CD34 TdT 2 泛T标志丢失3 CD4 8双 或CD4 CD8单阳 8 意义 儿童 ALL发病率占肿瘤的25 B ALL预后比T ALL相对好成人 ALL发病率20 T ALL预后比B ALL好 9 三 正常粒细胞标志 全粒细胞标志 CD13 CD33 cMPO幼稚粒细胞 CD34 CD117 HLA DR 成熟粒细胞 CD15 CD11b CD10 CD64 cMPOCD13CD34CD117HLA DRCD33CD11bCD15CD64CD10幼稚粒 成熟粒 10 四 正常单核细胞标志 全单核细胞标志 CD33 CD13 HLA DR幼稚单核细胞标志 CD34 CD117 成熟单核细胞标志 CD14 CD64 HLA DRCD33CD13CD34CD117CD14CD64幼稚单 成熟单 五 成熟粒 单核细胞主要区别 成熟粒细胞 CD33 HLA DR CD14 CD64 dim成熟单核细胞 CD33 HLA DR CD14 CD64 11 正常BM各系细胞比率 淋巴 20 30 T 70 B 20 NK 10 单核 2 6 粒细胞 40 60 有核红 50 FCM的主要测定指标 FSC SSC FL1 FL2 FL3 FL4 FSC 反应细胞的大小 SSC 反应细胞内颗粒性 FCM设门法 FSC SSC 缺点 不能将淋巴 单核及幼稚细胞区分开CD45 SSC CD45是WBC抗原 RBC Plt为阴性 CD45在成熟细胞表达强 幼稚细胞表达弱 在淋巴 单核及粒细胞表达强度不同 优点 能将淋巴 单核及幼稚细胞区分开 特异分析白血病细胞免疫表型 FCM标记方法 单标 一种单抗 tube FL1 FSC SSC 三参数 双标 两种单抗 tube FL1 FL1 FSC SSC 四参数 三 四标 三种单抗 tube 四种单抗 tube FL1 FL3 4 FSC SSC 12 13 Sidescatter CD45 CD7 CD117 CD34 CD5 CD19 HLA DR CD11b CD117 14 Pre B ALL 15 CD10 CD34 16 17 Sidescatter CD45 CD20 CD117 CD34 CD19 CD34 HLA DR CD5 HLA DR CD10 CD117 CD33 CD33 CD38 CD23 CD23 Lamda ForwardScatter AML M0 R3细胞表达 CD34 CD38 CD117 HLA DR CD33 18 AML M1 R3细胞表达 CD117 CD7 CD34 CD33 HLA DR CD13 CD64 19 AML M2 R3细胞表达 CD117 CD34 CD19 HLA DR CD33 CD64 CD13 20 21 CD7 CD33 CD10 CD7 CD45 CD5 CD64 CD34 CD11b CD117 Sidescatter CD64 CD11b CD34 CD19 CD13 HLA DR ForwardScatter CD14 SideScatter AML M4 R3表达 CD117 CD34 CD33 HLA DR CD64 CD13 R414 35 22 CD45 CD5 CD14 CD34 CD11b CD117 Sidescatter CD64 CD11b CD10 CD13 HLA DR ForwardScatter CD14 SideScatter AML M5 R3 R4表达 CD117 CD34 CD33 HLA DR CD11bCD64 CD13 CD14 CD19 CD33 CD10 CD7 CD7 23 CD64 CD45 CD64 CD34 CD5 CD19 CD11b CD11b GlyA 24 GlyA CD45 CD5 CD19 CD64 CD34 CD11b CD64 CD11b CD117 25 诊断白血病主要标志 B ALL CD34 HLA DR CD19 CD10 cC