项目七 血栓与止血检验PPT课件.ppt

项目七血栓与止血检验 1 任务一血浆凝血酶原时间任务二活化部分凝血活酶时间任务三纤维蛋白原含量任务四血栓与止血帅选检查 2 项目七血栓与止血常用筛查试验 血栓与止血基本理论 3 4 生理情况下 血液在血管内流动 不会溢出血管外引起出血 也不会在血管内凝固引起血栓 与人体具有完善的止凝血和抗凝血功能有关 5 6 7 8 微血管损伤后止血机理 9 9 血管壁的止血作用 血小板的止血作用 凝血因子的作用 抗血液凝固系统 10 第一节血管壁的止血作用 11 内膜层 内皮细胞 基底膜中膜层 平滑肌外膜层 结缔组织 一 血管壁的结构 二 血管壁的止血功能 12 血管收缩 一 收缩血管 13 二 释放促栓物质 14 1 vWF 激活血小板 VWF 15 16 平滑肌胶原纤维弹性纤维 三 释放抗栓物质 17 第二节血小板的止血功能 血小板 四处堵漏的快速反应部队 18 一 血小板的表面结构 二 血小板骨架系统和收缩蛋白 三 血小板细胞器和内容物 四 血小板特殊膜系统 一 血小板的结构 19 一 血小板的表面结构 20 GP b GP b GP b GP b 收缩蛋白肌动蛋白等 内容物 21 22 鞘磷脂磷磷脂酰胆碱 PC 膜脂磷脂酰乙醇胺 PE 甘油磷脂磷脂酰丝氨酸 PS 脂磷脂酰肌醇 PI 胆固醇溶血卵磷脂质糖脂 23 二 血小板骨架系统和收缩蛋白 骨架系统和收缩蛋白是指膜内侧的微管 microtubules 微丝 microfilaments 和膜下细丝 submembranefilaments 24 纤维蛋白原 Fg ADPvWFATP凝血因子 cAMP血小板促生长因子 PDGF 5 HT 血小板促生长因子 TG Ca2 血小板第4因子 PF4 三 血小板 颗粒 致密颗粒的部分内容物 颗粒 致密颗粒 25 四 血小板特殊膜系统1 开放管道系统 opencanalicularsystem OCS 2 致密管道系统 densetubularsystem DTS 26 二 血小板的花生四烯酸代谢 27 三 血小板的功能 28 指血小板粘附与血管内皮下组分或其他物质表面的能力 1 粘附因素 1 血管内皮下成分或异物表面 2 GP b 复合物 3 其他2 粘附机制 一 粘附功能 adhension 29 血小板 血小板 血小板 30 指血小板与血小板之间相互粘附形成血小板团的功能 1 聚集因素 1 GP b a复合物 2 纤维蛋白原 Fg 3 Ca2 4 血小板被激活2 血小板的聚集机制 二 聚集功能 aggregation 31 血小板 血小板 血小板 32 3 血小板的聚集类型 1 第一相聚集 指由外源性致聚剂诱导的聚集反应 它与GP b a与Fg的相互反应有关 2 第二相聚集 指由血小板释放出的内源性致聚剂诱导的聚集反应 激活血小板的物质称为致聚剂或诱导剂 弱 ADP 肾上腺素 去甲肾上腺素 血管加压素 5 HT中等 TXA2强 凝血酶 胶原 A23187 33 指体内血小板活化后或体外血小板被机械或诱聚剂等激活后 血小板 及溶酶体等贮存颗粒中的内容物通过OCS释放到血小板外的过程 三 释放反应 release 34 1 释放因素 1 诱聚剂 2 完整的骨架系统 完整的骨架系统是释放反应的基本条件 3 Ca2 血小板释放反应需要Ca2 的参与 35 2 释放机制诱聚剂作用于血小板膜上的相应受体 释放出Ca2 使血小板胞质内Ca2 浓度增高 Ca2 促进肌动蛋白聚合形成微丝 肌动蛋白结合蛋白结合到肌动蛋白微丝中 组成交联的微丝 Ca2 激活肌球蛋白轻链激酶 使肌球蛋白轻链磷酸化 促进肌球蛋白聚合形成微丝 肌动蛋白微丝和肌球蛋白微丝相互作用 收缩蛋白使贮存颗粒移向中央 贮存颗粒膜与OCS膜融合 颗粒内容物经OCS向外释放 36 F F 前激肽释放酶 高分子量激肽原 F aF a 四 血小板的促凝作用 37 血小板在纤维蛋白网架结构中心 血小板变形后的伪足可以搭在纤维蛋白上 由于肌动蛋白细丝和肌球蛋白粗丝的相互作用 伪足可向心性收缩 使纤维蛋白束弯曲 在挤出纤维蛋白网隙中血清的同时 也加固了血凝块 有利于止血和血栓形成 五 血块收缩 38 39 血管因素 血小板因素 有序 逐级放大的激活凝血因子 纤维蛋白形成 白色血栓 红色血栓 40 生理条件下 凝血因子一般处于无活性状态 第三节凝血因子的作用 41 42 43 组织损伤 血管内皮损伤 a 凝血酶原 纤维蛋白原 Ca2 44 加速凝血酶原向凝血酶的转变 诱导血小板的不可逆性聚集 加速其活化和释放反应 激活因子 激活蛋白C系统 增强纤维蛋白溶解活性 45 TF释放 启动外源凝血 释放5 HTTXA2 胶原暴露 激活血小板 血小板血栓 VWF 血栓与止血的病理过程 血肿压迫 血管收缩 血流变缓 ET 启动内源凝血 46 血液凝固过程动画 47 止血 第四节抗血液凝固系统 48 一抗凝系统 细胞抗凝 体液抗凝 血管内皮细胞 单核 巨噬细胞系统 抗凝血酶 AT 系统 蛋白 PC 系统 组织因子途径抑制物 TFPI 49 部分细胞抗凝作用灭活凝血蛋白产生抗凝和激活抗凝物质单核巨噬细胞组织凝血活酶巨球蛋白 2MG 凝血酶抗胰蛋白 1AT 肝IXa Xa VIIa抗凝血酶III AT III 蛋白C 蛋白S血管内皮细胞AT III PGI2 2MG血栓调节蛋白 TM 激活蛋白C 50 1 抗凝血酶 AT 系统 包括AT和肝素 51 肝素 AT III 凝血酶 丝氨酸 AT III抗凝机制 丝氨酸位点 52 53 2 蛋白C系统 蛋白C PC 蛋白C系统蛋白S PS 包括血栓调节蛋白 TM 内皮细胞蛋白C受体 EPCR 54 EPCR 55 2 蛋白 PC 系统 EPCR 56 Vai a 灭活Va VIIIa b 抑制X因子与血小板膜磷脂的结合 c 激活纤溶系统 通过灭活纤溶酶原激活物抑制物 PAI 1 促进纤溶 d 增强AT III与凝血酶的结合 57 3 组织因子途径抑制物 TFPI F a TF a Ca a 58 APC 59 组成1 纤溶酶原 PLG 及纤溶酶 PL 2 纤溶酶原激活剂 tPA uPA 3 纤溶酶原激活物抑制物 PAI 纤溶酶抑制物 PI 4 纤维蛋白 Fb 纤维蛋白原 Fbg 及其降解产物 FDP 二 纤维蛋白溶解系统 60 61 62 二 纤维蛋白 原 降解机制 63 D dimer形成示意图 64 1 碎片X X 由于与Fg和FM的结构相似 故可与Fg竞争凝血酶 并可与FM形成复合物 故他们阻止FM的交联 2 碎片Y Y 可抑制FM的聚合及 或 抑制FM形成不溶性纤维蛋白 3 碎片D和E E 碎片D抑制FM的聚合 碎片E E 竟争凝血酶而具有抗凝作用 4 极附属物A B C H 可延长活化部分凝血活酶时间 65 活化部分凝血活酶时间测定activatedpartialthromboplastintime APTT 一 原理 66 APTT Ca2 脑磷脂 白陶土 Ca2 脑磷脂 部分凝血活酶 67 二 操作 一 APTT手工法 试管法 血浆0 1ml APTT试剂各0 1ml CaCl20 1ml 混匀计时 结果观察 缓慢倾斜试管 观察液体流动状态 流动停止停止计时参考值25 45s 二 仪器法 37 温浴 68 APTT 延长 缩短 因子VIII IX XI活性减低 高凝状态 三 临床意义 肝素抗凝监测 69 APTT纠正试验 于患者血浆中分别加入1 4的正常新鲜血浆 硫酸钡吸附血浆 正常血清 再作APTT试验 硫酸钡吸附血浆VIII XI XII正常血清IX XI XII新鲜血浆VIII IX XI XII 70 血友病甲 血友病乙 F 缺乏 正常血浆 硫酸钡吸附血浆 缺 正常血清 缺 APTT纠正试验 血友病 纠正 不纠正 纠正 纠正 纠正 纠正 不纠正 患者血浆 纠正 纠正 71 凝血酶原时间测定Prothrombintime PT一 原理 Ca2 脑磷脂 PT 组织因子 Ca2 磷脂 72 1 直接报告患者及正常对照的PT秒数2 报告凝血酶原时间比值 PTR PTR 受检者PT 秒 正常对照PT 秒 3 报告国际标准化比值 INR INR PTRISI 二 报告方式 73 组织凝血活酶的国际敏感指数 internationsensetivityindex ISI 是用组织凝血活酶试剂与ISI已知的国际参比品或经其标定过的参比品之间敏感度相比较的一个参数 测定方法 用多份凝血因子水平不同的血浆 包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆 用参比品测得它们的PT的对数 lgPT 再用待标定的组织凝血活酶测得它们的lgPT 以前者为纵坐标 后者为横坐标作图 经回归求得直线斜率 待标定的组织凝血活酶的ISI 已知的ISI 斜率 74 PT 延长 缩短 因子II V VII X Fg活性减低 高凝状态 三 临床意义 口服双香豆素类抗凝药物监测 75 要保证止凝血检验的质量必须做好以下十点 1 采血须顺利 尽量用大号针头 动作要轻柔 2 标本用加盖有刻度标记的塑料试管或硅化管收集 3 抗凝剂用109mmol L的枸橼酸钠 抗凝剂与血液的比例为1 9 76 当Hct增高 55 或 25 时 务必对抗凝剂用量或浓度进行调整 抗凝剂用量 ml 0 00185x全血量 ml x 1 Hct 77 4 标本采集至检验时间PT 4小时 APTT 2小时 一些因子活性检测要求即刻试验 5 使用仪器推荐或配套的试剂 使用时严格按照说明书 注意有效期和稳定性 6 反应温度控制在 37 1 7 手工操作必须做正常对照 复管检测 8 正确使用正常对照血浆及参比血浆 9 每天坚持室内质控 积极参加室间质评 10 建立本实验室的参考范围 78 凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验thrombintime TT一 原理 凝血酶 TT 79 二 结果判断 正常人凝血酶时间一般在16 18s 超过正常对照3s或在20s以上视为延长 如正常对照在20s以上 则超过5s为延长 加甲苯胺蓝后TT明显缩短 与未加甲苯胺蓝的TT比较相差5s以上 视为纠正 80 TT延长 血浆抗凝物质增多 纤维蛋白原异常 甲苯胺蓝能纠正 甲苯胺蓝不能纠正 链激酶 尿激酶溶栓治疗监测指标 81 纤维蛋白原异常 高纤维蛋白原血症为心脑血管血栓形成的独立危险因素 量 增高 严重肝病营养不良DIC 减低 老年人 慢性感染肿瘤 应激 口服避孕药期间等 82 任务四血栓与止血基本理论 83 84 生理情况下 血液在血管内流动 不会溢出血管外引起出血 也不会在血管内凝固引起血栓 与人体具有完善的止凝血和抗凝血功能有关 85 86 87 88 微血管损伤后止血机理 89 89 血管壁的止血作用 血小板的止血作用 凝血因子的作用 抗血液凝固系统 90 第一节血管壁的止血作用 91 内膜层 内皮细胞 基底膜中膜层 平滑肌外膜层 结缔组织 一 血管壁的结构 二 血管壁的止血功能 92 血管收缩 一 收缩血管 93 二 释放促栓物质 94 1 vWF 激活血小板 VWF 95 96 平滑肌胶原纤维弹性纤维 三 释放抗栓物质 97 第二节血小板的止血功能 血小板 四处堵漏的快速反应部队 98 一 血小板的表面结构 二 血小板骨架系统和收缩蛋白 三 血小板细胞器和内容物 四 血小板特殊膜系统 一 血小板的结构 99 一 血小板的表面结构 100 GP b GP b GP b GP b 收缩蛋白肌动蛋白等 内容物 101 102 鞘磷脂磷磷脂酰胆碱 PC 膜脂磷脂酰乙醇胺 PE 甘油磷脂磷脂酰丝氨酸 PS 脂磷脂酰肌醇 PI 胆固醇溶血卵磷脂质糖脂 103 二 血小板骨架系统和收缩蛋白 骨架系统和收缩蛋白是指膜内侧的微管 microtubules 微丝 microfilaments 和膜下细丝 submembranefilaments 104 纤维蛋白原 Fg ADPvWFATP凝血因子 cAMP血小板促生长因子 PDGF 5 HT 血小板促生长因子 TG Ca2 血小板第4因子 PF4 三 血小板 颗粒 致密颗粒的部分内容物 颗粒 致密颗粒 105 四 血小板特殊膜系统1 开放管道系统 opencanalicularsystem OCS 2 致密管道系统 densetubularsystem DTS 106 二 血小板的花生四烯酸代谢 107 三 血小板的功能 108 指血小板粘附与血管内皮下组分或其他物质表面的能力 1 粘附因素 1 血管内皮下成分或异物表面 2 GP b 复合物 3 其他2 粘附机制 一 粘附功能 adhension 109 血小板 血小板 血小板 110 指血小板与血小板之间相互粘附形成血小板团的功能 1 聚集因素 1 GP b a复合物 2 纤维蛋白原 Fg 3 Ca2 4 血小板被激活2 血小板的聚集机制 二 聚集功能 aggregation 111 血小板 血小板 血小板 112 3 血小板的聚集类型 1 第一相聚集 指由外源性致聚剂诱导的聚集反应 它与GP b a与Fg的相互反应有关 2 第二相聚集 指由血小板释放出的内源性致聚剂诱导的聚集反应 激活血小板的物质称为致聚剂或诱导剂 弱 ADP 肾上腺素 去甲肾上腺素 血管加压素 5 HT中等 TXA2强 凝血酶 胶原 A23187 113 指体内血小板活化后或体外血小板被机械或诱聚剂等激活后 血小板 及溶酶体等贮存颗粒中的内容物通过OCS释放到血小板外的过程 三 释放反应 release 114 1 释放因素 1 诱聚剂 2 完整的骨架系统 完整的骨架系统是释放反应的基本条件 3 Ca2 血小板释放反应需要Ca2 的参与 115 2 释放机制诱聚剂作用于血小板膜上的相应受体 释放出Ca2 使血小板胞质内Ca2 浓度增高 Ca2 促进肌动蛋白聚合形成微丝 肌动蛋白结合蛋白结合到肌动蛋白微丝中 组成交联的微丝 Ca2 激活肌球蛋白轻链激酶 使肌球蛋白轻链磷酸化 促进肌球蛋白聚合形成微丝 肌动蛋白微丝和肌球蛋白微丝相互作用 收缩蛋白使贮存颗粒移向中央 贮存颗粒膜与OCS膜融合 颗粒内容物经OCS向外释放 116 F F 前激肽释放酶 高分子量激肽原 F aF a 四 血小板的促凝作用 117 血小板在纤维蛋白网架结构中心 血小板变形后的伪足可以搭在纤维蛋白上 由于肌动蛋白细丝和肌球蛋白粗丝的相互作用 伪足可向心性收缩 使纤维蛋白束弯曲 在挤出纤维蛋白网隙中血清的同时 也加固了血凝块 有利于止血和血栓形成 五 血块收缩 118 119 血管因素 血小板因素 有序 逐级放大的激活凝血因子 纤维蛋白形成 白色血栓 红色血栓 120 生理条件下 凝血因子一般处于无活性状态 任务三凝血因子的作用 121 122 123 组织损伤 血管内皮损伤 a 凝血酶原 纤维蛋白原 Ca2 124 加速凝血酶原向凝血酶的转变 诱导血小板的不可逆性聚集 加速其活化和释放反应 激活因子 激活蛋白C系统 增强纤维蛋白溶解活性 125 TF释放 启动外源凝血 释放5 HTTXA2 胶原暴露 激活血小板 血小板血栓 VWF 血栓与止血的病理过程 血肿压迫 血管收缩 血流变缓 ET 启动内源凝血 126 血液凝固过程动画 127 止血 第四节抗血液凝固系统 128 一抗凝系统 细胞抗凝 体液抗凝 血管内皮细胞 单核 巨噬细胞系统 抗凝血酶 AT 系统 蛋白 PC 系统 组织因子途径抑制物 TFPI 129 部分细胞抗凝作用灭活凝血蛋白产生抗凝和激活抗凝物质单核巨噬细胞组织凝血