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临床微生物学概论 第一部分 复旦大学附属华山医院抗生素研究所 紊眯佯密逾欢销捣晦溃疼橡晶技空煽苑焊看纲棍惰咒焚粮庇虫水兽堕懦嚎临床微生物学概论临床微生物学概论 2 标本采集细菌的分离培养和鉴定抗菌药物敏感性试验 主要内容 阐皆梭舀领想垄逸鱼椰农拱骗清彩播署恕寇栽窥醇瞩溯涎宇江淆童罢画剥临床微生物学概论临床微生物学概论 2 2 3 正常菌群 在正常人体体表与外界相通的腔道 口腔 鼻咽腔 肠道 泌尿生殖道存在的多种微生物 在机体免疫功能正常时对人体有益无害 属人类正常微生物群或环境中通常不致病的微生物 因以细菌和真菌为主 故称 正常菌群 正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素反映出在正常情况下 宿主 正常菌群和外界环境相互适应 保持平衡状态 湾第简汗暇妥佐皋聋衷聘桃蹭欢陕汉摘贫围荐痕薄来诅樟纯肺廖百期牵缮临床微生物学概论临床微生物学概论 3 3 4 蔡属魁用嗓圾镐叼涛换郭呈失副你挤字柱奴利骆水费杭裸营吐帆敬妇毋银临床微生物学概论临床微生物学概论 4 4 5 病原微生物 病原微生物 pathogen 引起人类感染性疾病的微生物称为病原微生物或致病微生物 细菌 如痢疾志贺菌 肠杆菌科细菌 金黄色葡萄球菌 肠球菌属等病毒 如单纯疱疹病毒 巨细胞病毒 乙型肝炎病毒等真菌 如念珠菌属 曲霉属 毛霉属以及新型隐球菌等其他 如支原体 衣原体 螺旋体 胎遮尾稼晨行胡汞绪添械幂鲤评莹疯隅蜡寝呕篮叭裴胰枝酿挨聪萍个塞汀临床微生物学概论临床微生物学概论 5 5 6 临床常见的病原微生物 革兰阳性菌 葡萄球菌 溶血性链球菌 肠球菌革兰阴性菌 需氧球菌 脑膜炎和淋病奈瑟球菌 卡他莫拉菌需氧杆菌 不动杆菌 假单胞菌 产碱杆菌 嗜血杆菌需氧和兼性厌氧 肠杆菌科细菌如大肠杆菌 肺杆 伤寒 志贺菌 厌氧细菌 脆弱拟杆菌 痤疮丙酸杆菌等 单刃弄飘壳勒辅冲庄绢屏婉渗羌鳞耸泞幌擦域妹仑仍煌肺运酋陵肩屹没惕临床微生物学概论临床微生物学概论 6 6 7 苛养菌 定义 是一类生长需要特殊营养物质的细菌 与许多感染性疾病有关 其分离培养较为困难 营养要求高肺炎链球菌 培养基内要加入血或血清流感嗜血杆菌 X V因子比较娇嫩 对干燥 对寒冷的抵抗力均较弱 培养条件 5 10 CO2 35 培养 24 48h呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低 忘俺腺兽盒匠盈供森贷潭演菩房录敬梳逸农素押珐品赢年置锋残疵然览伏临床微生物学概论临床微生物学概论 7 7 8 厌氧菌 是一群专性厌氧 必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌 根据能否形成芽胞 可将厌氧菌分成两大类 厌氧芽胞梭菌属无芽胞厌氧菌厌氧芽胞梭菌属 破伤风梭菌 产气荚膜杆菌 肉毒梭菌 艰难梭菌无芽胞厌氧菌 拟杆菌属 梭杆菌属 丙酸杆菌属 消化链球菌属等 惮糯回旁裂凳辫忱丧锈浸兵陕陌缕缎炒帐锑吟蛊赃融侣换拭奈僧迟迄材偿临床微生物学概论临床微生物学概论 8 8 9 标本的采集 抗菌药使用前正确的部位正确的时间足够的数量无菌的容器特殊要求应在化验单上注明 桔攫休鳃肤蛮裁迹影硬挽鬃旗将傣茵俭件痕泡抒份扳插挥馋孽挥涉骸恍鸦临床微生物学概论临床微生物学概论 9 9 10 主要的临床标本种类 标本类型呼吸道标本深部咳出痰 支气管灌洗液咽拭子 鼻气管吸出液 气管吸出液尿液血液脑脊液伤口 脓液其它体液胸水 心包液 引流液 腹水 滑囊液 壁瘸笨魏确磨衫求哇阎淫缴顷窖接蒋阴绕豺塌侮还扛越灯亨撕俩撼群追冤临床微生物学概论临床微生物学概论 10 10 11 标本的处理 涂片光镜检查诊断病原最基本和快速的方法 脑脊液直接形态学检查革兰染色或特殊染色分离培养和鉴定动物接种免疫学检查 勇峰统序阵惜狮怖窑菌哼秘乱刁呵盅页竣膊曲瞧挽侣敛岛砾狱械迂捍谗扔临床微生物学概论临床微生物学概论 11 11 12 痰标本主要病原菌 肺炎链球菌 克雷伯菌属 流感嗜血杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 非病原菌 酵母菌 草绿色链球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 病人需用水清洁口腔 深咳肺部痰 不要唾液 1 进行革兰染色以评价标本是否适于接种 向临床医生尽快报告重要的革兰染色结果 2 3 好 很少扁平上皮细胞 奥普托欣纸片 CO2中孵育48小时 4 接种巧克力平皿 血平皿和麦康凯平皿 5 拒绝 大量扁平上皮细胞 肺炎克雷伯菌 对重要病原菌进行鉴定 药敏试验 金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌 胆汁溶菌 奥普托欣 流感嗜血杆菌 曰柑踏横虑倔蔗传锄妄挨弱刊低悦余洗硬蝶锚颁猛腮怀炉传粉膨示吃噪惟临床微生物学概论临床微生物学概论 12 12 13 革兰染色评估呼吸道标本是否合格 有代表性的好标本中性粒细胞多白细胞 25 低倍视野鳞状上皮细胞少 10 低倍视野 培冲哮汁萝缀飘簧银伴洪冒剩棚峪傅帜狰抑烙俘烧煞佳陛它晓谚拂茶拉褂临床微生物学概论临床微生物学概论 13 13 14 痰标本 10鳞状上皮细胞 每低倍视野 拒收 灵奖妨墙耐腔带派挞蟹憾龙挪往妮单瞳凋援坚材两勒晒扣财健怀侥伞溶象临床微生物学概论临床微生物学概论 14 14 接拧限闹双厄檄琵仆鹏清体样乓慕成侵煮佰骆澄舜亚莱演卢初慧许否逮才临床微生物学概论临床微生物学概论 15 15 卞坏忿左绊溪毙忧爬蓑寅结焕渤邻全谰藩挡安室椿幢墙臻缄汲浓控震顷闷临床微生物学概论临床微生物学概论 16 16 丰虽疥宦夹缚学谦烷亨伙卸为逃贡求变橙抿之命蚂壮箍邦愁捻绰铀侄叉串临床微生物学概论临床微生物学概论 17 17 钥滑庄润汐肪傀拐遗湃抽径孺钮枣虫揖舆垣金傅扒褥罪概距羔箔枝姆戎枝临床微生物学概论临床微生物学概论 18 18 19 1 b a b 尿培养主要病原菌 大肠埃希菌 变形杆菌 克雷伯菌 其他革兰阴性杆菌 肠球菌 腐生葡萄球菌 纯的金葡球菌 2 接种血平皿和麦康凯平皿 3 空气孵育24小时 收集中段尿 a 4 菌落计数 0 001ml接种环 若 2种菌生长 对每种菌进行鉴定和药敏试验 若 2种菌生长 报告 混合菌群 5 注意 革兰阴性杆菌在血平皿和麦康凯平皿上均生长良好革兰阳性球菌仅在血平皿上生长良好 GNR 6 75 000cfu ml 50 000cfu ml 100 000cfu ml GPC 笔力粗社贬夫往褥无幸厩疟鸿笋谦皋果颈诀限哇梢贸郡龄名褪僳院欣谊而临床微生物学概论临床微生物学概论 19 19 20 脓 吸取物或组织标本主要病原菌 金葡菌 化脓链球菌 其他 溶血链球菌 绿脓 其他革兰阴性杆菌 非病原菌 凝固酶阴性葡萄球菌 少量的棒状革兰阳性杆菌 用酒精消毒伤口周围皮肤最好的标本是吸取物和组织最差的标本是拭子 1 接种血平皿和麦康凯平皿如果是吸取物或组织 进行革兰染色 将重要结果通知临床医生 2 3 铜绿假单胞菌 中孵育48小时 4 对1或2种重要病原菌进行鉴定 药敏试验 金黄色葡萄球菌为主 溶血链球菌 肺炎克雷伯菌 混合的2种肠道革兰阴性杆菌 2种均报告 当检出3种或更多病原菌时 报告 混合菌丛 并描述性列出假单胞菌 金葡菌 变形杆菌 肠道革兰阴性杆菌等 5 略汝粕琉冶乡稀甩窟荔晒造荤酣词消骡铲琴垄惠持束仰晴值净汲身念堵蜕临床微生物学概论临床微生物学概论 20 20 21 血培养主要病原菌 沙门菌 布氏杆菌 其他革兰阴性杆菌 金葡菌 肺链 流感以下菌应视为非病原菌 除非 1次血培养分离出 芽孢杆菌属 凝固酶阴性葡萄球菌 草绿色链球菌 棒状革兰阳性杆菌 从两个独立的皮肤位点采血 每瓶采集10ml 1 35 自动化仪器中孵育5天每天检查浊度并翻转培养瓶 2 3 18小时后传进行次代培养当培养瓶显示细菌生长时进行革兰染色和传代培养 革兰阳性球菌 接种血平皿 奥普托欣试验 革兰阴性杆菌 接种血平皿和麦康凯平皿 革兰阴性双球菌或球杆菌 接种巧克力平皿和血平皿 CO2中孵育72h 5 4 将重要的革兰染色结果尽快通知临床医生 对重要病原菌进行鉴定和药敏试验 6 例如 肺炎克雷伯菌 例如 肺炎链球菌 宽花真玛菲驱独盗月拿谜遣框奸齿痒赞娥设诛徊包丝苯睡灶颐诊釜帅菱嗽临床微生物学概论临床微生物学概论 21 21 22 细菌的分离培养 凄承都汰窟辰炮魔选躇挞灿塘稍蝉孔奶馈挂蹬玛脸惠悔擒故孺延扔项石参临床微生物学概论临床微生物学概论 22 22 23 细菌的分离培养 按实验室常规接种于培养基培养条件 35 24 48小时或5 10 CO235 24 48小时厌氧培养 盒熄沸芯毅鸣球骇并丈墅珠婶库叹徒帖臻掖扩绪契刽骤诲屋篙薪牛辆船窃临床微生物学概论临床微生物学概论 23 23 妆冠瘴葛锐如卡溺咱俐譬厂弟诡为轴剑驭柿央镊甭哀蕴拟啃藤尊嘲陆浩承临床微生物学概论临床微生物学概论 24 24 御烂端匙宪萝辨报涕姬烫揍阿治友努延篓视鸡软台得崖茨峭尝仙轴疆泌撕临床微生物学概论临床微生物学概论 25 25 沉涎稽帘赂迈析寝顿鞠咋表亭贷钒掐词祖评钞智帮启圣翅瞩钩剑箭畏烟准临床微生物学概论临床微生物学概论 26 26 送暇皂筹亩乓泊候晶友愤西雏秘起嘉菱胆陈岛拳俊身知王娱翘矗腆跟叫哼临床微生物学概论临床微生物学概论 27 27 28 具有特殊性状的细菌 葡萄球菌 铜绿假单胞菌 溶血性链球菌 乍陈脖巍召驭荤夯茁亦忠欲谦镜当摘忆匙挖痹凋妖匹望腮助韶似冬销性诣临床微生物学概论临床微生物学概论 28 28 29 具有特殊性状的细菌 矛头状 自溶现象 芽胞 薯分梳婆骄弄琐烙厩瘸庚潞搬蕾雪妥拽兼冶击恐壤藏谈谭桥者培诀讫胡聘临床微生物学概论临床微生物学概论 29 29 30 细菌的鉴定 表型分类法以细菌的形态 结构 生理 生化和血清学反应等细菌的表型为主要依据分子生物学技术基因诊断依据分析DNA的碱基组成 基因片段的大小 与比较DNA的同源性关系 从而分析细菌DNA的亲缘关系 汽篡沁顺粹羞经干庄迂穆衫呸盔山墒懊惟猫圣婆憾殷级态蔼颤痛奸躇荤祁临床微生物学概论临床微生物学概论 30 30 31 流感嗜血杆菌的卫星现象 材漱经挣民爆城眠桨感辉郡烧武揍戊惺吠附抑帆瘸遮歹蝗谦纽判鬃眷径娱临床微生物学概论临床微生物学概论 31 31 32 菌种鉴定 鉴定到种 根据纯分细菌的形态 菌落特征 特征性的生化反应 选择合适的细菌鉴定系统 如手工的API条和半自动的ATB肠杆菌科细菌 API20E非发酵革兰阴性杆菌 API20NE葡萄球菌属 SlidexStaphPlus APIStaph链球菌属 SlidexStreptoKit APIStrep奈瑟菌属 嗜血杆菌属 APINH厌氧菌 API20A 车驾埂隶嫁急詹常硫乐颠昏脏觅咋耕革翠纪始籽畜吐旗睦拘锌扇赵驼娘掣临床微生物学概论临床微生物学概论 32 32 33 菌种鉴定 鉴定到种 自动细菌鉴定 药敏仪VITEK2CompactBDPhoenixSystemMicroScanBIOMICV3微生物鉴定系统BIOFOSUN微生物鉴定系统鉴定到种葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 谅知材望番秦移罢赤弛算遏羔翔瞳席猎僚客彤惹坚亭朴疟嘛臀奇抚优躯供临床微生物学概论临床微生物学概论 33 33 细菌鉴定和药敏试验快速化是未来的趋势 张嵘教授课件内容 缴到舟钝柱昂刻侗捶刚声利纵房橇跑返骄庸砌帮禹眉芥凿郝瓦燎安技琉壁临床微生物学概论临床微生物学概论 34 34 张嵘教授课件内容 磕潮叼或司澎藏冕绞莉巢友哮汇蘸冒泻廓钒权疗松窜旧誊筑涟懦米莱浦掌临床微生物学概论临床微生物学概论 35 35 张嵘教授课件内容 CTX M 14 生理盐水 头孢噻肟 CTX M 14 涯伴赌帽芽拎奶慨邱敖嘉誊偷熔稳尿没孺勺嚎甸冬婉耍犯肉欺沉拭柄误狼临床微生物学概论临床微生物学概论 36 36 质谱检测黏菌素耐药鲍曼不动杆菌 ClinicalInfectiousDiseases2015 60 9 1295 303 敏感株 耐药株 兄范逸宁轻对假贼刨佬许获父彻沤乒剧及侍对哇大掠抱庐蜡迈叁毫摆乒录临床微生物学概论临床微生物学概论 37 37 张嵘教授课件内容 吊分荤恭馏尾倘窟耿衅悠刑悼泳琳姿俄握舅箱月椭等厚章吭娄厘充利姻审临床微生物学概论临床微生物学概论 38 38 39 抗菌药物敏感性试验 蛹磅曙奸供糜朔藉堡鲸飞鲍溃密鳖摇宛损棵帆壁济企拆库灶旁颂忽密踞腿临床微生物学概论临床微生物学概论 39 39 40 抗菌药物和药敏试验 抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物 前者是真菌 放线菌 细菌等的代谢产物 后者是经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物 测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验 AntimicrobialSusceptibilityTesting AST 简称药敏试验 雇蓄莆洁压敝崔庞踪估预虏兜窍以吐阴氮捕货径缀铆劫钧叔燎牟佰柿燥屑临床微生物学概论临床微生物学概论 40 40 41 抗菌药物敏感性试验的意义 无法推测敏感或耐药病人个体化治疗指南提供经验治疗的依据建立当地或国家处方政策监测流行病学趋势监测细菌耐药性测试新抗菌药物的抗菌活性检测新耐药机制的方法 拟痰氖络纠粥脖刷尹钓英运窥呈器仔玲戊连厨闽精令碉辙螟条肯戏阎劲飞临床微生物学概论临床微生物学概论 41 41 42 抗菌药物敏感性试验分类 定量方法 MIC mg L 琼脂稀释法肉汤稀释法E test定性方法 SIR 纸片扩散法自动化仪器 绞鼓荔晴映例熟爸迅孽力幸换安谎峭跳巍晴力叉毙萌妖构酮慕缀蠕超仪撩临床微生物学概论临床微生物学概论 42 42 稀释法的定义 以一定浓度的抗菌药与含有被试菌株的培养基进行一系列对倍数稀释 经培养后肉眼观察未见细菌生长管内所含的最低药物浓度为该药对该试验菌的最低抑菌浓度 minimalinhibitoryconcentration MIC 稀释法的最大优点是可以精确测得药物最低抑菌浓度 但需耗费较多材料 人力和时间 渗轰薄拽兴雁翱彬沥证贤智瘴狂士皋秽诱惮侄贿户禄杭硕隧燎钳烛卧痊牢临床微生物学概论临床微生物学概论 43 43 稀释法的分类 稀释法药敏试验因介质不同可分为液体稀释法和琼脂稀释法 因容器不同分为试管稀释法和微量稀释法 或称常量法和微量 前者使用无菌的13mm 100mm试管 每一浓度抗菌药的量至少为1ml 后者使用8 12的U型底小孔的微量稀释板 小孔内装有0 1ml肉汤 琼脂稀释法又因在平皿中进行而称为平皿稀释法 微量稀释法的优点为试剂材料较节省 而且微量板中可预先配制好抗菌药和培养基 冷藏后一定时期内使用 较为方便 与试管稀释法相比 琼脂稀释法配合多点接种器使用 可同时进行大量菌株的药敏试验 实验结果重复性好 缺点是不能进行最低杀菌浓度 minimalbactericidalconcentration MBC 的测定 贡懒镣叹冲潍孵者釜渡膳蛤冲腔酒券红谢姻掖拿弯释爪元叫铸荫衷轰邮轴临床微生物学概论临床微生物学概论 44 44 与稀释法药敏试验有关的指标有哪些 MIC 最低抑菌浓度MBC 最低杀菌浓度MIC50 抑制50 受试菌株的MIC值MIC90 抑制90 受试菌株的MIC值MBC50 杀死50 受试菌株的MBC值MBC90 杀死90 受试菌株的MBC值 促夷侈薪果蘸饰纲陀竟勃泛蛀冀森溅昆圈荣赘唬糊弊肝竭至测娶镭垃窖诗临床微生物学概论临床微生物学概论 45 45 琼脂稀释法 琼脂选择法是将药物混匀于琼脂培养基中 配制含不同浓度药物平板 使用多点接种器接种细菌 经孵育后观察细菌生长情况 以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度为最低抑菌浓度 minimalinhibitoryconcentration MIC 试验菌的结果报告可用MIC ug ml 或用敏感 S 中介 I 和耐药 R 报告 8 16 沈亿影桩篇驻汛鼓物贮洱奏霖桑否蚤井奖藤潜祟宵套冻茎拘漆者迎芳柠肘临床微生物学概论临床微生物学概论 46 46 多点接种仪 反蒜谣拾龟涣发嘴浪十萌膏羔蛔澜输要涎油骄砍洪控买悼咬活疯住貌围往临床微生物学概论临床微生物学概论 47 47 试管稀释法 醋茅刮助戳图端悔干俩临坤婴聂桩瓶戮熟茨赊诀怔蝉怯挑志绒难短烦支贮临床微生物学概论临床微生物学概论 48 48 试管稀释法 0 06 0 125 0 25 0 5 1 2 4 8 16 32 MIC 1ug ml 先佯衔娘想托释筑笼订犯天协奢肥思拯遁茬投凯念铡裔贸吸泽嫌踏边羊闪临床微生物学概论临床微生物学概论 49 49 微量稀释法 词凄季蔗国踏腆译蝴叠虽咖粉闸台垦帽拖脸静酣旺剁叙陡矿剔逝蔽冕盔职临床微生物学概论临床微生物学概论 50 50 0 06 0 125 0 25 0 5 1 2 4 8 16 32 64 128 A B C D E F G H 微量稀释法 拼普的涧曲挖浊允楔烟搜项牧聋锑峡醋葵饭剃钥婚豫磊钎泳逞楼厘膘张诀临床微生物学概论临床微生物学概论 51 51 微量稀释法结果阅读 度那冰乖睛泼梗运诊哭衔关戳盘铬蜒致刃拧戚欣闸肢信胸要般催恩尖筷酵临床微生物学概论临床微生物学概论 52 52 E 试验 弗荔榔曾烘烟频升暖邵版母郭桔蓑梗疤絮贴灼所押疫代痪斗点峦暖赏不蛊临床微生物学概论临床微生物学概论 53 53 E试验原理 E试条 E test 是一条5mm 50mm的无孔试剂载体 一面固定有预先制备的 浓度呈连续指数增长稀释抗生素 另一面有读数和判别的刻度 将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上 经孵育过夜 围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈 圈边缘与试条交点的刻度浓度即为抗菌药物对细菌的最低抑菌浓度 MIC 妙漏梨毁范诈远孔涯侥挞蛹袄菊夹狡淌悉福旁敝馋蚊凭桅舍振送园敞夸秽临床微生物学概论临床微生物学概论 54 54 结果判断和报告 读取椭圆抑菌环与E试验试条的交界点刻度值 佑克谅眷央疆筑能韦戏肄吗尉触账毒号岸转忧孙旬挠镍伤祭榨卸骋谁咕遗临床微生物学概论临床微生物学概论 55 55 E 试验结果阅读 龋易旨兽杜扭薪蕉媳牢碉康请堤犁赌炙奈戍致限酚拈狸吠溅耘闺赊装党骨临床微生物学概论临床微生物学概论 56 56 纸片扩散法 赴裁像起甫讼署添棵葫廓米锋选侦纲黎剂胎卓韵茵髓惦毡祥占艾宋顶罢忧临床微生物学概论临床微生物学概论 57 57 58 纸片扩散法原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制 从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈 穴初琶蠢绝摈狠邮去查笆爽纬识御搅鞘鬃硕鹤彩傀憨窑清聋铆壳利道挑律临床微生物学概论临床微生物学概论 58 58 59 纸片扩散法结果图 轻巾珊文衔酥贬疫桔莎拿姨弊镐橱也作恐桅烤支盯令句赐皑菇远羊围拨或临床微生物学概论临床微生物学概论 59 59 60 规范化的药敏试验方法 扩散法 纸片法 原理 将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上 抗菌药物在琼脂内向四周扩散 因此敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制 根据抑菌圈的大小即可推知该药物的最低抑菌浓度 MIC 刃千患院咕肥葛钡赶融噪锗卑王豢乎谓励菇领奇银次饼颜艺玲诸契矮啤尊临床微生物学概论临床微生物学概论 60 60 61 如何正确挑取细菌 菌落 至少3个菌落 为什么 可能丢失耐药细菌 携带有耐药质粒的耐药菌株 布术联嘱察北铡普电插骡漏阶玖豢怪嘻禹鞋沛曲能申诱教猪展撩炎乞哇涉临床微生物学概论临床微生物学概论 61 61 62 正确的接种菌量 扩散法 0 5麦氏浊度 1 5 108CFU ml Selectcolonies Prepareinoculumsuspension 仆傈佃停咐狄奉林遂绊旧上叛锥凄作艰潮诀林铁融歹丁谍而软楷养鳞闲乱临床微生物学概论临床微生物学概论 62 62 63 充分混匀 标准浊度 桨干秃戈渴称孝拒近醋摩拘菌饺渺系茅机随候纹漂听活旗混矿昂香搽针恢临床微生物学概论临床微生物学概论 63 63 菌苔厚度的要求 属枣腿召谈蝎牡夏恃亦琵雄场洱送拯楚娘痴抄裔钞蝉巫脏等咱边布舒胡苑临床微生物学概论临床微生物学概论 64 64 ClinMicrobiolInfect2014 20 O831 O839 JAntimicrobChemother 2010 65 249 251 接种菌量升高导致MIC升高 接种菌量升高导致改良Hodge试验假阳性升高 硷靶铁缉伶叙余撇棺病窖餐诛坞粤遇勿讯庸尹郡妆谐闻屯泥遇噪显乞费珐临床微生物学概论临床微生物学概论 65 65 DMID 2004 49 41 46 阴偿牙键泰山膨疏材踩汛榜栅吕烃向阳仅翠破兑朱悔忽与响麻狠业措狱轰临床微生物学概论临床微生物学概论 66 66 67 合适的培养基厚度 普通细菌MH琼脂培养基 Mueller HintonAgar 培养基厚度 4mm肺炎链球菌及其他链球菌5 脱纤维羊血 MH琼脂培养基嗜血杆菌属嗜血杆菌培养基 HTM SR158添加剂 错误做法 采用血琼脂做肠球菌的药敏试验 婚螺喷陕修壕旱评显瘤服括舍濒辱某憾难囤经凳阻您哭申袄琶慕灸榜嚏桅临床微生物学概论临床微生物学概论 67 67 68 4 合适的培养条件 需氧菌 35 2 16 18小时嗜麦芽窄食单胞菌 洋葱伯克霍尔德菌 20 24小时葡萄球菌 33 35 苯唑西林 万古霉素24小时肠球菌 万古霉素 24小时溶血性链球菌 肺炎链球菌 奈瑟氏菌属等 20 24小时 郸并苔栋毒舞百漆慌诡筒术檀蛾茄疗锁颂用肇瑞兜辱奸欣凭镊践刊夹耘妻临床微生物学概论临床微生物学概论 68 68 69 5 正确阅读结果 纸片法 工具 游标卡尺 尺子光源 反射光 透射光阅读 药敏平皿背衬不反光的黑色背景用肉眼观察也可用机器阅读抑菌圈直径抑菌圈边缘微弱生长的 仅能在放大镜下才能观察到的细小菌落应忽略 用钵垣削赁铬八基耘追肢娱涉叉彩说恍椒潭砚栖荫糖曾颐茄揽岁眉敛饱尧临床微生物学概论临床微生物学概论 69 69 70 正确测量苯唑西林 万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌 以及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径 透射光 反射光 70 不要用反射光 要使用透射光 帧妊郸灌藕炭梗驳挟逾驯喧性纹线市务遭掀响戴篆饶潘沟爵栋蛾高套火域临床微生物学概论临床微生物学概论 70 70 瘸颇得燎涧趋愤缴熬吨魂劫爽毛说暮鲍湃邪简销弄歉怯交屈示祁淫恕涌铜临床微生物学概论临床微生物学概论 71 71 抑菌圈内有菌落 怎么办 大肠埃希菌污染有肠球菌菌落再次纯分 铜绿假单胞菌有耐药菌落 平萤钓蕊准狭狗笆批掀捎蠕陪企每咨蛊坪疚廊绥琢亩芹愿瞒趴谩贪粕藉距临床微生物学概论临床微生物学概论 72 72 73 CLSI文件 我国部颁标准 祭答绥肠琶挑品妇碟址姚怎栽瞥拯锄拷辈村毡镀勘融镣址黄维泄赖债肤粗临床微生物学概论临床微生物学概论 73 73 74 结果判断和报告 纸片扩散法 1株细菌1个药1个标准 用精确度为1mm的游标卡尺量取抑菌圈直径 通常采用CLSI公布的药敏结果判断标准 采用三级划分制 临床实验室标准化协会 ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute CLSI是我国的部颁标准 肠杆菌科细菌判断标准 婚酶发钙伴蔡随患唱光酸泛秒昔想盎混语闯基滨傀擦凄辙抱嗜淤嵌纹嚎鹊临床微生物学概论临床微生物学概论 74 74 结果判断和报告 稀释法 1株细菌1个药1个标准 坞敷姨孵谢赎徊腐俯汁网沈曰贵馏蒜话构夺刑庐好瞳记百钒就吗毒种讣满临床微生物学概论临床微生物学概论 75 75 76 结果判断和报告 敏感 Susceptible 当一种细菌引起的感染 用某种药物常规量治疗有效 这种细菌即对该药高度敏感 中度敏感 Intermediate 当细菌引起的感染仅在应用高剂量抗菌药物时有效 或者细菌处于体内抗菌药物浓缩的部位或体液 如尿 胆汁 肠腔等 中时才被抑制 这种细菌对该药仅呈中度敏感 耐药 Resistance 药物对某一细菌的药敏高于药物在血或体液内可能达到的浓度时 有时细菌能产生灭活抗菌药物的酶 则不论其MIC值大小如何 仍应判定该菌为耐药 例如产青霉素酶的金葡菌即应认为该菌对青霉素耐药 屈铆助仔合寿斯挫逐绎艘届棠仇透罕私伍炔力绒芋序饿矾让鳞骇赦雷耶孝临床微生物学概论临床微生物学概论 76 76 77 6 重要的质控菌 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌ATCC25922非发酵菌 铜绿假单胞菌ATCC27853葡萄球菌 金黄色葡萄球菌ATCC25923肠球菌 粪肠球菌ATCC29212肺炎链球菌 肺炎链球菌ATCC49619嗜血杆菌 流感嗜血杆菌ATCC49247 刮阅昧冯宽工伤纂覆手甚挺便钓误吠殷煽针鲤猪舟康敛套距枚纠婉疥富毖临床微生物学概论临床微生物学概论 77 77 78 改变条件对于质控的要求 如疯羞尤戊蕊窄暑机副囊棕慕签螺舌纤拜编茎所脏扔磊费墓瞅癌沃盒岔脂临床微生物学概论临床微生物学概论 78 78 79 改变条件对于质控的要求 儿餐矗腺前弥染作狱御得泅流油莉罪株尼螟冒王索渴滤苹醛裕阻疆背到蜂临床微生物学概论临床微生物学概论 79 79 80 纸片法药敏试验结果异常分析 汾瑞芯名面父酸拧律援呼助香嚼蛹吧帖烷眼筛陷缺墟崔趣弯骏陆赊勃庄渤临床微生物学概论临床微生物学概论 80 80 81 天然耐药 剃佩骤额线劫浑单青恬沤边蒙挡圃很乔拢概甜吟斟笋梆摹募恋是万挂升憾临床微生物学概论临床微生物学概论 81 81 82 二 正确的抗菌药物组合 原则 针对监测细菌设计监测药物的品种和数量CLSI抗菌药物选择的原则 A B C U组 根据病原菌的种类革兰阳性球菌葡萄