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精品文档植物液浸标本保存技术规程1范围本标准规定了植物液浸标本保存的技术与程序。本标准适用于植物液浸标本的保存。本标准适用的范围为被子植物解剖标本及器官的浸制。2.液浸标本的特点及意义2.1什么是液浸标本？ 液浸标本就是将植物体或器官用适当的药液浸泡、防腐后保存的标本。无论高等植物（如苔藓、蕨类和种子植物）或低等植物（菌类、藻类等）都能做浸制标本。2.2液浸标本的特点：液浸标本的优点是防腐好，能基本保存原来形态，具有真实感、立体感；缺点是不易保色，且需要容器、药剂等设备条件。2.3制作液浸标本的目的和意义：一些植物的花、果、块根、鳞茎、球茎、小型水生植物等，不宜制作干制标本的，如某些植物如兰科和肉质植物压制出来的标本质量很差，在这种情况下，通常将材料保存在酒精类保存液中，如哥本哈根混合液。非肉质植物的代表性花和柔软的果保存在酒精中也很有用，例如菊科的花序在压制时变形而成扇形，且总苞的排列会丢失，蝶形花科的花冠裂片精确位置变得模糊。由于保存在酒精里的标本保留其活着的外形，植物学绘图人员在可能时应该用液浸材料进行工作。用液浸材料（特别时较肉质的器官）进行度量通常比用可能已发生皱褶的材料度量更精确。液浸标本作为教学、陈列与科研标本的一种类型，是不可或缺的。3.液浸标本的采集3.1固定液和保存液在保存液和固定液中化合的许多物质对健康有害。酒精易蒸发、易燃，福尔马林(甲醛溶液)有毒且可能致癌,如可能应避免使用。有些国家对危险化学品的使用有法律条文规定。(如英国的COSHH条例)。 在实验室条件下,使用含甲醇的酒精、氯仿和福尔马林等药品必须在通风厨中进行操作,并须穿防护衣(至少应有眼罩和外科手套)。在野外,应用手套和护目镜,并避免吸入挥发性气体。可以买一些管形瓶装福尔马林,这样的瓶便于将福尔马林滴入酒精混合液中,然后间接打开。重要的是记住大多数航空公司不允许携带浓度高于70%的酒精,有时少量的酒精可能允许放在座舱中。为满足一些国家因宗教原因而禁止饮用酒精的法律要求,可能有必要使酒精变性而不能喝。 化学固定液和保存液溶液（以及互用名） 分子式和/或配方 性质特征 附注工业用甲基化酒精 CH3CH2OH(乙醇) 70%以上浓度易燃， 代用品: 乙醇、异丙 (IMS),即变性酒精 +CH2OH(甲醇) 有毒,易挥发 醇、杜松子酒、威士 士忌酒、伏特加酒,朗贷架寿命不明确； 姆酒和其它烈性酒置于密封瓶中。 AA（冰醋酸乙醇液） 1:18的冰醋酸 易燃；易挥发； 一般比FAA更受欢迎，和70%乙醇 有毒。 因为不含对健康有害的福尔马林。固定后2-3天转入70%酒精中保存。FAA 1:1:18的40%甲醛、 具腐蚀性、易 代用品:FPA。(福尔马林 冰醋酸和70%乙醇 燃、易挥发、醋酸-酒精) 混合液 有毒； 在FAA中固定2-3天，或大量粗大侧材料到7货架寿命无限。 天后，可转入到70%酒精贮存在带有塑 中保存。料瓶盖或瓶塞的瓶子里。 FPA 1:1:18的40%甲 如 FAA。 代用品:FAA。(福尔马林 醛、冰丙酸和丙酸-酒精) 70%酒精的混合 对材料的硬化 传统的固定液用于组织物。 轻于FAA。 学(组织结构)而不用于细胞学(细胞结构)；冰乙酸为实验室化学品,可能比醋酸难得到且更贵些。冰醋酸 CH3COOH 腐蚀性; 有毒。 用于AA、FAA、卡诺固定(冰乙酸) 液和6:3:1混合液的配方货架寿命无限。 中。置于玻璃或塑料瓶中,加塑料盖或塞子; -16时结冰。卡诺固定液 3:1的纯度酒精 需用时才混合， 代用品:细胞学固定(96%)和冰醋酸 长期贮存置于冰箱 用6:3：1混合液；之混合液 中,但材料可在室 在固定24-48小时后,温下可保存2-3周 可换以70%乙醇固定。6:3:1混合液 6:3:1的氯仿、 在固定前才将冰 代用品：卡诺伊固定液。95乙醇和冰 醋酸加入。醋酸混合液 固定2448小时后换上易挥发、易燃。 70乙醇。Kew混合液 10:1:1:8的工业 有毒、易挥发 代用品:FAA，FPA或用甲基化酒精、 50-70%酒精也可以使用,福尔马林、丙三 但不同时固定材料醇和水的混合液哥本哈根 13:5:0.5的工业 易挥发。 保存液，丙三醇有助于混合液 用甲醛酒精、甘 保持材料柔软。油（丙三醇）和水的混合液。3.2.器材和方法3.2.1器材1）防漏塑料瓶在赴野外考察前应先装满水,拧紧盖子后再挤压以检验是否漏水。必要时带上一些密封剂(如石蜡)。也有必要带上一系列不同大小的瓶子,包括广口瓶和还有小玻璃指形管用于花芽等。2）大容量的酒精瓶的其它化学试剂。3）预先打好孔的小塑料袋或平纹袋,用于包裹单个标本。4）棉线或亚麻线,或细绳用于捆紧包好的塑料袋或平纹布袋。5）标签,铅笔或防酒精墨水笔6）剪刀、枝剪和小刀用于剪切材料。7）护目镜和外科手套(若使用福尔马林,这些东西很重要)。8）箱子和包装材料。3.2.2方法用于形态研究的标本最好在采集时即已固定,固定液的作用在于快速杀死组织并减少变形。良好固定液是采集新鲜花朵，如兰花所必不可少。理想的固定液是Kew混合液,即10:1:1的工业用甲基化酒精、福尔马林、甘油和水的混合液。在没有良好固定液时，可用5070的酒精（乙醇或工业用甲醛化酒精）代替，但其效果不如Kew混合液。材料的永久保存应转入哥本哈根混合液中。用于解剖学和细胞学研究的标本,重要的是在转入保存液之前用上述所推荐的固定液进行适当、充分的固定。 在野外,就较健壮的材料而言,可通过使用预先略打过孔的袋子或用平纹布包裹的办法来减轻液体的重量。将这些材料和带有保护的小瓶子及试管置于一广口瓶中,在瓶中装少量的保存液,在方便时将其装满。较大的果实可置于密封的聚乙烯袋中,加足够的保存液以保持完全湿润。所以标本都应将带有采集号的标签。如果在野外的时间很有限，可先将样品和植株的其余部分放好,到宿营地时再检查其内容物及容器,并编好号。尽量不要用手拿湿材料(特别是花)，如果要分发酒精材料的复份时,最好在野外将材料分好。4.液浸标本的制作4.1 清洗和消毒所用器皿、仪器制作标本用的标本瓶、烧杯、量筒等玻璃器皿，都要用洗衣粉或去污粉刷洗，并用清水反复冲净；对于刚洗涤稍带水的标本瓶还必须用95酒精冲刷内壁与瓶盖，消毒后应立即将瓶盖盖严，以防污染；所用的玻璃棒、解剖器等，应用70酒精擦洗消毒。所有这些器皿和仪器在制作标本过程中，都必须保持清洁，不可污染。4.2 固定标本颜色首先，根据标本的颜色选择适宜的固定液配方，并根据需要按照配方计算用量，用蒸馏水配制固定液，备用。清洗、消毒标本，是整个浸制过程的关键。做法是：将采来的标本除去杂质、枯枝残叶并修整。随后用清水将标本洗净，必要时可以毛笔轻刷。但不要损伤标本，以免影响原有特征。然后用7075酒精将标本消毒，根据标本情况可用酒精冲（擦、刷）洗一遍。注意一定将标本的整个表面都消毒，迅速将消毒好的标本放入适当的消过毒的标本瓶中，然后把已经配好的固定液沿瓶壁缓缓倒入标本瓶中，一定要淹没标本。为防止标本漂起，可用消毒的玻璃条将标本压住或捆住，保证标本没入固定液中。固定液和保存液的选择和配制目前，保色溶液的配方很多，各种书刊均有介绍。以下几种保色溶液的保色效果尚好，特做介绍。1) 绿色植株和果实的浸制以5硫酸铜溶液为固定液，将绿色植株或果实浸泡1020天，使绿色变黄再转绿，稳定后，取出用蒸馏水冲洗干净，用3亚硫酸保存液长期浸制保存。2) 黄绿色果实的浸制固定液是20酒精，保存液是23亚硫酸加2甘油的混合液。先用20酒精将黄绿色果实浸泡45天，果实表面出现斑点后，再加15亚硫酸浸泡1天。然后取出用蒸馏水洗净，再浸入20酒精中硬化、漂白，直到斑点消失后，再浸入23亚硫酸加2甘油的混合液中长期保存。3) 黄色花序和黄色（橙色）果实的浸制例如，柑桔、柿子、枇杷、胡萝卜、梨等，可用34的亚硫酸加少许甘油配成固定保存液，直接浸泡，长期保存。4) 红（黄）绿交错的植株或果实的浸制以5硫酸铜溶液为固定液，将标本浸泡其中，直至红色褐色，绿色黄色绿色时，洗去硫酸铜后，浸入12亚硫酸保存液中，长期保存。5) 紫色荸荠可以用2福尔马林与1亚硫酸混合液直接固定保存。6) 紫色茄子可以用6福尔马林、11食盐水、0.3明矾制成混合液，直接固定保存。7) 紫黑色葡萄可以用福尔马林20毫升、饱和食盐水（约1517）30毫升、蒸馏水175毫升，配成混合液，直接固定保存。8) 白绿交错的花枝、果枝，例如带有绿色苞叶的菜花，可用5硫酸铜溶液固定后，用23亚硫酸漂白一天、再浸入12亚硫酸溶液中长期保存。9) 红色浆果或其果枝如番茄、西瓜、红辣椒等，可用5硫酸铜溶液固定一周后，洗去硫酸铜，用3亚硫酸、0.2硼酸、（0.5福尔马林）混合液保存4.3 整形、保存按配方的要求固定颜色后，要将标本进行整形，使标本能真实的反映出植物的特征，柔软的植物可事先用线捆在玻璃片上，再放入标本瓶中。然后将保存液沿瓶壁缓缓倒入标本瓶，一定不要改变标本的原来状态。4.4 贴标签第一份标签用防酒精的永久墨水（或用打字机）记录学名、采集地、采集人、采集号和采集日期，然后将标签放入瓶内；第二份标签可贴在瓶外，并涂上清漆加以保护，亦可贴在瓶颈上。4.5 封口刚制成的浸制标本，由于植物体内可能有色素或杂质析出，而使保存液混浊。所以，715天后要更换保存液，待颜色稳定后再封口。常用的封口方法有以下几种：石蜡法：将瓶口擦净、瓶盖盖严，用碎石蜡填满缝隙，用烧热的小刀，将石蜡熔化、涂匀，或把石蜡切碎、放入烧杯中隔水加热，熔化成液态，趁热用毛笔蘸取涂在瓶口和瓶盖间的缝隙处即可。但石蜡固化后较脆易脱落。蜂蜡、石蜡、松香混合法：将石蜡（1份）、蜂蜡（4份）、松香（1份）混合（也可不用松香），隔水加热熔化，趁热用毛笔蘸取涂在瓶口和瓶盖间的缝隙处。此混合物固化后，软硬适度，不易脱落透明胶带纸法：这种方法常用于方形标本瓶的封口。即用透明胶带纸将玻璃板与瓶口之间的缝隙封严、粘牢。乳胶法：用毛笔蘸取乳胶涂在瓶口和瓶盖间的缝隙处。但要注意，所用胶液不可过稀，以免乳胶流入瓶中，污染保存液。玻璃胶法（室温硫化硅铜密封剂）：此胶的特点是粘接能力强，气密性好，耐受温度范围大（-65260），而且开盖容易，用针或刀片沿瓶盖切割即可打开瓶。有实验表面，此胶在室外放置十年不老化。因此作为长期封瓶剂效果很好。5.标本室内液浸标本的管理5.1保存液标本在贮存在保存液前，必须用足够的合适的固定液固定，这样可最大程度的减少组织变形。固定后材料再转移到含甘油的防止材料变脆的标本保存液中。哥本哈根混合液（70酒精（乙醇或工业用甲基化酒精（IMS），2829水和12甘油）在Kew园用过一个时期，发现它不如含福尔马林Kew混合液领人满意，尤其是对兰科植物。Kew园现在用Kew混合液作保存液，但在检查前将材料转移到哥本哈根混合液中（见下文“液浸材料的研究”）。由于酒精是高度易燃品，使用需特别小心。如可能必须使用通风厨，否则必须在通风良好的地方使用以防吸入其烟雾。有些类群的植物需要特别的处理，而一些器官由于本身的性质也要求细心对待，就如以下这些标本：1) 肉质或多汁植物。应将其纵切或横切，有时需将其内部的组织挖出。要考虑是否将一半的材料浸泡在保存液中保存。用固定液（如乙醇、汽油或壳牌无味载体（Shell Odourless Carrier）将其杀死或置于沸水中几分钟，或用金属波状板（如铝板）速干。2) 花器易损伤植物。许多短命花易液化、破碎，应尽快采集，并立即压制或置于乙醇中部分有花植物科的名单:马兜铃科（Aristolochiaceae）将花泡在酒精中，有些种类是茎花植物。萝藦科（Asclepiadaceae）将花泡在酒精中，还要挖出块根蛇菰科（Balanophoraceae）将整个植株置于酒精中，要注意有的是雌雄异株。凤仙花科（Balsaminaceae）花应泡在酒精中。秋海棠科（Begoniaceae）泡在酒精中。木棉科（Bombaceae）泡在酒精中。水玉簪科（Burmanniaceae）整株置于酒精中，尽可能采集地下部分。仙人掌科（Cactaceae）为了完整的保存其结构，花、果和整个茎（仅指矮小植株）最好均置于酒精中。鸭跖草科（Commelinaceae）花泡在酒精中。菊科（Compositae）花保存在酒精中。葫芦科(Cucurbitaceae)花浸于酒精中。水鳖科(Hydrocharitaceae)花序浸于酒精中。浮萍科(Lemnaceae)漂浮在纸上和置于酒精中保存桑科(Moraceae)将部分花序置于酒精中。金莲木科(Ochnaceae)将部分果实置于酒精中。兰科(Orchidaceae)花浸于酒精西番莲科(Passifloraceae)花和果实浸入酒精马齿苋科(Portulacaceae)部分花浸于酒精中玄参科(Scrophulariaceae)部分花浸于酒精中姜科(Zingiberaceae)花序浸于酒精中。5.2存放及排列如果可能，在存放液浸标本的旁边必须设立一独立的房间。理想地该房间应有空调（至少应通风良好）。为了减少蒸发，室温要低，推荐温度为12。在室内安装监测大气蒸发（乙醇和甲醛）程度的仪器。为了安全起见，在加固定液和保存液时，必须安装能将液体泵到通风厨扩散管道的设备。如无液浸材料房，则可为了方便起见将液浸标本放在靠近标本馆的柜里。注意防火。液浸材料最好保存在玻璃瓶中。玻璃瓶要有许多不同的规格，例如从30到300毫升，并且应是广口瓶。有磨口塞的瓶更好。磨口玻璃的表面必须轻轻的涂上凡士林以防粘合，并加以密封。一种带塑料聚乙烯盖的瓶亦可使用，但盖不能永久使用。由于与保存液接触会腐蚀，应避免使用金属盖。瓶子最好是按分配给每种规格瓶子的一组连续号码顺序排列，同种规格的瓶子最好放在一起。新标本则在适当规格的瓶子中给予下一个可用号码，而不要进行系统排列。但是，分开象兰科这类有大量液浸标本的科也有好处。瓶子可存放在金属厨的架上，如瓶子不太大亦可存放在内宽约为22厘米抽屉的金属贮藏柜中，顶部的抽屉应低于眼高。5.3 记录和管理5.3.1 所有的液浸材料必须作交互索引，最好是包括瓶号和相应的腊叶标本号。如果标本仅是“只有液浸材料”，则放一张有数据的空台纸在标本馆作交互索引。5.3.2 用防酒精的永久墨水（或用打字机）在标签上作记录：1）学名（名称作者可写可不写）2）来源（或栽培）的国家和地点3）采集人和采集号4）采集日期5）完整的颜色记录和其他描述数据6）瓶号5.3.3 然后将标签放入瓶内；第二份标签可贴在瓶外，并涂上清漆加以保护，亦可贴在瓶颈上。5.3.4 在每个瓶的盖上写上瓶号。可用在投影胶片上写字的笔书写，但必须在号码上涂上清漆加以保护，或者可用细毛笔沾油性油漆（用作样品的小听装最好）书写。5.3.5 将以上资料复制到索引卡上并归档，或输入计算机数据库管理。5.3.6 将瓶放到适当的位置。5.4 液浸材料的研究 管理