DNA复制与转录、翻译、PCR的区别.doc

DNA复制（细胞内复制）转 录翻 译PCR技术（体外DNA复制技术）概念DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程，复制的结果是一条双链变成两条一样的双链（如果复制过程正常的话），每条双链都与原来的双链一样DNA分子首先解开双链以DNA的一条链为模板按照碱基互补配对原则合成RNA的过程以mRNA为模板，以tRNA为运载工具合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程K|S|5UPCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。场所细胞核、线粒体、叶绿体细胞核、线粒体、叶绿体K|S|5U细胞质（核糖体）K|S|5U体外原料4种游离脱氧核苷酸4种游离核糖核苷酸K|S|5U20种游离氨基酸K|S|5U4种游离脱氧核苷酸模板DNA分子中的两条链DNA中的一条链K|S|5UmRNA K|S|5U目的基因（或目的基因的两条链）酶解旋酶、DNA聚合酶等(DNA连接酶)K|S|5U（解旋酶、RNA聚合酶等不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等K|S|5U耐热DNA聚合酶（Taq酶）能量ATPATPATP不需要ATP，能量来自外界加热过程1、解旋：在解旋酶作用下，利用ATP释放的能量解开双螺旋；2、在DNA聚合酶的作用下，按照碱基互补配对原则，把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上，并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接；3、沿着模板链不断延伸，最终形成两个一模一样的DNA分子。1、解旋：在解旋酶作用下，利用ATP释放的能量解开双螺旋；2、以解开的一条DNA链为模板，按碱基互补配对原则，游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对，3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成RNA（mRNA，tRNA，rRNA）mRNA从核孔进入细胞质，与核糖体结合，从起始密码子（AUG）开始翻译。tRNA一端携带氨基酸进入核糖体另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对，两氨基酸间形成肽键。核糖体继续沿mRNA 移动，每次移动一个密码子，至终止密码结束，肽链形成1、变性：即加热至高温使得目的基因的双链打开（解旋，但不需要解旋酶）；2、退火 (复性)：降温使得解开的两条链分别与引物结合；3、延伸：在Taq酶的作用下，按碱基互补配对原则，脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复上述三步，就能获得大量的目的基因。模板去向复制后，模板链与新形成的子链形成双螺旋结构转录后，模板链与非模板链重新形成双螺旋结构分解成核糖核苷酸扩增后，模板链与新合成的子链形成具有双螺旋结构的目的基因特点1、边解旋边复制；2、半保留复制边解旋边转录一条mRNA可与多个核糖体结合翻译成多条相同的多肽链1、半保留复制；2、快速大量复制产物形成两个完整的DNA分子三种单链RNA蛋白质(多肽链)短时间内形成大量的目的基因DNA复制, 转录,翻译以及PCR技术比较二、在基因过程的各种检测和鉴定：1、标记基因：为了检测目的基因（目的基因表达载体）是否导入受体细胞； 2、用DNA分子杂交法：检测目的基因是否插到染色体DNA上（工具：基因探针）3、用DNA分子杂交法：检测目的基