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文档简介
2 0 0 8 国际生物学奥赛实验考试试题 续 吴光耀程红蒋志刚刘剑秋 第三实验室微生物及生物工程实验 在微生物及生物工程的实验室中 你将回答两个试题 试题1 微生物的鉴定 试题2 表达一定基因的微生物生长状态的测定 这个实验室考试6 o 分钟 最大得分是6 4 分 你必须将 你的结果和答案写在答案纸上 在考试完成后老师将收回 答案纸 在考试卷上不必写任何答案 不能从实验室带走任何实验结果 在进行实验反应时 要小心 不要将试剂和溶液弄到你的皮肤和衣服上 祝你好运 试题1 微生物的鉴定 材料和设备 1 细菌菌株 1 有固体培养基的培养皿 平板g c o 1 平板蛋白酶一 1 平板淀粉酶 1 2 有固体培养基的试管 用作o f 试验 3 有肉汤的试管 用作h s 试验和n r 试验 2 将微生物从固体培养基上转移到载玻片上的木制牙签 3 载玻片 4 吸管 5 3 k o h 溶液 6 3 h o 溶液 7 1 二甲基对苯二胺溶液 d mp a 溶液 8 鲁戈氏染色液 9 1 g r i e s s 溶液 微生物的鉴定是基于一般的生物学性质的研究 主要基于 形态 生理和生物化学上的鉴定 你必须鉴定5 种细菌菌株 这 5 种由l 5 号来标记 对于鉴定 你必须用5 种生物化学试验来完 成 即1 1 l 3 1 4 1 6 和1 8 也将其余的有用试验的结果给你 即试验1 2 1 5 和1 7 一些试验用于你必须回答的问题 请在 你的答案纸上用符号在细菌鉴定表上填 上你的结果 用下面符 号 代表阳性反应 代表没有反应 样表给在下面 注意 在格兰氏反应 一栏中 你必须填上格兰氏阳性 1 02 毕命 廿界 菌 或格兰氏阴性菌 在o f 试验栏上填上 f 代表 发酵代谢菌 或 0 代表氧化代谢菌 表中所有的栏目都要填 卜 在答案纸中表的最后的空格写出 你鉴定的细菌 用适当的符号填在表的中鉴定结果栏中 请在实验反应时不要将试剂和溶液弄到你的皮肤和衣服上 请将用过的滴管 牙签 载玻片 滤纸等放在你实验台上的收集 器中 试验1 1格兰氏反应 进行这个实验时你需要 1 1 5 号细菌菌株 在g c o 板上 2 k o h 溶液 3 k o h 3 5 个载玻片 4 木制矛签 注意 你需要用 g c o 培养皿进行1 3 和l 4 试验 请将试验依 1 1 1 3 1 4 的次序进行试验 方法 用滴瓶将1 小滴3 k o h 溶液放到载玻片上 用牙签将一株 细菌转到载片的k o h 液滴上 直径在3 4 m m 尽量不将琼脂转移 过去 将细菌用k o h 溶液混合 如果细菌粘 贴在矛签上不易除 去它 这菌株就是格兰氏阴性菌 否则是阳性菌 如果结果不明 显 你可重复实验 在用其他的菌株试验时 每次都用新的牙签 将结果填在答 案纸的细菌鉴定表的适当栏目中 用 代表格兰氏阳性菌 用 一 代表格兰氏阴性菌 试验1 2 o f 试验 o f 试验是用于测定细菌用葡萄糖进行有氧 氧化代谢 和无氧 发酵代谢 代谢状况的 用你的菌株测定利用葡萄糖进行有氧和无氧代谢的可能性 每个菌株在接种到含有所需的无机盐 葡萄糖和p h 指示剂琼脂 培养基的试管中 指示剂 有玫瑰醇的水 兰色 在中性p h 是粉红 色 在酸性p h 是兰色 在碱性p h 是红色 引起无氧的条件的试 管 标记上l a 5 a 在接种后立刻用石蜡油复盖 而l b 5 b 试管不 用石蜡油复盖 试管在恒温下保温2 4 小时 每一种菌株看试管中的颜色变化 将试验结果写在答案 纸细菌鉴定表的o f 试验的栏目中 用 f 表示发酵代谢 用 0 表示氧化代谢 维普资讯 试验1 3过氧化氧试 进行这个试验需要 1 程g c o 板上的1 号 5 号细菌菌株 2 过氧化氢溶液 3 h o 3 5 个载玻片 4 签 5 滴管 方法 用1 个滴管放一滴h o 溶液到载玻片上 用牙签将g c 0 板上 的一种菌株加到液滴上 不要将琼脂加上去 菌与h o 溶液混 合 记录结果 用其他菌株重复操作 将结果写在答案纸的细菌 鉴定表相应的栏目中 问题1 3 1 过氧化氢催化哪种 哪些 反应 a 3 h o f adh 一 3 h 0 0 h f ad b 2 h o 一 2 h o o c h o 一 2 ho d h 0 一 2 ho h e 2 h 0 nadh h 一 2 h 0 nad 将你答案的编码写在1 3 1 的线上 l 3 1 试验1 4细胞色素 化酶 畎 进行这个实验你需要 1 g c o 培养皿一e 有1 号 5 号菌株的菌落 2 1 d mp a 溶液 方法 在d mp a 的滴瓶中取各1 滴d mp a 到每个菌落上 3 0 6 0 秒后 有氧化酶的菌株菌落成暗红色 粉红色 看每 一 菌株的菌落颜 色 并将结果填在答案纸的细菌鉴定表的适当栏啊中 问题1 4 1 叙述下面哪种是有细胞色素氧化酶的细菌 a 在呼吸链中能用0 作为最终电子受体 b 所有菌株都能进行无氧呼吸 c 所有菌株都严格的是有氧的 e 所有菌株都是兼性尢氧的 f 在一些菌株中细胞色素氧化酶用作化能合成的一部分 将你答案的编码写征1 4 1 的线 1 4 1 试验i 5蛋 水解活性 畎 对于蛋白水解活性 你必须分析含有酪蛋臼培养基的培养 n i l 培养皿接种有1 5 号的菌株 这个板标记有蛋白酶 在答 案纸的表 j 填上结果 畎验1 6淀粉酶 畎 5 径标记淀粉酶的板 含有0 2 淀粉的阎体培养基 并接种有 1 号 5 号菌株 板的表面覆盖有鲁戈氏溶液 并j f j 细菌测定淀粉 水解活性 将反应结果填在答案纸的细菌鉴定表的适当栏目中 试验1 7 h s 产生试验 这里你必须分析以前制备的5 个试管 在试管中含有肉汤并 接种有试验菌株 以前接种的 试管也含有一片用乙酸铅溶液 饱和的白色指示试纸 在答案纸表上填上结果 往答案纸上写上以下两个问题答案的编号 问题1 7 1 生长在肉汤培养基上的细菌产生h s 是从下述哪种 生的 a r n a f 甘氯酸 b d n a g 硫胺素 c 精氯酸 h 生物素 d 蛋氯酸 1 氯基乙磺酸 e 丝氯酸 j 半胱氯酸 将你的答案编码写征1 7 1 的线上 1 7 1 问题1 7 2 哪种反应与指示纸的颜色一致 a 2 c h 3 c o o h h s c h 3 c o s 2 h 2 o b pb 2 s 0 p b s c c h c o o p b h s 2 c h c o o h p b s d 2 ch3 cooh h2 s chs cooh 2 h2 e 2 ch3 cooh p b 2 h2 s 2 c h6 p b s o4 s 将你的答案编号写在答案纸上的1 7 2 线上 1 7 2 试验1 8 6 i i 艘还原酶 吠验 n r i t 对于这个反应你需要 1 标有n r 的1 号 5 号菌株悬浮液的试管 2 1 g r i e s s 试剂 3 滴管 加1 ml 1 g r i e s s 试剂到细菌悬浮液中 有硝酸还原酶活性的 菌株在1 分钟之内呈现红色 将结果填征答案纸的表中 问题1 8 1 存住硝酸还原酶许可 a 以硝酸作为电子受体在化能合成作用的电子传递链中 b 在呼吸作用电子传递链中硝酸作为电子供体 c 在化能合成的电子传递链中硝酸作为电f 供体 d 往呼吸作用的电子传递链中硝酸作为电子受体 维普资讯 e 丹 哑硝酸作为氮源 将你的答案用编码 化答案纸的1 8 1 线 1 8 1 用你的结果和菌株 定炭的结果来确定你实验细菌的种 鉴定细菌 附 菌株鉴定表 试题2 测定 种表达菜荩 的培养基的生长 状态 略 答案纸 略 1 o4 生命世界 第四实验室遗传学实验 证遗传学实验奄 你有如 两个试题 试题1 荣豆种皮颜色遗传方式的遗传分析 试题2 鉴定酵母 s a c c h a r o m y c e s c e r e v is ia e q t r p 突变 实验时间6 0 分钟 最高得分6 1 你必须往答卷上写下 你的结果 答案 等实验结束时 一 位临考员会来收答案 卷 在试卷上不需要写任何 人 j 容 不能从实验室带走任何 峡验结果 祝你好运 试题1 荣甄种皮颜色遗传办式的遗传分析 完成本题的时间足2 5 分钟 材料与设备 1 亲代种子 p 样品n o l 2 亲代种子 p 样品n o 2 3 杂交种子 f 样品n o 3 4 分析用品系种子 l a 样品n o 4 5 f a 代种t 样品n o 5 6 盛种子的盘子2 个 7 白纸l 张 菜豆种皮颜色由一系列基闪控制 这些基因分别控制色素的 合成 种皮颜色的分布 以及增色 淡化或者以某种方式改变颜 色的修饰基因 在预实验中 两种种子皮颜色不同菜豆 p 和p 的杂交育 种实验 用杂交子1 代的种子进行栽培实验 长成的杂合个体 f 得f 表型种 f 一 阶段实验用 一代植株f 分析品系l a 植株杂交 长成 的杂合个体 f a 产生f a 表犁种子 从每 一 株f a 值株t取一颗种 用于下 阶段实验 杂 交 图 p l 样品 n o 1 样品 n o j p 2 样品 n o 2 x l a 土 样 品 n0 4 f a 样品 n o 5 x t f 维普资讯 f 1f 荷 r t r r i i r n 0i f p f 佯 n o j f f n 0 j 析川 i 蕞 一 f d 4 h化刊 m n 0 木掸 2 的 刮 似 a i i b 0 撺a辑j i i 0 包 戍 堪j 脱乜 a a 性 小 也 0 坫 此惟饥培 膨ii iiii in乜1 0 崖 f b 性聃 救l 耻a h 恬拍 啦啊 i i 1 脱 a r嘶叫 并忡 i 舟i 1 1 樊种f 班撕乜 e 美1 i 讣 r 世 膻曲 i 世代 1 n o 2 n0 3 1 廿忻 黛半拌 i 一 f i f q 升 眨嘲 巴进件 砷旧苫 案n荐拈纸 l 地凡j i 确莽襄问代哪 泉水址虬告r b 1 泉水是船 乎 c 采 p址 舟j 采扛p 址 n 采水p址地舟 米 p址 智 i 必i 2 硼 蒙旺 l t 世船也的遣f 描受竹桁f a 盘 株 l l l p ll 剃 r 怂 盥吐川f 讯株 0 i m 帆悻泉龟i t i i i f 2i 将n 0 5 讪种 r 4 慷种 r 小心 r 白蚯 l j m j 种虚删 确 e 采 坩链 f u 利 i 噩 阱小 的鞋一 竹类 用矗i 船代 咖定i 的 矗 坦 荐卷 f 的 i匾 完成 刮川心 m宅 代佯 和p 址i 1 逢 祀对 咎他堆阿 fil 址汕 i 2 2 硝 l 定能 t r 幢 包的l 体打武 川 1 j 坫l k l 的 救廊 墒 杠 i j l l 2 千f i f 眦h靠忻 幕剃 i l a 拈 m宅靶t l 1 所 宠附i b 价箍 越舟睡 苣 所晰 的龌旺的 q 山基 没冉 利 i r 雎 化 r 矗 也体 i i 2 1 川螬i i 确定艟 代 i i p 挂 址n交最 辞时 婶化堆j d 鼎 5 址 纯 的 译造 j 逝 必姐甜析f 的种j 黼色 1 i 州弗n n l i n i r j i 蠢川 n 化m脚止采代f代n 0 应 韩 1 包矗 并巍批n 挝巾 一 i j i 蛆总数 川 确定的f u 甜蚍敞醢 m窿 译 肚 a 和h 的瓦怍娄 谴 作控制汛 帕补 j 瞧麟乜 苍茜j 顷 正确 替蜒 代 a啦鞴十 译忙堆 f 彳 j b 完 c 鬃 1 敏 似砖 f 电宜 川扎 u d e儿艟悱 f 最 尴i 3 确定靳水 p i p i f a 代什 计 卅t l a l l 蛳 l庄p p r 1 a 的 自 l 能 i q j r j 和 u 代柱 十 l i a w i 代 略 他壤 矗小 j t 一 j i j 出所 究 蛾 蒋柱i 1 i 的 维普资讯 问题1 4 确定研究的a 基 与 b 基因是否连锁 1 4 1 通过种皮颜色确定f a 表型组频率 通过计算每一组中种子 数日回答这个问题 用表1 中的代码填写种子表型 分组总数 1 4 2 通过f a 种皮颜色来确定不同表型分组的比例 将正确答案 的代码填入答卷 a 0 5 0 0 2 5 0 2 5 b 0 5 0 0 1 9 0 3 l c 0 5 6 0 1 6 0 2 8 d 0 4 2 o 1 4 0 4 4 i e 0 4 4 0 1 5 0 4 l l f 0 5 0 0 1 4 0 i3 6 1 4 2 1 4 3 计算在没有连锁的情形下 f a 中表型分组的期望比例 只 有你答对了1 2 2 题 你才能得分 将答案填入答卷的表 白色种子 黄褐色种子 黑色种子 1 4 4 计算在有连锁的情形下 f a 中表型分组的期望比例 只有 你答对了1 2 2 题 你才能得分 将答案填入答卷上的表 1 o 6 生命世界 1 4 5 用x 检验法检验你的发现是 正确 找出实验中非等位基 因的位置 用下式计算 没朽连锁 零假说 情况下的 x 值 坠 式中 e i 表型分组i 的期望频率 当零假说h 成立时 o i 表型分组i 的实际频率 计算只能保留两位小数 将 x 值 填入答卷 保留两位小数 1 4 5 1 4 6 根据下面的x 分布表确定零假说h 成立的最大溉率 将答 案填入答卷 x 分布表 l o o 2 o 1 o 0 4 5 l 3 2 2 7 l 3 8 4 5 o 2 6 6 3 2 o o 2 o 1 o o 2 l o 5 8 1 3 9 2 7 7 4 6 l 5 9 9 7 3 8 9 2 l 3 o 1 l o 3 5 o 5 8 1 2 l 2 3 7 4 1 1 6 2 5 7 8 l 9 3 5 l 1 3 4 4 o 3 o o 7 l 1 o 6 1 9 2 3 3 6 5 i 3 9 7 7 8 9 4 9 l 1 1 4 l 3 2 8 5 o 5 5 1 1 5 1 6l 2 6 7 4 3 5 6 6 3 9 2 4 l 1 0 7 l 2 8 3 l 5 o 9 6 o 8 7 1 6 4 2 2 o 3 4 5 5 3 5 7 8 4 l 0 6 4 l 2 5 9 l 4 4 5 l 6 8 l 7 1 2 4 2 1 7 2 8 3 4 2 5 6 i 3 5 9 0 4 l 2 o 2 l 4 0 7 l 6 o l l 8 4 8 8 1 6 5 2 7 3 3 4 9 5 0 7 7 3 4 l o 2 2 l 3 3 6 l 5 5 l l 7 5 3 2 0 0 9 9 2 o 9 3 3 3 4 1 7 5 9 0 8 3 4 i 1 3 9 1 4 6 8 1 6 9 2 1 9 o 2 2 1 6 7 l o 2 5 6 3 9 4 4 8 7 6 7 4 9 3 4 l 2 5 5 l 5 9 9 l 8 3 l 2 0 4 8 2 3 2 l 1 4 6 a 0 0 1 c 0 o 5 e 0 01 f 0 0 5 1 4 7 利用所得到的x 值确定a i b 基因是否连锁 如果基因 a 和b 连锁的话 计算它们之洲的距离 以c m为单位 将正确答案的代码填入答卷 a 基因a i b 之间完全连锁 它们之间的距离为6 9 4 c m b 基因a 和b 之间完全连锁 它们之间的距离为1 2 3 6 c m c 基因a 1 b 之间完全连锁 它们之间距离为2 7 7 8 c m d 基因a 和b 之问不完全连锁 它们之间距离为6 9 4 c m e 基因a 和b 之间不完全连锁 它们之间距离为l 2 3 6 c m f 基因a 和b 之间不完全连锁 它们之间距离为2 7 7 8 c m g 基因a 和b 之间没有连锁 它们之间距离为6 9 4 c m h 基因a 和b 之间没有连锁 它们之问距离为l 2 3 6 c m 1 基因a 和b 之间没有连锁 它们之间距离为2 7 7 8 c m 1 4 7 维普资讯 试题2 鉴定酵母s a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e q l t r p 突变 完成本题的时间是3 5 分钟 材料与设备 1 十二个盛有培养液的试管 2 一块有l 2 个孔的板 3 一 支盛有e r l i c h 试剂的试管 4 一支盛有吲哚溶液的试管 5 一支盛有邻氯基苯甲酸的试管 6 一支盛有水的试管 7 十三支l m l 移液管 8 一张自纸 9 一 个装用过的移液管的容器 l 0 纸巾 为你提供酵母作为灾验对象 f 图图示了这种酵坶的生活史 周期 这种酵母在其嗽活史心期中有交替的草倍体与二 倍体期 单 倍体融合产生二倍体 一 个二倍体通过减数分裂可以产生四个单 倍体 下面的流程表示酵母中色氯酸合成的途径 圈中给出了合成 过程的 一 蝗中间产物和基凼 底物 邻氨基苯甲酸 吲噪 嚣 色氨酸 t r p 基因的突变导致培养液中中 j 电 物的积累 这个生物合成 过程中的两个中间产物 邻氯基苯甲酸l u g l 哚可以通过培养液加 e r l i c h 试剂产生的颜色反应来确定 2 1用特定的移液管分别r u j 邻氨基苯甲酸 吲噪标准溶液和水的 埘照试管巾加入0 5 m l e r l i c h 试剂 用下表中代表颜色的字母 记录试管中的颜色变化 i 7k 邻氨基苯甲酸 吲噪 y 色 颜色代码 r 红包 n 没有颜色变化 2 2 如果突变型伍丰富的底物中产 什么化合物 征培养液中 积累 征下表i j 用代码填 t r p t r p a r 邻氯基苯甲酸 代码 l 吲哚 0 既无邻氨基苯甲酸又无吲噪 2 3 在二倍体酵母l 发现 了 三 类双突变 分别为t r p x t r p y t r p z t r p x t r p y t r p z t r p x t r p y t r p z 符号 一 表示突 变基闲 符号 表示野生 雇因 所有t r p 基因都位于 不同的染色体 卜 1 表给出了这止 匕 突变型的i 三 种结合方式以及每一种集合方式 产生的全部单倍体后代 请在下表中填人每种结合的后代可能基 因型 t r p x t r p y t r p z i t r p x t r p y t r p z t r p x t r p y t r p z一 t r p x t r p y t r p z t r p x t r p y t r p z t r p x t r p y t r p z 生命世界1 o 7 维普资讯 2 4 这些结合产生的克隆在液体培养基中生长 离心除去酵母细 胞 取上清液作分析鉴定 你现在鉴定这些克隆 请检测1 2 种培养液是否存在邻氨基苯甲酸中间代谢产物 并 用答案检 ll t r p x t r p y 和t r p z 一 突变型 为你提供了1 2 种酵母培养液的上清液 这些试管标上了接 合方式 i
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