《血液检测原理》.ppt

血液检测原理 Sysmex学术应用部曹文静 3 Sysmex 血液分析仪家族 XE 2100 XE 2100D L KX 21N K 4500 pocH 100i XT 1800i XT 2000i 3 partDiff Lowend5 partDiff Mid end5 partDiff High end5 partDiff XE alpha HST XS 800i XE 5000 XN 五分类仪器归总 规格 尺寸 机组 搭载ON 软件控制下的选择方式 选择 OFF 软件控制下的选择方式 无选择 作为参考参数汇报 WB wholeblood PD prediluted BF bodyfluid 灵活地适应顾客的要求 准备分析功能不同的2种型号 XN 10 XN 20 采用设备时 通过软件的变更 可将XN 20设定为2组机型 XN 10设定为4组机型 搭配原则 遵循左高右低 XN2000 3000机型搭配要求 XN9000机型搭配原则 可搭配机型 不可搭配机型 要符合左高右低搭配的原则 同类型配置原则 吸样量所需血液量全血模式低值白细胞模式稀释模式 4体液模式 进样器检测定 1手动测定微量测定 2微量测定 3 微量采血管测定 微量测定 2微量测定 4 微量采血管测定 手动测定微量测定 2微量测定 3 微量采血管测定 88 L88 L88 L88 L70 L70 L88 L88 L88 L 1mL1mL0 3mL160 L0 3mL140 L 稀释后 1mL0 3mL160 L 1进样器测定 试管架自动传送的进样器测定 2微量测定 为了减少最低体积 deadvolume 打开采血管盖进行的手动测定 3微量测定 微量采血管测定 使用微量采血管进行的检测 开盖测定 4稀释模式 将血液7倍稀释后进行测定的模式 规格 吸样量 所需血液量 以XE2100为例 检测原理 通道 参数信息 检测模块 检测原理 检测通道 检测信息 RBC PLT WBC 鞘流原理 DC检测 流式细胞原理 RBC PLT通道 PLT直方图 RBC直方图 WBC散点图 检测参数 PLT RBC WBC Ba通道 HPC HGB HGB通道 比色法 HGB 全血标本 IMI通道 DIFF通道 NRBC通道 RET通道 DIFF散点图 WBCBaso NRBC RETPLT OIRF NRBC散点图 RET散点图 LymphMonoNeut BaEo RET 流式细胞原理 RF DC 检测通道 RBC PLT XN仪器检测通道的改善 RET DIFF IMI WNR PLT F低值血小板 WPC 1 半导体激光 流式细胞 半导体激光提供的细胞信息FSC前向散射光 细胞大小SSC侧向散射光 细胞内容物复杂程度SFL侧向荧光 细胞内核酸含量 主要原理WNRWDFRET PLT OPLT F激光633nm荧光染色聚次甲基噁嗪流式 2 阻抗 射频 主要原理RBC PLT I鞘流阻抗法 11 前鞘流 避免多颗粒同时通过宝石孔 少计数避免颗粒侧流 多计数后鞘流 避免颗粒回流 多计数 血细胞通过 电阻值发生变化 脉冲被检测当血细胞通过检测部小孔时 电阻信号 信号的大小与通过的细胞体积呈正比 电阻变化的次数 细胞数 3 SLS 血红蛋白法 HGB通道 十二烷基磺酸钠 无氰无毒 IGHPC NRBCRETRET HEIRF IPF 幼稚细胞和异常标本的检出 粒系 红系 巨核系 0 7 添加实验 幼稚细胞灵敏度高达 各通道检测原理 XE系列 XN系列 和XE相比较 LYMPH和MONO的散点群更加明确地得以划分 原理 WDF通道 病例未分类样本改善 XE5000 XN2000 报警信息 原始细胞 异淋 有核红 白细胞散点图异常核左移 单核细胞增加 嗜碱细胞增加 幼稚细胞 5分类NRBC0 9 未分类NRBC 报警信息 原始细胞 白细胞散点图异常核左移 单核细胞增加 幼稚细胞存在 WDF通道中 对白细胞进行计数并分类为中性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞以及嗜酸性粒细胞 同时定量检出幼稚粒细胞 IG 以及异型淋巴细胞 HFLC 等的异常细胞 对相关异常参数的复检规则制定更具定量化 1 WDF通道 IG和HFLC的定量参数 检测参数 NEUT LYMPH MONO EO IG 病例 IG增高病例 镜检图片 Sysmex仪器对于异常细胞检出的灵敏度为0 7 WDF通道的要点 散点图基本上和XE系列的DIFF通道无区别 试剂得以改良 溶血剂的作用较XE系列稳定 新的SFLAS算法应用 使得LY和MO间距拉宽 除散点位置外还综合散点重心 形态等 使得得以更加明确地划分 FSC 前向散射光 溶血剂 LysercellWNR染色液 FluorocellWNR WNR散点图 SFL 侧向荧光 BASO WBC NRBC Debris 2 WNR 有核红细胞计数为常规报告参数 New 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞粒细胞 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞等 有核红细胞红细胞 中 弱极弱 中 中极弱 SFL 强 侧向荧光前向散射光 FSC 强 项目 WBC NRBC BASO报警信息PLTClumps NRBCPresent WBCAbnormalScattergram细胞膜通过 溶血 荧光 病例 外周血有核红病例 NRBC升高见于 有效降低推片复检率 WNR通道WBC总数 9 67 109 L WDF通道WBC总数 9 51 109 L 正常情况 两个通道WBC总数相差不大 由于在CBC模式下该通道用于WBC测定 因此可以在全体样本中测得NRBC计数 以及由NRBC数修正过的WBC数据 由于采用荧光染色进行检测 红细胞没有被染色 所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响 仪器评估检测时也未出现溶血不良的例子 删除 RBCLyseResistance 的报警 2 WNR通道要点 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 试剂溶血剂 LysercellWPC染色液 FluorocellWPC SSC 侧向散射光 WBC BlastWBCAbnLymph Blast WPC散点图AbnLymph 报警信息Abnormallymph Blasts Atypicallymph 异常淋巴细胞原始细胞成熟白细胞 溶血 染色 侧向荧光前向散射光侧向散射光 SFL FSC SSC 中 强弱 中中 弱强弱 强 弱弱弱 强 HPC HPC 3 WPC 通过REFLEX设置选择性检测 New 主界面 研究界面 HPC散点图 HPC通道测定时 HPC区域中出现的粒子显示为紫红色 全血模式时显示为红色 HPC 外周血中 可见白细胞数增加 贫血 成熟淋巴细胞增加 93 淋巴细胞的体积大约是红细胞体积的2倍左右 细胞质面积小 嗜碱性弱 核为类圆形 核染色质浓缩 核仁不显眼 另外 在标本上可见大量的破碎细胞核的轮廓 病例 一 B CLL 淋系白血病 外周血中 可见白细胞数增加 贫血 血小板数减少 原始细胞的形态为中型 核质比较低 核为类圆形 或可见切迹 核染色质为较大 且纤细 可观察到明显的核仁 零散地可见有Auer小体 的原始细胞 另外 在核和细胞质中可观察到空泡 病例 二 AML M2 髓系白血病 使用WPC通道进行复检 可降低推片率 3 WPC通道要点 选择性使用 通过reflex对怀疑类报警追加WPC检测在WPC通道 采用荧光染色可以检出类似AbnormalLymph和Blast的异常细胞 试剂无臭味 通过试剂的改良 区别与原先IMI通道 特异性高 在保持高灵敏度前提下 不仅区分髓系还能区分淋系 降低推片率 缩短TAT 异常淋巴细胞 AbnormalLymph 易着色 体积较小 原始细胞 Blast 不易被染色 体积较大 4 原理 RET通道 稀释剂 CELLPACKDFL染色液 FluorocellRET RET散点图 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 项目RET RET He标志RETAbnormalscattergram Fragments RET参考范围 卫生部正在操作 建议实验室也可建立自己的参考范围 网织红细胞检测参数 RET He 网织红细胞血红蛋白含量 LFR 低荧光强度网织红细胞比率 MFR 中荧光强度网织红细胞比率 HFR 高荧光强度网织红细胞比率 IRF 未成熟网织红细胞百分比 RET 网织红细胞计数的绝对值和百分比 网织红检测参数 RET通道小结 1 XN校准品种还有RET参数 具有溯源性 2 IRF IRF是反映红系增生减低比较敏感的指标 IRF对肾性贫血的疗效判断具有重要价值 3 RET HE 缺铁性贫血的鉴别诊断 IDA时 明显减低 肾性贫血 建议EPO 铁剂治疗 同时检测RET HE的变化 稀释剂 CELLPACKDFL染色液 FluorocellPLT PLT F散点图 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 项目PLT IPF标志PLTAbnormalscattergram PLTClumps 5 原理 PLT F通道 SFL PLT O 颗粒 PLT F 线粒体DNA XN 3种检测通道检测PLT PLT I 颗粒大小 DC 低值血小板检测更加准确 一例烧伤患者的XNPLT F散点图 Fragmentated 一例烧伤患者的XEPLT O散点图 ErythrocytErythrocytFragmentated erythrocytes erythrocytesPlateletsPlatelets使用试剂的区别 PLT O PLT F染色试剂的区别 低值血小板 重复性 显微镜见极少量RBC碎片 显微镜见1 RBC碎片 显微镜见极少量RBC碎片 显微镜见少量RBC碎片 PLT F通道检测低值血小板的重复性最佳 以PLT F结果为准 病例 红细胞碎片对血小板计数的干扰 5 PLT F通道要点 在PLT F通道 使用了不同于RET通道的荧光染料噁嗪 而PLT O的荧光染料是聚次甲基 噁嗪 噁嗪对DNA极其敏感 由于选择性染色血小板 故网织红细胞难以染色 另外 也不易受到红细胞碎片的影响 血小板低值样本 5倍计数 提高精密度的同时保证了检测的准确度 XE XT体液模式界面及散点图 BF报告参数 BF研究参数 WDF 主画面 WDF EXT 服务画面 体液BF模式 散点图 WDF散点图 WDF EXT 散点图 WDF散点图 WDF EXT 散点图 XN XE体液功能的变化 46 统一 完整的质控校准体系 完整的