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复习上次课内容1 化脓性细菌包括哪些种类 2 根据葡萄球菌色素和生化反应不同分为哪三种 致病力最强的是 3 葡萄球菌的致病物质 所致疾病是什么 4 根据溶血现象不同将链球菌分为 致病力最强的是 型 群链球菌 5 A群链球菌的致病物质 所致疾病是什么 6 肺炎球菌主要的致病物质 所致疾病主要是什么 7 脑膜炎球菌主要的致病物质是 所致疾病称 8 引起性病的球菌是 9 易引起烧伤后感染的化脓性细菌是 1 第六章第二节肠道感染细菌 2 学习目标 掌握埃希菌属 沙门菌属 志贺菌属的致病物质与所致疾病 掌握粪便标本的采送方法 肥达试验的临床意义 熟悉霍乱弧菌 副溶血性弧菌的致病性 了解大肠埃希菌的生理 病理及在卫生细菌检验中的意义 了解幽门螺杆菌所致疾病 3 前言 肠道感染细菌是指一群在胃肠道中增殖并引起胃肠道症状 或正常定居于肠道但可引起肠外感染的病原菌 均以粪口途径传播 临床最常见的肠道感染细菌主要包括肠杆菌科 螺杆菌属 弧菌属 弯曲菌属细菌等 4 肠杆菌科 是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性杆菌 有的为致病菌 多为肠道内正常菌群 可引起医院感染 条件致病菌临床可查到40种以上 5 包括 埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 摩根菌属 枸橼酸菌属 肠杆菌属 沙雷菌属等 6 肠道杆菌共同特点 形态结构G 小杆菌 钝圆杆菌 无芽孢 多数有鞭毛及菌毛培养特性需氧或兼性厌氧营养要求不高 普通培养基可生长 菌落相似 形成灰白色中等大小S型菌落 肠道选择培养基 7 EMB 伊红 美兰培养基 乳糖 伊红 美兰 8 SS培养基 沙门志贺培养基 乳糖 中性红指示剂 胆盐 煌绿等抑制剂 9 生化反应活跃 常用于鉴别肠道杆菌抵抗力不强 60 30min即可灭活抗原结构复杂菌体 O 抗原鞭毛 H 抗原表面 K Vi 抗原易出现各种变异 10 第一节大肠杆菌 埃希菌属 11 生物学性状 形态染色符合肠杆菌特点 周毛菌 有菌毛培养特性符合肠杆菌特点EMB 紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S S 桃红色生化反应IMViC 抗原O抗原 O1 O173 H抗原 H1 H56 K抗原 K1 K100 血清型表示法 O K H 12 EMB平板上的E coli 13 致病性 致病物质除内毒素 荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外 大肠埃希菌具有独特的毒力因子有 黏附素 具有高度特异性吸附 定植 致病外毒素 耐热 不耐热 14 外毒素 由ETEC产生的肠毒素 1 不耐热肠毒素 LT 分LT I和LT 两型蛋白质对热不稳定 与霍乱肠毒素相似A亚单位 毒素活性成分机制B亚单位 与肠上皮细胞受体 GM1神经节苷脂 结合B单位与受体结合 导致A进入细胞内 激活腺苷酸环化酶 ATPCAMP 小肠液过度分泌 肠腔积液 腹泻 15 2 耐热肠毒素 ST 分STa STb两型 为低分子多肽 对热稳定机制 激活细胞鸟苷酸环化酶 使cGMP 导致腹泻LT和ST同时存在 致病性要强 16 所致疾病 肠道外感染 内源性感染 化脓性感染 定位转移腹膜炎 阑尾炎 创伤感染 手术刀口感染 肺炎 败血症 新生儿脑膜炎等泌尿道感染 病原菌来自病人肠道 上行性 占泌尿道感染首位 女性多见 尿道炎 膀胱炎 肾盂肾炎等 17 肠道感染 胃肠炎 腹泻 外源性感染 肠产毒性大肠埃希菌 ETEC 肠侵袭性大肠埃希菌 EIEC 肠致病性大肠埃希菌 EPEC 肠出血性大肠埃希菌 EHEC O157 肠集聚性大肠埃希菌 EAEC 18 引起腹泻的大肠埃希菌 菌株 作用 部位 疾病与症状 致病机制 ETEC6 8 15 25 27 78 148 159 小肠 旅行者腹泻 婴幼儿腹泻 水样便 恶心 呕吐 腹 痛 低热 LT 和 或 ST 肠毒素 大 量分泌液体和电解质 EIEC28ac 29 112ac124 136 143 大肠 水样便 少量血便 腹痛 发热 质粒介导侵袭和破坏结肠粘 膜上皮细胞 EPEC2 55 86 111 114 119 125 128 142 158 小肠 婴儿腹泻 水样便 恶心 呕吐 发热 粘附和破坏上皮细胞 EHEC157 26 111 大肠 水样便 大量出血 剧烈 腹痛 低热或无 可并发 血小板减少性紫癜 SLT I 或 SLT II 中断蛋白质 合成 EAEC42 44 3 86 小肠 婴儿 持续性 腹泻 呕吐 脱水 低热 集聚性粘附上皮细胞 阻止 液体吸收 19 微生物学检查与防治 肠道外感染标本 涂片 染色 分离培养 鉴定尿路感染时每ml尿含菌 10万 有诊断价值肠道内感染用弱选择性培养基分离培养 生化反应 血清分型 毒素测定 核酸检测卫生细菌学检查每ml饮水中细菌总数 100 每1L水中大肠杆菌 3个 每100ml瓶装汽水 果汁中 大肠杆菌 5个 20 第二节志贺菌 痢疾杆菌 形态染色符合肠杆菌特征 有菌毛 无鞭毛 无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点培养特性肠道鉴别培养基上的无色透明 乳糖不发酵菌落 生物学性状 21 生化反应葡萄糖 乳糖 宋内志贺菌迟缓发酵乳糖 H2S 尿素 动力 抗原分类 根据O抗原分4群 40余型A群 痢疾志贺菌 10 B群 福氏志贺菌 13 C群 鲍氏志贺菌 18 D群 宋氏志贺菌 1 抵抗力比其它肠杆菌弱 尤其对酸敏感 22 23 致病性与免疫性 致病物质侵袭力 菌毛 黏附肠黏膜上皮细胞穿透上皮细胞并扩散 传播内毒素 作用于局部并可吸附入血引起全身症状外毒素 A群 型 产生志贺毒素 ST 1 肠毒素 类似ETEC毒素 霍乱肠毒素作用 水样 2 细胞毒性 对人肝细胞 肠黏膜细胞有毒性 引起变性坏死 3 神经毒性 损伤动物神经系统 麻痹 死亡 24 25 所致疾病 细菌性痢疾传染源 病人 带菌者传播途径 经口致病机制临床类型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力 不牢固 易再感染 26 微生物学检查与防治 微生物学检查分离鉴定 粘液脓血便毒力实验快速诊断 协同凝集试验 免疫荧光防治更有效的疫苗还在研制中 此菌极易出现耐药性 27 第三节沙门菌属 是肠杆菌科中最复杂的菌属 有2000种以上血清型对人类有致病性肠热症 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌食物中毒 鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌败血症 猪霍乱沙门菌最常见 28 生物学性状 形态染色符合肠杆菌特点 多为周毛菌 有菌毛 伤寒杆菌的周身鞭毛 29 培养特性EMB SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落 EMB培养基 上为E coli 下为伤寒杆菌 30 生化反应乳糖 葡萄糖 多数H2S 动力 尿素 抗原结构O抗原 特异性低 稳定 分群 组 H抗原 特异性高 不稳定 分型Vi抗原 毒力抗原 不稳定 可阻止 O 凝集抵抗力不强 31 致病性与免疫性 致病物质侵袭力菌毛 吸附Vi抗原 微荚膜 抗吞噬 内毒素外毒素 个别 鼠伤寒沙门菌 产生 与ETEC肠毒素相似 32 所致疾病 菌毛 穿入淋巴液 胸导管 第二次菌血症 迟发型变态反应肠壁坏死 溃疡 高热 肝脾肿大 玫瑰疹 白细胞 等全身中毒症状 肠热症 伤寒沙门菌等经口 吸附小肠黏膜细胞上 在肠壁 肠系膜淋巴组织中繁殖 致敏 血流 第一次菌血症 肠出血 肠穿孔 33 肠热症临床过程潜伏期2W发病初期 第1W 第一次菌血症 高热 肝脾肿大 皮疹 WBS 等全身中毒症状 此期血液 80 骨髓 90 有大量细菌 发病极期 第2 4W 全身症状持续加重 此期血 骨髓中仍有菌 但粪便 60 尿 20 皮疹液中可查到细菌 由于 型变态反应 并发症发生 血液抗体达到阳性标准 肥达反应恢复期 第四周末 体温下降 症状消失 恢复期带菌1年 粪便仍阳性 血液抗体仍高 34 胃肠炎 食物中毒 潜伏期短 6 24h 起病急 病程短2 4天 发热 恶心 呕吐 腹痛 腹泻败血症 经口感染 经肠道入血 败血症症状明显而肠道症状不明显带菌者 健康带菌者 恢复期带菌者免疫性 肠热症 病后免疫牢固 其它可重复感染 35 微生物学检查与防治 分离培养与鉴定标本采取肠热症 第1 2W 血 骨髓 第2 3W 粪便 尿食物中毒 粪便 呕吐物 可疑食物败血症 血液带菌者 粪便分离鉴定 增菌 血 骨髓 EMB SS 生化反应 血清鉴定 36 血清学诊断 肥达反应 Widal 原理用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H抗原 以及引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝集试验 测定待检血清中有无相应抗体及其效价 TO TH PA PB 方法 试管凝集法 定量 TO 1 80 TH 1 160 PA PB均 1 80才有意义动态观察 双份血清抗体四倍升高有诊断意义 37 临床意义O抗体 IgM H抗体 IgG O H抗体均升高 患伤寒的可能性大O H抗体不升高 患伤寒的可能性小只有H升高 则可能是预防接种过或非特异性回忆反应 只有O升高而H不高 则可能是感染早期或其他沙门菌的交叉反应 38 防治 1 控制消灭传染源 切断传播途径2 特异性预防 注射伤寒 甲乙副伤寒三联菌苗预防 但副作用大 口服活菌疫苗在试用阶段3 抗生素治疗 若停药过早易复发 39 第四节霍乱弧菌 霍乱弧菌属弧菌属 Vibrio 为一大群菌体短小 弯曲成弧 G 单毛菌 运动极活泼 分布广泛 多存在于水中 对人有致病性主要为霍乱弧菌和副溶血弧菌 40 霍乱弧菌的疫源地 霍乱是一种烈性肠道传染病 有3个疫源地印度恒河三角洲 O1群 古典生物型 六次世界性大流行 始于1817年印尼苏拉威西岛 O1群 埃托生物型 第七次世界大流行 始于1961年至今未停止 累及140多个国家孟加拉湾 O129 Beolgal 始于1992年 危害相同WHO规定 疑为霍乱病例 三种同时检测 41 生物学性状 形态染色G 弧菌 单鞭毛 穿梭样动力 鱼群状排列 有菌毛 个别有荚膜 无芽胞 42 培养特性兼性厌氧 氧气充分生长良好营养要求不高 故用pH8 9碱性培养基 耐碱不耐酸 pH7 4 9 6 形成光滑透明湿润的 水滴样 菌落 分离 选择 能在无盐培养基中生长 区别其它弧菌 43 生化反应触酶 氧化酶 硝酸盐还原 靛基质 抗原分型有200多个血清群 其中O1群 O139群可引起霍乱 其余不致病或仅引起胃肠炎等 O1群包括两个血清型 古典生物型和埃托生物型 EL Tor 抵抗力较弱怕干 干燥时易死亡 水环境中可存活两周 水源性传播 水性爆发 怕酸 正常胃酸4min不耐热 100 1 2min对消毒剂抗生素敏感 44 致病性与免疫性 致病物质侵袭力鞭毛与黏液素酶鞭毛运动有利于细菌穿过黏膜表面黏液层黏液素酶液化黏液菌毛 使细菌定植于小肠霍乱肠毒素 最强烈的致泻毒素其致病机制与ETEC的LT相似 但作用强烈得多 45 霍乱肠毒素的作用机制 46 所致疾病 霍乱 甲类法定传染病02 传染源 病人粪便污染的水源或食品传染途径 经口 暴饮暴食者 47 潜伏期 2 3d前驱期 不明显 少数有轻度吐泻 腹胀不适吐泻期 剧烈吐泻 米泔样 每日数十次 持续2 3天 失水12000ml脱水期 严重吐泻引起水电解质紊乱 脱水酸中毒 肾衰 循环衰竭 休克 死亡表现 神志不安 淡漠 霍乱面容 呈脱水貌 眼窝下陷 舟状腹 肌痉挛等恢复期 吐泻停止 紊乱纠正 症状消失 病程平均为3 7天免疫力 病人愈后可获得牢固免疫 48 微生物学检查与防治 烈性传染病 发病率高 流行迅速 死亡率高 早期 快速 准确诊断 尤其首例 对防治蔓延意义重大1 标本 米泔样 便及呕吐物 专人护送 快速送检 指定实验室2 直接涂片镜检悬滴法或暗视野显微镜 观察穿梭样运动3 分离培养鉴定 碱性蛋白胨水4 快速诊断SPA协同凝集试验 49 防治加强国境检疫 加强水源及粪便管理及时检出病人 隔离封锁疫区疫苗接种对症治疗 抗菌治疗 50 第五节副溶血弧菌 嗜盐性弧菌 沿海地区常见 存在于近海海水 海泥 海产品中 1950年首发于日本大阪 主要引起食物中毒一 生物学性状1 G 弧菌 多形性 单鞭毛2 具有耐盐性 与霍乱弧菌的显著差别 在含有3 5 NaCl培养基中生长良好 无盐不长 8 也不长 在海水中可生存47天以上 3 神奈川试验 KP 在高盐培养基中使人或兔红细胞发生溶血 溶血 耐热性溶血毒素与致病性平行 KP KP 51 二 致病性 1 致病机制不甚明确 KP 为致病株 KP 不致病 KP 有耐热性溶血毒素 耐热直接溶血素和耐热相关溶血素 及黏液素及黏液素酶2 引起食物中毒好发夏季 误食未熟海产品等而致 潜伏期短5 72h 24h 急性胃肠炎症状 水样便 病程短 可自愈 个别死亡 3 病后免疫力不牢固 可重复感染 52 第六节幽门螺杆菌 G 菌体弯曲呈螺旋型 S形 海鸥形 有鞭毛 从毛菌 微需氧 营养要求高 生化反应不活跃 但尿素酶丰富 快速脲酶实验强阳性 主要鉴定依据 致病机制不清慢性胃炎胃溃疡胃癌胃黏膜相关B细胞淋巴瘤 本菌检出率很高 80 100 53 第七节空肠弯曲菌 G 菌体弯曲呈S形或螺旋状 常2 3个菌连接排列 单毛 双毛菌 运动活泼 螺旋样运动 特征 微需氧 5 O2
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