马的兴奋剂检测现

马的兴奋剂检测现状,王振山,兴奋剂的定义,19世纪，南非的荷兰定居者们非常熟悉一种提炼自葡萄皮的酒精饮品，祖鲁族武士奔赴战场前都要喝一点以提高战斗力和耐力。在宗教仪式中，这种叫做“dop”的混合物也被当作麻醉剂使用。20世纪和21世纪之交，英语借用了该词，并首次将“doping”（兴奋剂）与赛马时的非法药物联系在了一起。,1889年在一本英语词典中首次出现“Doping”，解释时说是给马服用的一种混有“大烟”的药物。在兴奋剂方面，其实中国早在5000年前就知道使用麻黄来提高运动性能了。,“Dope”，原义为“供赛马使用的一种鸦片麻醉混合剂”。由于运动员为提高成绩而最早服用的药物大多属于兴奋剂药物刺激剂类，所以尽管后来被禁用的其他类型药物并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如-阻断剂），国际上对禁用药物仍习惯沿用兴奋剂的称谓。,马匹运动的形式,（一）速度赛马：平地赛马、轻驾车赛马（二）马术：障碍赛、盛装舞步、三日赛等等。,（ 一）速度赛药物的管制,国际赛马机构联盟（IFHA，the International Federation of Horseracing Authorities）为1961年由法国、英国、爱尔兰、美国等发起的一个组织，自1967年以来每一年都在巴黎举行会议。其正式成立是在1993年，现在大约有60个会员国。其工作的目的：协调各成员国育马和赛马的规则制定和执行，以确保赛马的诚信、公正和公平性。管理赛马的组织，确保马匹、骑师和观众的利益。提供科技和赛马发展的最新资料。,国际赛马机构联盟（IFHA）制定有育马赛马投注的协议。协议的第6条为“禁药和违禁物质”的规则。目的是要管制“使马匹在赛事中得到优势和失去优势的物质”，凡是影响马匹的东西都要管制。以保证赛马的诚信。保证练马师、骑师、参与这项工作的人和马匹的利益（即马的福利）。使每个人都相信自己的利益是受到最公正的保护的。,违禁物质：不论含量多少，只要对马匹有影响。它不是根据实际药理的作用来确定的，这种违禁物质可以是治疗性的药物，也可以是非法的药物 。,什么时候检测药物?,平常、拍卖时、赛事前后等，发现了违禁物质或其代谢物、异构体或者代谢物的异构体，只要检测出来了，不管是多少，就等于发现了违禁药物。另外，只要发现有人给马匹打针，或者找到含有违禁的药物的注射针筒，只要能够证明这一事实，不管在马匹的身体里是否能够检测出该种违禁药物，都可以证明他注射了违禁药物。同理，我们可以拿练马师进行起诉的还有，马用过的绷带、纱布，只要有证明，这种现象和注射药物的结果是一样的。,(二)马术运动药物的管制,马术运动的最高机构为国际马联（FEI），1921年在瑞士的洛桑成立。在马术比赛中，FEI有自己的会籍制度。其原则是每个国家只接纳一个会员，这个会员必须有能力管理奥运比赛的能力，并且一定要接纳FEI的章程，并承诺遵守这个规则，才会被接收为FEI的会员。,药物管制小组:,FEI对禁药的管理是非常严谨的，由药物管制7人小组来管理，主要是提供顾问、意见、提交审查报告。7个人的组成是：5名为兽医，1个是化验师，1个是非专业的人员。任何对马匹造成损害的，都是禁止用的。在欧洲赛马马术的历史悠久，在欧洲有一个药物管制小组，由25名专业兽医人员组成，搜集样本并送到法国中央化验所检测（每年大概分析1500个样本）。,（三）赛马和马术运动的禁用药物 的区别,对于速度赛马：凡是任何时间、任何情况下，能够对哺乳动物的一个或者以上系统有影响的物质，即凡是影响马匹本身自然条件的物质都是禁止的物质。,系统:,这里为什么采用动物的系统，而不具体的罗列药物名称的清单。因为世界上每天都有一些新的药物生产出来，不在药物清单上的药物是不是就不禁止了呢，实际上也是禁止的，因此采用系统比较好。如消化系统、神经系统、内分泌系统、肌肉系统等等。用系统可以堵住所有的药物，这就是好处。这就避免了每天更改禁药清单。制药厂商经常会将药物更改一下就命名出新的药物而生产出来。,药物与物质：,对于运动员使用的是“药物”，而对于马匹使用的是“物质”(substance)。这种物质是包括药物在内的所有物质，主要是对马匹有影响的物质，这些都是不允许的。,区别：,（1）在马术比赛中是可以用一些胃药的，也不用 预先提交报告； （2）母马发情时情绪不稳定，可以使用药物来调 节，但是需要预先申报； 上述两条在速度赛马上是不允许的。,非FEI禁用药物：,抗生素（不包括普鲁卡因青霉素 Procaine Penicillin）抗原虫药（原虫病是由单细胞原生动物 ，包括抗球虫药、抗锥虫药、抗梨形虫药、抗滴虫药四大类。 ）肠驱虫剂（不包括左旋四咪唑或四咪唑，该药是驱蛔虫，对顽固性支气管哮喘经试用初步证明近期疗效显著。）,非FEI禁用药物：,抗溃疡的药物。驱虫剂;昆虫驱避剂 。维生素、氨基酸和电解质。局部外伤的软膏（不包括可的松类药物、局部麻醉剂、刺激剂和其它禁用药物。）保护和恢复关节治疗的如软骨素等。母马情期调控药物（遵照兽医的意见）,10种物质:,有限度的物质包括来自马匹身体内部的激素（即内源性物质）、来自传统放牧或者饲料中的物质、种植、加工、储藏、运输时产生的化学物质。这种有限度的物质一共有10种，凡是超过限度就属于不正常的了。,(1)砷(Arsenic)：0.3ug/ml尿液.(2)二甲基亚砜（DMSO）：15ug/ml尿液或者1ug/ml血液.(3)雌烷二醇（Estranediol，不包括骟马）：尿液中结合与非结合的5-雌烷-3，17 -二醇对5（10）-雌烯-3 ，17 -二醇的比率小于或等于1.(4)水杨酸（Salicylic acid）：750ug/ml尿液或者6.5ug/ml血浆.,(5)可可碱(Theobromine)：2ug/ml尿液.(6)氢化可的松(Hydrocortisone)：1ug/ml尿液.(7)二氧化碳总量（TCO2）：37毫克分子/每升血浆 (现在为36).(8)3-甲氧酪胺（Methoxytyramine）：4mg/L尿液.(9) 睾酮(Testosterone)： 骟马结合和非结合的睾酮 20ug/L尿液；雌马和母马相应的55ug/L尿液.(10)勃地酮（Boldenone）：结合的和非结合的0.015ug/mL尿液公马（不算骟马）.,在马术比赛规则中，FEI对水杨酸没有限度限制，对DMSO（二甲基亚砜）也没有限度限制。,阳性结果的判定：对于没有限度的药物，无论任何浓度，只要有一点就可以定为阳性。对于有限度的药物，一定要超出那个限制的水平才能定为阳性。对于有限度的药物，目前总共有10种不同的化学物质。测定每种物质必须进行定量，才能确定出来是否是阳性。这10种是世界上共同认同的。,香港对待兴奋剂:,涂抹药物：假如涂抹了某种药物混合物（含有药物），只要能够证明你涂抹了，可能在马的身体里检测不出来，只要证据确凿，不用查到马身体里有药，就可以告你已经违法了并给予处罚。,香港对待兴奋剂,不能带任何药物到马厩，如果在马厩搜查到了你带进药物，不管这匹马用没用，这匹马参加比赛的资格将被取消。在马匹出赛的那天是不能打针的，不管是打维他命，还是打生理盐水，只要打针就是不行的，这是香港的规定。,对待兴奋剂的标准,全世界的赛马对药物检测的规定都有不同，像香港、澳大利亚等多数国家是非常严格的，像北美国家对一些治疗性药物是可以用的，但不要超过限度。,日本:,唯独日本有自己的看法，他们是对赛马赛前有一个集中监控管理期，实行摄像全程监控，这样检测的药物范围就小多了。参赛马匹在赛前10天或15天进入训练中心，进行统一管理。他们列出下列64种药物，这在其他国家是见不到的。,日本:,阿托品，烯丙洛尔，苯异丙胺，溴化异丙托品，乙醇，麻黄碱，羟甲基茶碱，羟丙基茶碱，10氧化樟脑，氧烯洛尔，咖啡因，樟脑液，克伦特罗（瘦肉精），氯丙嗪，氯丙嗪亚砜，可卡因，沙丁胺醇，二羟丙基茶碱，纽白卡因，赛庚啶，双吗啉胺，东莨菪碱，斯坦唑醇，马钱子碱，茶碱，可可碱，四卡因，特布他林(叔丁喘宁).,日本:,氧化樟脑转化物，去甲雄三烯醇酮(群勃龙)，诺龙*，尼可刹米，烟碱，那可丁，巴比妥，巴比妥酸盐，哌苯甲醇，非那西汀，苯基吡唑啉酮衍生物，保泰松，夫咱甲氢龙，氟羟甲基睾丸酮，番木鳖碱，氟芬那酸，普鲁卡因，呋寒米，普萘洛尔(心得安)，抗病毒药丙嗪，匹莫林，苯并二氮卓诱导体，镇痛新，戊四氮，勃地酮，美沙吡林.,日本:,脱氧麻黄碱，甲基麻黄碱，脱氧甲基睾酮类，哌醋甲酯，迈载诺龙，甲氮那明，美托洛尔，甲灭酸，吗啡，利多卡因。含有前款各项所列成分的物质(包括游离物)。,几个案例,雅典奥运会 ：（1）德国团体场地障碍赛马匹(Goldfever 3)被检测出倍他米松(倍氟美松，作用同地塞米松，抗炎作用，治疗风湿、类风湿等病)，因此团体金牌被取消。被罚款1500瑞士法郎和用于检测B样本的750瑞士法郎。,几个案例,（2）爱尔兰个人场地障碍赛金牌被取消：爱尔兰马匹Waterford Crystal，被检测出含有人精神科的药物（2种药物），取消运动员的金牌，这是爱尔兰在此次奥运会上的唯一金牌。罚款5000瑞士法郎，FEI将尿B样本送到英国被偷，为了补救又把当时采集的B血液样本送到美国检测。最后，在纽约B样本被确认的药物为氟奋乃静（Fluphenazine，抗精神病药，低镇静性）和Zuclophentixol（珠氯塞醇，一种安定药），和A样本所检测出的样本一样。,大震撼:,“深刻影响”（DeepImpact）2002年3月25日出生于日本。父亲叫“寂静的星期天”（SundaySilence），“深刻影响”于2005年3岁时获得“日本三冠王”（即皋月赏SatsukiSho，日本德比Yushun，菊花赏KikukaSho）称号，这是自1994年以来获得的第一个三冠王。,大震撼：,2006年到法国参加凯旋门大奖赛，同时来的还有6000多名日本马迷。在此次比赛中，“深刻影响”得了第三名。赛后，被查出药物阳性，Ipratropium（异丙阿托品），是一种平喘药，主要治疗支气管哮喘、慢性支气管炎等。这个药在日本是允许的，在欧洲是禁止的。如果使用必须在赛前5天。,北京奥运会：,辣椒素（Capsaicin），是从辣椒中提取出来的化合物成分，是一种外用药物，它在治疗中的作用是涂抹在体表皮肤上，具有促进血液循环的作用，辣椒素能够促进疼痛和僵硬肌肉的血液循环，具有镇痛和缓解肌肉紧张的作用。辣椒素在人用药和动物用药中都可以见到，在马术比赛中，涂抹在马匹身上，会使马匹产生热辣辣的感觉，直接诱导马体发热，进而转化为热量，可以让马匹在跳跃中感觉到很舒服，既有兴奋效果又具有镇痛作用，从而增强马匹的竞争力。,香港赛马会赛事化验所：,化验所位于沙田马场内，面积约一千七百平方米，拥有总值约六千万港元的先进设备，包括二十五台质谱分析仪器。化验所聘有四十多名员工，其中十名化验师当中，有四名是国际赛事化验师协会（AORC）的院士。据悉，全球总共有约五十名院士。,香港化验所：,化验所内设有二十四小时的闭路电视系统，十六个设置在天花板的闭路电视摄录镜头会以不同的角度摄录自动检测过程，确保储存样本的完整性。每台闭路电视在录影时都会加上时间记录，证明片段未被删减。如要翻查录影带，即使是化验师也要到保安室提取相关影片，保安工作做到一丝不苟。这套保安程序是全球第一个引入的。,澳门赛马会化验室：,澳门赛马会化验室已参加由世界赛事化验师协会（AORC，成立于1947年）於2002年所主办的化验技能测试，并获得一如以往的满分成绩，就此，澳马会获该会颁发证书。每年该协会之会员均被要求测试数个或含有禁药的尿液样本，以肯定其专业资格。澳门马会自1999年已开始参加该项测试。,澳门马会化验室：,为进一步提高澳门赛马的公信力，澳门赛马会与澳门科技大学经过深入协商后，决定将隶属澳门赛马会的赛事化验室捐赠予澳门科技大学基金会，所有化验室设备、设施及经验丰富的技术人员亦全部移交予科技大学基金会。,赛事化验室已於2007年2月1日正式移交，自此赛事化验室将以科技大学基金会名义运作，而马会一切化验工作，包括马匹及骑师的各项测试，均由科技大学基金会赛事化验室按国际认可标准办理。,澳大利亚赛马法医实验室：,澳大利亚总共有4个赛马法医实验室。（悉尼、墨尔本、布里斯班、伯斯）。悉尼化验所：（一）气相质谱联用仪（GC-MS）:Shimadzu 5050 GC-MS:四台。Agilent GC-MS:三台。Finnigan GC-MS:二台。,悉尼化验所：,（二）液相质谱联用仪（LC-MS）Finnigan LC-MS:二台。Agilent LC-MS:一台。（三）自动化样品处理仪（机器人）：Gilson Robot：四台。,（四）其他仪器：Beckman总二氧化碳分析仪：三台。VIVA EMIT免疫自动分析仪：一台。ELISA酶标仪：一台。,标准品药物种类300种，其中碱性药物91种，酸性药物65种，中性药物（LC-MS）26种，激素类药物22种，极性药物（LC-MS）22种，可的松类药物14种。对于骑师，检测的药物有很大不同，更多的是安非他命、鸦片、可卡因等。,样本的来源：赛马、赛犬、骑师。样本的种类：尿和血。年检测数量：2002年共检测样品20331个，其中尿样12545个，血样7786个。全年共发现阳性药物87例。,检测的费用：阴性：140澳元/例阳性：1000澳元/例。,统计结果:,以2004年为例（1）赛马：全世界共测定赛马样品259938个。每场赛事检测马匹2.03匹。血样和尿样中共检测出1053个阳性样品，占0.29%。（2003年为0.17%）。绝大多数都含有1种药物，同时含有2种药物的有25个阳性案件，同时含有3种非甾体抗炎药的有2个。,（2）训练： 全世界共检测3821匹（1025个尿样，1163个尿样和血样，1453个血样），共检测出阳性50个。其中同时含有2种药物的共有3个阳性案件。,2004年在赛马和训练中共检测出药物有111种，其中16个药物是新检测出的。自1983年至2004年期间，共检测出药物264种。,常见的药物:,共有23种，占所检出药物的73.4%氟胺烟酸（Flunixine,151）咖啡因（Caffeine,8