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文档简介
. 实验七 尿淀粉酶活性测定淀粉酶(AMY或AMS)在体内的主要作用是水解淀粉，它随机地作用于淀粉分子内的1，4糖苷键生成葡萄糖、麦芽糖、寡糖及糊精。血清中的淀粉酶 主要有胰型(P型)和唾液型(S型)及其亚型同工酶组成，P型淀粉酶主要来源于胰腺，S型淀粉酶主要来源于唾液腺。正常淀粉酶因分子量小，故可从肾小球滤过而由尿中排出。【目的】1、验证淀粉酶的催化作用。2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。【原理】血清及尿中的淀粉酶来源于胰腺和唾液腺，正常血清与尿中有一定活性。Winslow氏法测定尿和血清中淀粉酶活性是将试样作等比稀释，观察一系列试样在规定的37、30分钟的条件下，恰好能将0.1%淀粉溶液1ml水解（指加入碘液后不再呈蓝色）的酶量定为淀粉酶的一个活性单位，乘以尿的稀释倍数，即可得知每项ml尿液中的淀粉酶活性。【器材】试管（10mm100mm）、试管架、电热恒温水浴箱、吸管、洗耳球、滴管。【试剂】1、9%NaCl2、0.3%碘液3、0.1%淀粉溶液【操作】1、准备尿液（自备）。2、取10支试管，编号，用吸管向管中加入0.9%NaCl 1ml。3、用1ml吸管（注意应用刻度到头的）向第一管加尿液1ml，混合，再将试管中的液体吸起，然后任其流回试管，如此重复三次，以便全管混匀，并借此冲洗吸管内壁。吸出此混合液1ml移入第二管中。4、用同法处理第二管使之混匀，并取出1ml置于第三管中。依此类推，如此继续稀释至第九管后，吸出1ml混合液弃之，这样既可获得分别含原尿液为1/2ml,1/4ml,1/8ml,1/512ml的不同浓度的尿稀释液。第十管不加尿液作为对照管。5、从第十管起依次向各管迅速准确加入0.1%淀粉液2ml，迅速摇匀（是否充分混匀往往是实验成败的关键！），置37水浴中，确保30分钟。6、取出各管后，立即向各管中加入0.3%碘液2滴，摇匀后观察各管的颜色。*注：各管依次出现黄到蓝的色序，黄色表明无淀粉存在，浅红色紫色表明有淀粉的水解中间产物，兰色表明有淀粉存在。【注意事项】1、1-10号试管顺序勿搞乱。2、加样速度尽量快。【结果及计算】应选择无蓝色管中尿稀释倍数最大的一管来计算。假设无蓝色管中尿液稀释倍数最大的为第5管（而第六管为蓝色），已知在第5管内含尿液1/32ml,既1/32ml尿液能在37、30分钟水解0.1%淀粉2ml。求出1ml尿液水解0.1%淀粉X ml。1/32：2=1：xx=2/1/32=232=64即每ml尿液中所含淀粉酶的活性为64单位。【参考值】（尿）864单位；（血清）432单位。【临床意义】胰腺炎、腮腺炎、胆道疾病时尿淀
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