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肉制品中亚硝酸盐含量的测定 1331214张瀚文 一 实验原理 亚硝酸盐在盐酸溶液中 与芳香族胺 如对氨基苯磺酸 H2N C6H4一SO3H 发生重氮化反应产生重氮盐 此重氮盐与偶合试剂 盐酸奈乙二胺生成紫红色偶氮染料 此染料的颜色随亚硝酸盐的浓度增长而加深 或称与样品中亚硝酸盐的浓度成正比 因此 可采用分光光度闭塞测定 二 试剂与仪器 1 饱和硼砂溶液 称取5克硼酸钠 Na2B07 10H20 溶于100毫升热水中 冷却后备用 2 蛋白质沉淀剂 硫酸锌溶液 150g硫酸锌溶于500mL重蒸馏水中 3 发色剂1 0 4 对氨基苯磺酸溶液 称取0 4克对氨基苯磺酸 溶于100毫升20 的盐酸中 避光保存 3 发色剂2 0 2 盐酸萘乙二胺溶液 称取0 2克盐酸萘乙二胺 溶于100毫升水中 避光保存 5 亚硝酸钠标准溶液 精密称取0 1000克亚硝酸钠 优级纯 以重蒸馏水定容到500mL 从中抽取25mL 以重蒸馏水定容到100mL备用 亚硝酸盐浓度为5ug L 材料 市售红肠或腌肉 所需仪器 分析天平 水浴锅 比色管 比色皿 722分光光度计 1 亚硝酸钠标准曲线的绘制 三 操作步骤 移取标准液至比色管 0 0mL0 2mL0 4mL0 6mL0 8mL1 0mL六支一组 加水稀释至10mL 加入2mL发色剂1 对氨基苯磺酸溶液 摇匀 静置3min 加入2mL发色剂2 盐酸萘乙二胺 摇匀呈紫红色 用水稀释至25mL标线 摇匀 待测 静置10min 用分光光度计540nm波长处测定吸光度 用10mm比色皿测得各亚硝酸钠含量 作出曲线 两者线性关系 2 样品中亚硝酸盐的提取 2g切碎红肠于50mL烧杯 加入饱和硼砂溶液6 5mL 玻棒搅拌 每次20mL的70 左右的水倒入烧杯 转入100mL容量瓶中 洗3 4次 置沸水中水浴 从水沸时计时15min 取出 一边转动一边滴加1 5mL硫酸锌溶液 使蛋白质沉淀 冷却后定容 摇匀放置后 撇去上层脂肪 清液用滤纸过滤 必须清澈 3 样品中亚硝酸盐的测定 取10mL的滤液于25mL的比色管中 加入2mL发色剂1 对氨基苯磺酸溶液 摇匀 静置3min 加入2mL发色剂2 盐酸萘乙二胺 用水稀释至25mL标线 摇匀 待测 静置10min 重复操作测定吸
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