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考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)简介：本考马斯亮蓝染色试剂盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于 SDS-PAGE或非变性 PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后 PAGE胶上残余蛋白的检测。使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到 2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法 20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。保存条件：室温保存，至少一年有效。注意事项：可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明：1. 常规染色脱色方法：a. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色 1小时或更长时间。注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色 2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少 2-3次。d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色 4-24小时。期间更换脱色液 2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色 1-2小时后即可出现。注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。f完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含 20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。2. 快速染色脱色方法：a. 电泳结束后，取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。通常对于胶浓度大于 10的胶比较坚韧，在发生煮沸时不易破损；对于胶浓度小于 10%的胶，宜尽量避免煮沸，以免出现胶碎裂的情况。b. 随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动 5-10分钟。c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少 2-3次。d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。e. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚
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