基因毒性杂质全面信息资料

基因毒性杂质 （Genotoxic Impurities）,2012年5月,主要内容,背景知识介绍,确定毒性阈值的步骤,最大限度地控制杂质,杂质与杂质限度,主要内容,背景知识介绍,常见的基因毒性物质,苯并芘、黄曲霉素、亚硝胺许多化疗药物也具基因毒性，它们的不良反应是由化疗药物对正常细胞的基因毒性所致，如顺铂、卡铂、氟尿嘧啶等。氨基糖甙类抗生素大剂量、长期使用会引起耳毒性有些特别敏感的病人，仅使用一次或短期使用，就出现了听力损失。研究表明，他们的一个基因上有一点(mtl555G)与别人不同，这使他们对氨基糖甙类药物耳毒性的易感性大大增加。,什么是基因毒性杂质,是指能直接或间接损伤细胞DNA，产生致突变和致癌作用的物质。常用的缩写PGLs（potentially genotoxic impurities有潜在基因毒性的杂质）GTLs（ genotoxic impurities基因毒性杂质）可能产生基因毒性杂质的环节：新药合成原料纯化储存运输（与包装物接触）。,有关基因毒性杂质的指南,EMEA （欧洲药品局）2006年首先颁布了基因毒性杂质限度指南，并自2007年1月1日起正式实施。该指南为限制新活性物质中的基因毒性杂质提供了解决问题的框架和具体做法。ICH2006年，ICH也公布了相应的要求具体内容参见ICH Q3A(R2),IMPURITIES IN NEW DRUG SUBSTANCESQ3 appendix 2 reference, Step 4 version(25.10.06)新药原料药中的杂质，Q3A(R2),步骤4（06年10月 25日）版,FDA于2008年12月正式签发了类似指南：Guidance for IndustryGenotoxic and Carcinogenic Impurities in Drug Substances and Products：Recommended Approaches。主要内容包括：指南发布的背景原料药和制剂中的基因毒性杂质生成的预防办法基因毒性杂质的分析方法、处理方法和减少方法上市申请和临床研究申请的可接受限度草药原料药和制剂中基因毒性杂质评估指南,有关基因毒性杂质的指南,主要内容,赖祖亮小木虫,杂质与杂质限度,FDA原料杂质限度,Standard limits for impurities in APIsAPI中杂质的标准限度,/cber/gdlns/ichq3a.pdf,SFDA质控限度：质量标准中允许的限度，制定限度超过该值，应有充分的依据。,SFDA制剂杂质限度,考虑病例数与疗程，同时考虑：遗传毒性研究；常规毒性研究；其它特定的毒性终点（酌情而定）。,决策树,为什么呀？,毒性阈值,如果一个物质的体内试验表明对DNA有潜在的破坏性，可能导致肿瘤产生，我们是否可以这样下结论：任何摄入水平都具有致癌的风险。不存在明显的阈值。,毒性阈值,我们是不是做一个试验：剂量从低到高，对其影响性进行线性推断？生物系统的纠错功能使试验不具备可操作性。,引入一个新观点：确定一个可接受其风险的摄入量,突变的机制：细胞水平：基因突变，染色体重排，其他分子水平：切断或共价修饰DNA的损伤生物系统的纠正措施：修复受损的DNA程序性细胞死亡（凋亡）,TTC的概念,TTCThreshold of Toxicological Concern：毒性物质限量，也可以称之为毒理学关注门槛，是一个默认值。一个未知基因毒性数据的杂质：,TTC=1.5微克/天,TTC的概念,每天摄入1.5微克的基因毒性杂质，被认为对于大多数药品来说是可以接受的风险。使得人一生的致癌风险小于十万分之一。现实生活中，人一生得癌症的概率是四分之一。,必须要强调的是TTC是一个风险管理工具，它采用的是概率的方法。意思为：假如有一个基因毒性杂质，并且我们对它的毒性大小不太了解，如果它的每日摄入量低于TTC值，那么它的致癌风险将不会高于105的概率。所以TTC不能被理解为绝对无风险的保障。,主要内容,确定毒性阈值的步骤,依据化学结构，将杂质分为五类；,Step 1:,Step 2:,Step 3:,按照分类，确定验证的策略 (参见决策路线图 )；,按照日剂量，确定原料药中杂质的限度 (参见表1：短期用药推荐容许日摄入量)。,分类,Class1:Genotoxic Carcinogens,第1类：已知的、具有基因毒性（突变性）和致癌性的杂质,Step 1:,Class2:Genotoxic Carc unknow,第2类：已知的、具有基因毒性（突变性），但致癌性未知的杂质,Class3:Alert-Unrelated to parent,第3类：具有警示结构、与API无关、基因毒性（突变性）未知的杂质,Class4:Alert-Related to parent,第4类：具有警示结构、与API有关、基因毒性（突变性）未知的杂质,Class5:No Alerts,第5类：没有警示结构，没有基因毒性（突变性）的杂质,致癌警示结构,决策路线图,Step 2:,Step 3:,TTC值,短期用药的容许摄入量,TTC=1.5微克/天,表1：短期用药推荐容许日摄入量,最大日摄入量与浓度转化表,0.5%,0.5%,100ppm,100ppm,Increased duration=Decreased ADI of Impurity,Increasing Dose of API,可参考使用的范围,可参考使用的范围,Regulator Toxicology and Pharmacology.2006,44:198-211,EMEA,如何确定PDE？,ICH Q3C Guideline for Residual Solvents残留溶剂指南：/Regulatorylnformation/Guidances/ucm128223.htm/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformatio6n/Guidances/ucm073394.pdf,常见的PDE值,Gold carcinogenicity database ()里面有1574种致癌物质的列表，结构式，CAS号，作用部位，TTC值等等一系列信息。近30年的关于基因毒性方面研究的出版物（PDF版）用不同分类方法统计的致癌物质列表。不用注册，可以直接点击查看、下载全文。,基因毒性物质列表,目的在于检测试验物质是否直接或间接引发基因损伤，并测知其对基因的损伤程度。测试潜在基因毒性杂质的顺序：计算机筛选（软件模拟计算）微生物试验（例如：诱变可能性试验）动物试验（通常是小鼠和大鼠）,基因毒性试验（genotoxicity study）,结构不同的单个杂质的限度应该小于1.5微克/天。有相同作用机制、结构相似的杂质，其含量总和的限度应该参考1.5微克/天的限量进行评估。,如何评估多个基因毒性杂质,主要内容,最大限度地控制杂质,药学评价应该根据现有的处方工艺，提供杂质限度的合理性。应该列明所有涉及到的具有基因毒性或致癌性的化学物质，如所有试剂、中间体、副产品等。即使这些基因毒性反应物或者有基因毒性结果的物质没有在API上体现，也都应该被考虑。,原料药合成,药学评价如果在合成路线、起始物料方面没有更好的选择，则需要提供一个正当的理由。即：“物质中能引起基因毒性和致癌性的结构部分在化学合成中是不可避免的”假如基因毒性杂质被认为是不可避免的，那么应该采用技术手段尽可能的减少基因毒性杂质在产品中的含量，使其符合安全的需要或使其降低到一个合理的水平。对于活性中间体、反应物、以及其它化合物的化学稳定性都应该进行评估。应该有合理的分析方法去检测和量化这些杂质的残留量。,原料药合成,决策树,风险评估流程,注意事项,有几个结构基团被认定为具有非常高的基因毒性，它们即使被摄入低于TTC值的量也会面临非常高的基因毒性风险。高基因毒性的致癌物包括：黄曲霉素类N-亚硝基物类偶氮苯类。,不能用TTC值的方法来进行评价。需进行特殊的风险评价。,在某些特定情况下，TT