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文档简介
青霉素的提炼工艺刘科梅,1 青霉素的生产工艺过程,菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液预处理及种子加滤 提取 精制 成品检验 包装 分装 (应用 跟踪 质量分析),发酵阶段,提取阶段,2 发酵阶段,粉碎机,槽式混合机,3 青霉素提炼工艺流程,发酵液 预处理 过滤 萃取 洗涤 反萃取共沸结晶 过滤 干燥 成品,3.1 预处理,青霉素的存在部位:发酵液发酵液中含有大量杂质:菌体细胞、核酸、杂蛋白质、细胞壁多糖等、残留的培养基、色素、盐离子、代谢产物等目的:浓缩目的产物,去除大部分杂质,改变发酵液的流变学特征,利于后续的分离纯化过程预处理:发酵液加少量絮凝剂沉淀蛋白,发酵液的预处理和过滤,鼓式真空机过滤一次滤液:Ph6.2-7.2,略浑浊,棕黄或绿色,蛋白质含量0.5-2.0%,3.2 过滤,过滤时转鼓下部沉浸在悬浮液中缓慢旋转。沉没在悬浮液内的滤室与真空系统连通,滤液被吸出过滤机,固体颗粒则被吸附在过滤面上形成滤渣。滤室随转鼓旋转离开悬浮液后,继续吸去滤渣中饱含的液体。当需要除去滤渣中残留的滤液时,可在滤室旋转到转鼓上部时喷洒洗涤水。这时滤室与另一真空系统接通,洗涤水透过滤渣层置换颗粒之间残存的滤液。滤液被吸入滤室,并单独排出,然后卸除已经吸干的滤渣。这时滤室与压缩空气系统连通,反吹滤布松动滤渣,再由刮刀刮下滤渣。压缩空气(或蒸汽)继续反吹滤布,可疏通孔隙,使之再生 .,板框式过滤机过滤:硫酸调节ph4.5-5.0,加入0.07%溴代十五烷吡啶,0.07%硅藻土作为助滤剂。二次滤液:澄清透明,用于提取(收率90%),3.3 溶剂萃取原理:青霉素游离酸易溶于有机溶剂,而青霉素盐易溶于水萃取剂:青霉素分配系数高的有机溶剂。工业上通常用:醋酸丁酯和醋酸戊酯。由于第一次萃取时存在大量的蛋白质,所以要加0.05-0.1%乳化剂PPB。萃取:2-3次。,萃取过程BA萃取:酸化pH1.8-2.0,碟片式离心机分离(浓缩1.5-2.1)反萃取:pH6.8-7.4(磷酸盐、碳酸盐缓冲液)。把青霉素从丁酯中提取到缓冲液中。反复萃取2-3次,达到结晶要求。萃取条件:为减少青霉素降解,整个萃取过程应保持在10下,萃取罐冷冻盐水冷却。,一次BA萃取,碟片式离心机,3.4 青霉素的精制,脱色1、萃取液中添加活性炭,除去色素、热源质2、过滤,除去活性炭,结晶萃取液一般通过结晶提纯。青霉素钾盐在醋酸丁酯中溶解度很小,在二次丁酯萃取液中加入醋酸钾-乙醇溶液,青霉素钾盐就结晶析出。然后采用重结晶方法,进一步提高纯度,将钾盐溶于KOH溶液,调PH至中性,加无水乙醇,在真空条件下,共沸蒸馏结晶得纯品。,结晶-直接结晶加醋酸钠-乙醇溶液反应:得到结晶钠盐。加醋酸钠-乙醇溶液:得到青霉素钾盐。结晶-共沸蒸馏结晶萃取液,再用0.5M NaOH萃取pH6.4-6.8下得到钠盐水浓缩液。加3-4倍体积丁醇,16-26,真空0.67-1.3kpa下蒸馏。水和丁醇形成共沸物而蒸
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