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脱落细胞学 病理科 脱落细胞学 细胞固定的方法 常见固定问题的处理 体腔液样本的制备 细胞固定的方法 将细胞标本制作完成后,在细胞湿润时,立即放入以醇性溶液为主的固定液( 95%酒精、无水酒精、甲醇、乙醚酒精液等)内,称湿固定法。这种方法是目前最好的固定方法,可以完好的保存细胞内的各种结构,对正确认识各种细胞的性质,减少细胞学的误诊有很大的帮助。 细胞固定的方法 此方法在痰涂片、妇科涂片、穿刺物涂片、各种刷片、食道拉网涂片、肿块印片等水分较少的标本上使用非常方便,但在胸腹水、尿、心包积液、脑脊液等含水量较高的标本制作时,需要一定的技术,才能避免细胞的脱落,这在后面各章节具体会讲。 细胞固定的方法 细胞经过湿固定后,应该直接从固定液内拿出放入染色液中,无需水洗或干燥,水洗容易使细胞脱落,干燥会导致细胞褪变,也就是说无论在固定前还是固定后细胞干燥都会导致细胞褪变。 细胞固定的方法 湿固定后的固定液,一定要过滤或更换,防止细胞的脱落和污染。在固定和染色时,最好能将痰与其他液体标本分开处理,尽可能不要使用相同的苏木素液或使用前过滤,因为痰标本很容易吸附脱落的细胞,造成人为的污染,有时会导致误诊 常见固定问题的处理 1、 细胞褪变:通常是由于涂片在干燥过程中,细胞氧化,导致细胞褪变。解决方法,在半湿状态下立即固定。其二,也可能是由于细胞不能及时送检。解决方法:及时送检,或在送检液体内加入福尔马林(送检液体:福尔马林 =9: 1)。 常见固定问题的处理 2、 细胞掉片:最常见的原因是涂片上水分福尔马林太多,导致放入酒精时有大量细胞脱落。解决方法,离心后要把试管内的液体全部吸干。其次可能是细胞量太多或玻片不干净,解决方法,把玻片洗干净,涂片要薄、均匀。 体腔液样本的制备 体腔液样本包括胸水、腹水、心包积液、尿、肾囊肿穿刺液等制作。当送检标本为尿液时,应该要求患者排空清晨第一次尿液,因为这时的尿液中含盐量高,非上皮性物质较多。应该选择第二次以后的中段尿为佳。 体腔液样本的制备 如果患者有有严重的尿道或阴道炎症,应采用导尿管插管取尿,连续三天送检。 根据送检标本沉淀物量的多少,区别对待: 一、制片 1、取液:轻轻的把送检液体上部倒掉,取下层液体 15-50ml二管,放入离心管。 2、转速 2000/分, 5分钟 。 体腔液样本的制备 3、观看离心管内沉淀物的量: ( 1)量少:离心后肉眼只能看到少许沉淀,快速倒去上清液,再加入送检标本,重复离心,反复多次。最后将上清液倒去,把试管竖直倒立于吸水纸上,用吸水纸吸干管口的水分,然后用吸管吸出沉淀物(湿固定的关键就在于如何把沉淀物上的水分去除干净,过多的水分会导致细胞脱片)。 体腔液样本的制备 如果沉淀物太少,又没有多余的标本可以反复离心,或多次离心后细胞量还是很少,可将上清液倒去后,把试管口向上静置几秒,试管壁上的液体会流入管底,用吸管反复抽吸这点液体,把管底的细胞全部洗刷到液体里,然后吸出,放在 0.5或 1ml的尖底离心管内,重新离心,离心完成后,用 200微升加样枪吸取上清液,最后吸出沉淀物。此时,由于离心管较小,底较尖,细胞会非常集中,容易吸出。 体腔液样本的制备 ( 2)量多:离心后用吸管吸掉上清液,然后,用吸管吸取沉淀物上层细胞。 ( 3)红细胞多的标本处理:离心后吸取上层沉淀物,放入酒精冰醋酸液( 25%酒精95ml+5ml冰醋酸)内,打匀,再离心沉淀。然后,吸取沉淀物。 体腔液样本的制备 4、涂片:吸取沉淀物后,滴在载玻片上,可采用二张载玻片对拉法。吸取沉淀物涂片的关键:吸取沉淀物内不能带有水分。涂片的关键在于平整,均匀,不能太厚。当细胞太少时,涂片面积应以量为标准,范围尽可能小而集中,这样才不容易漏诊。然后立即放入 95%酒
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