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小条训练课题3酵母细胞的固定化1固定化酶常采用化学结合法和物理吸附法,而固定化细胞则常采用包埋法。2制备固定化酵母细胞的基本步骤是:酵母细胞的活化配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠与酵母细胞混合固定化酵母细胞。3配制海藻酸钠溶液浓度过高,则难以形成凝胶珠;若浓度过低,则固定的酵母细胞少,影响实验效果。4配制海藻酸钠溶液应小火加热或间断加热。5固定化酶和固定化细胞技术既实现了对酶的重复利用,降低了成本,又提高了产品质量。1酶能加快化学反应速率,但溶液中的酶难以回收,不能利用。要想既降低生产成本,又不影响产品质量,该如何解决这一问题?2固定化酶和固定化细胞一般采用什么方法?为什么?3从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小?4固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶?如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法?5 如果反应物是大分子物质,又应该采用哪种方法?为什么?特别提醒(1)固定化细胞使用的都是活细胞,在反应时需要适宜的生存条件。(2)由于被固定的细胞保证了完整性,酶的环境改变较小,所以对酶活性影响不大。6、制备固化酵母细胞的步骤有哪些?7 在配制海藻酸钠溶液时,用小火加热并不断搅拌的目的是什么?8 为什么海藻酸钠溶液要冷却后才能加入酵母细胞?9将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min的作用是什么?例1 下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是()A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B在固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧C利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件D利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物例2 下列关于固定化酶技术的说法,正确的是()A固定化酶技术就是固定反应物,使酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C固定化酶中的酶无法重复利用D固定化酶是将酶固定在一定空间的技术解析:选D固定化酶是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术,其优点是酶被固定在一定装置内可重复利用,不足是无法催化一系列酶促反应。2分析下图,与用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞相似的是() 解析:选DA是吸附法,B是化学结合法,C、D是包埋法,C一般是将酶包埋在细微网格里,D是将酶包埋在凝胶中。制备固定化酵母细胞采用包埋法,即将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中,与D相似。例3 下列说法错误的是()A固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法B固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法C由于细胞个大,而酶分子很小,因此细胞多采用物理吸附法固定D反应物是大分子物质时应采用固定化酶解析:选C由于细胞个大,酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。因此,细胞多采用包埋法固定,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定。例4 下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是 ()A可用包埋法制备固定化酵母细胞B反应产物对固定化酶的活性没有影响C葡萄糖异构酶在固定前后专一性不同D固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应归纳拓展例5 根据下面制备固定化酵母细胞实验的流程回答问题:酵母细胞活化配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞(1)在_状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物恢复_状态。活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时_。(2)影响实验成败的关键步骤是_。(3)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目_。(4)观察形成的凝胶珠的颜色和形状:如果颜色过浅,说明_;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明_。(5)制备固定化酶不宜用包埋法,为什么?_。易错提醒(1)选用的干酵母要具有较强的活性,而且物种要单一。(2)溶解CaCl2时勿用自来水,以免杂质离子影响实验结果。(3)固定化酵母细胞时,应将海藻酸钠与酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中,而不是注射,以免影响凝胶珠的
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