复方丹参方的现代研究方剂

复方丹参方的现代研究,一 复方丹参方剂组方特点二 复方丹参方单味药物研究三 复方丹参方药理药效学研究四 复方丹参剂型研究五 复方丹参药代动力学的研究六 复方丹参方的配伍配比规律研究七 复方丹参方毒理学研究八 临床研究,复方丹参方由丹参、三七、冰片三味组成。由上海中药二厂于1975年研制，1977年研制成功并投产。具有活血化瘀、理气止痛之功，用于冠心病、心绞痛、胸闷等症状，疗效确切，已列入全国基本药品目录。中华人民共和国药典1977年版、1985年版、1995年版、2000年版及2005年版均有记载。,一 复方丹参方剂组方特点,复方丹参方最早的剂型为片剂，但由于其原产工艺过程中丹参浸膏稠度大，制粒时容易粘附在容器壁上造成损耗，且与三七粉难以混匀，影响了产品质量。近二十余年来，广大医药工作者对复方丹参片在改进制剂、质量控制、药理毒理、临床评价等方面开展了广泛的研究，其制剂研究经历了片剂、胶囊剂、软胶丸剂、口服液、颗粒剂、浸膏剂、滴丸剂、注射剂以及口腔喷雾剂等多种剂型。复方丹参新剂型的研制成功，不仅提高了产品质量和疗效，而且减少了副作用，为临床提供了更多的选择。,丹 参,微寒，味苦，活血调经，凉血消痈，安神。活血化瘀，善调妇女经水，为妇科要药。为活血化瘀要药，广泛用于各种瘀血证。凉血安神用于热病，烦躁，昏迷，杂病，心悸及失眠等。,三 七,甘，苦，温，化瘀止血，活血定痛。用于各种内外出血证，尤以有瘀者为宜，既能止血，又能散瘀，止血而不留瘀，化瘀而不伤正。,冰 片,辛苦，开窍醒神，清热止痛。,丹参活血化瘀、通经活络君三七止血祛瘀、活血镇痛臣冰片芳香走窜，引药上行佐使,纵观复方丹参方的组成及功效，其适用范围可涉及现代医学的心血管系统、中枢神经系统，消化系统、代谢及免疫系统等各个领域。近年来，随着对复方丹参方基础及临床药理学的不断深入研究，其临床应用范围也日趋广泛，特别是在治疗各种心脑血管疾病中疗效显著。,复方丹参方能有效缓解冠心病心绞痛患者胸闷、心悸等自觉症状，对于冠心病伴左心室肥厚者有确切的逆转作用，也可用于慢性肺心病；其具有较好的降脂作用，可降低血液粘稠度，适用于高血脂症、动脉粥样硬化。复方丹参方通过降低血管阻力，增加血流量，改善脑血管供应状态，可用于脑卒中、颅脑损伤、三叉神经痛的治疗。此外，复方丹参制剂对于无症状性心肌缺血的治疗效果也较明显。,二 复方丹参方单味药物研究,丹参 丹参有活血祛瘀、凉血消痈、养血安神功效。常用于冠心病、心绞痛发作等多种瘀血为患或血行不畅的血管性疾病。丹参与当归、红花、降香、赤芍、川芎等药同用治疗瘀滞作痛；与檀香、砂仁同用治疗血瘀气滞所致的心腹、胃脘疼痛；与冰片、三七等配伍治疗冠心病；与夜交藤配伍以增强养心安神之效等等。,丹参 药理学研究表明，丹参对心脑血管系统、消化系统、呼吸系统、中枢神经系统、免疫系统等均有保护作用。,丹参的有效成分,丹参的有效成分一般归为两大类，即水溶性和脂溶性成分。脂溶性成分(二萜醌类化合物)：主要成分是丹参酮I、丹参酮 、隐丹参酮等。其中丹参酮 含量相对较高，约为药材的0.1-0.9。丹参中脂溶性成分目前均以丹参酮为有效成分的参考指标。,水溶性成分(酚性酸类化合物),对此研究较晚，但进展迅速，20世纪80年代初始有报道。主要成分有丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、甲酯及丹酚酸A、B、C等。丹参素是丹参中最有效的活性成分，是丹参注射液的主要质量控制指标，丹参素在药材中的含量约为0.1-0.3。丹酚酸A的含量约为丹参药材的0.01-0.06 ，而丹酚酸B的含量较高，可达2-8 ，丹酚酸B是丹参水溶性成分中最主要的活性成分。,（一）丹参对心血管的作用,1 抗心律失常作用 2 抗心肌肥厚3 抗动脉硬化4 改善微循环5 抗血栓形成,药理,（一）丹参对心血管的作用,1 抗心律失常作用 细胞内钙超载是引起心律失常的重要因素。丹参酮A 使正常心肌ca2+ 降低，明显抑制细胞内钙超载，具有钙通道阻滞作用。通过防止细胞内尤其是线粒体内的钙超载，可用于心肌缺血再灌注性损伤和心律失常的防治。因此可推断，丹参酮A具有抗心律失常作用。,药理,2 抗心肌肥厚,血管紧张素会诱导产生心肌肥厚，研究发现丹参酮A可对抗血管紧张素诱导产生的心肌肥厚。,3 抗动脉硬化,近年来大量的研究证据表明，血浆中的低密度脂蛋白可滞留于血管皮下间隙，发生脂质过氧化后形成氧化修饰的脂蛋白，而脂蛋白对血管内皮有毒性，对动脉粥样硬化(As)的发生和发展有着明显的促进作用。,采用新西兰白兔作为动物模型，一组给予标准饮食，一组给予高胆固醇饮食，还有一组给予含5 丹参酮B的高胆固醇饮食。在第6周测定其内皮损伤程度，发现丹参酮B组损伤细胞减少了53 ，腹主动脉的粥样硬化程度减轻了56 ，胸主动脉的胆固醇沉积减少了50。这项研究表明丹参酮B减轻AS程度与其降低胆固醇的作用有关。,4 改善微循环,在静脉滴注高分子右旋糖酐造成实验动物微循环障碍或局部注射去甲肾上腺素造成小鼠肠系膜微循环障碍实验中发现，丹参素可明显改善微循环障碍；其作用机制可能为通过开放更多的毛细血管，扩张微动脉，增加微循环内血流量，加快血流速度，消除微循环障碍时的血液瘀滞，丹参素及复方丹参注射液在给药30 min后可使小鼠乳酸升高的例数明显降低，提示丹参素具有改善微循环障碍的作用，并能改善细胞缺血缺氧所致的代谢障碍。,5 抗血栓形成,丹参是传统的活血化瘀药物。现代研究表明，丹参中的丹参素能明显抗体外血栓形成，抑制血小板的聚集，使血小板流动性显著增加。,（二）对脑组织的保护作用,丹参可改善重型颅脑损伤病人的血液流变学指标，减轻脑水肿，对脑组织有保护作用。,（三）促进组织的恢复与再生,丹参促进肝组织的恢复与再生作用尤为显著。丹参通过降低CCL4肝损伤的血清谷丙转氨酶，明显减轻肝坏死和炎症反应，减轻CCL4所致肝细胞膜流动性降低、抑制脂质过氧化反应。促进肝细胞再生时的DNA合成的细胞分裂增殖过程，具有一定的促进肝细胞再生作用。,（四）镇静、镇痛,丹参能抑制丘脑后核内脏痛放电，表明其有一定的镇痛作用。丹参水提液能明显抑制小鼠自主活动，其作用与剂量大小成正比，与眠尔通和氯丙嗪合用能增强抑制效果，能增强戊巴比妥钠的催促效果；由此可见，传统医学认为丹参具有清心除烦的功效确有一定道理。,三 七,三七为五加科植物三七的干燥根，又名田七，明代著名的药学家李时珍称其为“金不换”。主产于我国云南、广西。多为栽培品。具有滋补、强壮、补血、消肿镇痛、止血等功效。,化学成分,1 三七的皂苷类成分三七含有多种化学成分，主要有效成分之一是三七皂苷类。将三七总皂苷水解，得到人参二醇与人参三醇。目前已从三七根中分离出12种单体皂苷成分。迄今为止，从三七不同生长部位中已分离到20种单体皂苷成分。,2 三七的止血活性成分,自古以来，三七一直作为治疗出血性疾患的止血及活血化瘀药应用。近年来研究表明，三七的主要止血活性成分是一种特殊的氨基酸即三七素，虽然已知三七素是三七的主要止血活性成分之一。但其单体化合物单独作为止血药使用时，则有神经毒副作用和存在止血留瘀的问题。而三七根入药则无这些副作用。这就给人们提出三七如何入药的问题。,药理研究表明，三七中的钙离子和槲皮苷等物质亦是止血活性物质；而其皂苷类成分和黄酮类成分则有活血化瘀的功效。因此，三七作为止血和活血化瘀药应用，体现了其所含的多种止血活性成分和多种活血化瘀成分协同作用的功效，而三七素单独入药，则不能完全代表三七的功效。尽管这样，从三七中分离并鉴定到三七素，为三七作为止血药物应用于临床提供了依据。,（一）对血液和造血系统的影响,我国古代医学经典李时珍的本草纲目对三七的止血、定痛功效早有记载。现代药理学研究也表明三七不但具有良好的止血、活血化瘀双向药理作用，还具有明显的补血作用，能促进血液中红细胞、白细胞、血小板等各类血液细胞分裂生长，增加数目，并保持正常水平。,药理作用,1止血作用2活血作用3补血作用,1止血作用,三七水溶性成分三七素能缩短小鼠的凝血时间，并使血小板显著增加。电镜观察发现三七注射液能使血小板发生伪足伸展、聚集、变形及脱颗粒。这些反应近似于凝血酶对所致血小板超微结构的改变；此外，三七中的钙离子和槲皮苷等亦是止血活性物质。,2 活血作用,三七总皂苷(PNS)对家兔、大白鼠实验性血栓形成均有明显抑制作用；静脉注射可以明显抑制凝血所致弥漫性血管内凝血，动物血小板数目的下降和纤维蛋白降解产物的增加。PNS还可明显降低冠心患者的血小板黏附和聚集，亦可改善微循环，抗血栓形成 。可见三七止血(促凝)和活血化瘀(抗凝)双向调节功效是其所含多种活性成分综合作用的结果。,3补血作用,三七能促进各类血细胞分裂生长和增殖，因而具有显著的造血功能。三七注射液可升高急性失血性贫血大鼠外周红细胞和网织红细胞，对家兔也有类似效应。对环磷酰胺所致白细胞减少的小鼠和大鼠，三七总皂苷有明显升高白细胞作用。,（二）对心血管系统的影响,1降低心肌耗氧量，改善心肌缺血2抗心律失常3降血脂，防止动脉粥样硬化4降血压,1 降低心肌耗氧量，改善心肌缺血三七制剂能扩张冠脉，增加冠脉血流量，PNS能增加心肌营养血流量，改善心肌微循环，明显降低心肌耗氧量 ；PNS还被证明是三七治疗缺血性心脏病的基础 。,2抗心律失常,PNS对几种实验性心律失常模型(氯仿诱发的小鼠心室纤颤、氯化钡和乌头碱诱发的心律失常)均有明显对抗作用，其作用机制可能通过拮抗钙的作用而产生。,3 降血脂，防止动脉粥样硬化,早期研究发现，三七具有很好的调节血脂，防治心血管疾病的作用。近期研究表明，其可能有一定的调节血糖的作用，对治疗糖尿病和预防糖尿病并发症有积极的作用。,4 降血压,三七有扩张血管、降低血压作用，目前普遍认为PNS是一钙通道阻滞剂，其扩血管机理可能是PNS具有阻断去甲肾上腺素所致的Ca2+内流作用。,（三）对脑血管系统的影响,1 改善脑血循环三七能扩张脑血管，降低脑血管阻力，增加脑血流量。PNS使麻醉家兔股动脉平均血压(BMP)和脑血管阻力(CVR)下降，也可使麻醉大鼠的BMP和CVR下降，且呈剂量依赖性，但不增加脑血流量，对颈内动脉亦有扩张作用。,2 对实验性脑缺血的保护作用,PNS能使大鼠全脑或局灶性脑缺血后再灌注水肿明显减轻，血脑屏障通透性改善，局部血流量显著增加。PNS具有钙通道阻滞作用，能阻滞脑损伤后神经细胞内钙超载，减少游离脂肪酸的释放和氧自由基的产生，降低脑损伤后血及脑组织中的丙二醛含量，对颅脑损伤有保护作用。,四、对免疫系统的影响,三七可增加机体单核巨噬细胞系统功能，促进免疫器官胸腺和脾增重，增强机体的细胞免疫及体液免疫功能。,五、其他作用,滋补强壮作用 现代药理研究证明三七所含皂苷与人参皂苷类似，有滋补强壮作用，可用于气血虚弱等。研究发现三七在与人参同等实验条件下，能够起到与人参相近似的抗疲劳、耐缺氧、耐寒冷作用，说明三七有与人参相似的增强机体非特异性抵抗力作用。,冰片,冰片分天然冰片和合成冰片。天然冰片主要来源于龙脑香科植物龙脑香树树脂中析出的天然结晶性化合物或龙脑香树干经蒸馏冷却而得的结晶性化合物，是冰片中的正品，主产于印度尼西亚；作为商品的冰片还有艾片，是从菊科植物艾纳香叶提取物的结晶化合物，产于贵州、广东、广西、云南等地。,合成冰片(机制冰片)是以松节油或樟脑等物质经过化学方法合成而得，主产于上海、南京、广州、天津等地。天然冰片主要依靠进口，资源紧缺，而近年来从樟属植物中生产右旋龙脑，为我国增添了一种新的天然冰片药物资源，其中香樟、油樟和阴香3种樟科植物均可提取天然冰片。,（一）促进药物吸收作用（二）冰片对循环系统的作用（三）冰片对中枢神经系统的作用（四）抗菌、抗炎、镇痛作用（五）抗生育作用,药 理,（一）促进药物吸收作用,1 促进药物透过血脑屏障刘启德等给大鼠灌服10的冰片石蜡油液后即刻由尾静脉注射庆大霉素，20min后处死取脑，用放射免疫测定血清和脑匀浆中庆大霉素的浓度。实验结果显示，灌服冰片后的大鼠脑组织中庆大霉素的浓度明显高于生理盐水对照组大鼠的浓度。提示冰片有增加血脑屏障通透性，促进庆大霉素进入脑组织的作用。,药理,王宁生分别给家兔灌服生理盐水和冰片石蜡油15min后，由兔耳缘动脉注入造影剂-76泛影葡胺，以CT动态扫描为监测手段，比较兔灌服冰片对水溶性造影剂泛影葡胺在脑内的CT值和密度差异的影响。结果显示，兔灌服冰片后，脑组织增强扫描时得到的CT值比对照兔有较大的增加，组织影像密度有明显增强。且这种增强作用的持续时问也较长。灌服冰片兔CT值的变化轨迹与对照兔不同，具有一种“通过生物膜的吸收动力学过程”。可以认为，这是冰片增强血脑屏障通透性之故，间接证明了冰片能促进水溶性造影剂泛影葡胺透过血脑屏障进入脑实质。,血脑屏障是指脑毛细血管阻止某些物质（多半是有害的）进入脑循环血的结构。血液中多种溶质从脑毛细血管进入脑组织，有难有易；有些很快通过，有些较慢，有些则完全不能通过。这种有选择性的通透现象使人们设想可能有限制溶质透过的某种结构存在，这种结构可使脑组织少受甚至不受循环血液中有害物质的损害，从而保持脑组织内环境的基本稳定，对维持中枢神经系统正常生理状态具有重要的生物学意义。,我们常规服药，药物经新陈代谢要排出体外一部分，经血液循环流经全身时，要被其它组织吸收掉大部分，最后可能仅剩20%左右到达大脑。而由于血脑屏障的阻拦，这20%的大部分又被拦在屏障外面，真正穿过血脑屏障直达病灶的药量微乎其微。,现代研究表明冰片可以促使某些药物透过血脑屏障，提高川芎嗪等药的生物利用度。这和中医传统认为冰片“独行则势弱，佐使则有功”以及其“芳香走窜，引药上行”相一致，并附于这些传统认识新的内涵和科学涵义。但目前这些研究还仅仅停留在表面上，深入研究冰片的促药物透过BBB作用，比如采用细胞共培养在体外复制BBB模型，研究冰片促透的具体机理，对于揭示冰片在复方制剂中的具体作用，深刻了解中药复方的配伍，提高中成药的疗效有一定帮助，并且对于防治脑血管疾病有重要的意义。,2 冰片的促透皮吸收作用,冰片可以促进外用皮质激素(曲安缩松)、双氯灭痛、甲硝唑、氟脲嘧啶、水杨酸、川芎嗪、醋酸曲安奈德等药的透皮吸收。研究发现冰片的促进作用主要在角质层，可能是由于冰片改变脂质分子的排列和增加其流动性。另外冰片还能增加完整皮肤及其去角质层皮肤的贮库效应。以上研究表明了龙脑是一种有效的透皮促进剂，可见冰片在皮肤科有广阔的应用前景。,（二）冰片对循环系统的作用,实验表明：单味冰片对急性心肌梗塞的麻醉犬产生与冠心苏合丸类似的作用，能使冠状窦血流量回升，减慢心率，降低心肌氧耗量。提示冰片有利于冠脉痉挛的防治，并可减轻缺血引起的心肌损伤。另有实验表明，由冰片和苏合香组成的苏冰滴丸对小鼠游泳所致的心肌缺血性亚微结构改变及垂体后叶素所致之心肌缺血损伤均有明显保护作用，苏冰滴丸还能直接对抗去甲肾上腺素或肾上腺素所致家兔离体主动脉条的收缩。,（三）冰片对中枢神经系统的作用,研究冰片注射液对脑缺血动物模型的作用，结果发现冰片对脑缺血具有保护作用。冰片可以通过改善缺血脑区的能量代谢，提高脑组织抗氧化酶的活性，抑制脂质过氧化反应，减轻炎症反应，从而使脑组织免受损伤。,实验发现，冰片等芳香开窍药能缩短戊巴比妥钠持续睡眠时间，表现出醒脑和兴奋作用，以冰片的作用为强。冰片可以对抗苦味毒兴奋中枢神经的作用，延长惊厥潜伏期，减少惊厥死亡率，起镇静抗惊厥作用。冰片能延长小鼠耐缺氧存活时间。可见冰片对中枢神经兴奋性有双向调节作用，既能“镇静安神”，又有醒脑作用。,（四）抗菌、抗炎、镇痛作用,研究证实，龙脑、异龙脑和合成冰片对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等均具有抗菌作用，为接触抑菌。三者抗菌作用一致，在较低浓度时有抑菌作用，高浓度时有杀菌作用，接触时间较长，抗菌效果也随着增强。冰片对粉小孢子菌、黑曲霉菌等真菌也有抑制或杀灭作用。赵晓洋等通过透射电镜对冰片作用后的黑曲霉菌观察，其细胞壁变厚，模糊不清，细胞内的部分细胞器被破坏。常颂平等实验发现冰片对真菌的最低抑菌和杀菌浓度为5 、10，电镜观察下细胞结构的变化，证实了冰片的抗菌效应。这些最近的研究结果和中医传统认为冰片有“清热止痛，生肌”之功相吻合。,（五）抗生育作用,冰片能使中晚期妊娠小鼠流产，妊娠终止率分别为100和91，但对早期妊娠作用不明显。,中医学认为，冰片可去腐生肌、消肿止痛，故多用于口疮、痈肿，现代医药学试验证明，冰片有抗茵、消炎、止痛作用，与中医学观点一致。冰片是芳香开窍药的一种，它同时作为佐使药，广泛应用于临床治疗心脑血管疾病的中成药中。天然冰片龙脑香药源紧缺，我国长期依赖进口，并且以化学合成的合成冰片代替龙脑使用。,三 复方丹参方药理药效学研究,为深入探讨复方丹参作用机理。进一步拓宽治疗领域，国内外学者对复方丹参的药理药效进行了多方面的研究主要包括以下内容：,1 抗心肌缺血、缺氧2 扩张冠脉，增加冠脉血流量3 抗心率失常4 改善血液流变性和微循环5 调节血脂，防止动脉粥样硬化6 减少血小板聚集，抑制血栓形成7 抑制肿瘤生长，增强免疫力8 抗肝纤维化9 清除氧自由基，延缓衰老,1 抗心肌缺血、缺氧,研究表明，复方丹参中三七皂苷类成分作用于心肌，启动内源性保护物质的释放，加强心肌缺血预适应；丹参酮能够抑制血栓形成，协同三七皂苷类成分发挥保护心肌的作用；冰片可减慢心率，降低心脏动静脉血氧差。有利于心肌缺血缺氧性心绞痛的治疗。研究表明复方丹参滴丸可通过抑制缺血再灌注后心肌细胞凋亡，保护缺血心肌再灌注损伤。,2 扩张冠脉，增加冠脉血流量,复方丹参中丹参水溶性成分吸收入血快，主要作用于血管。扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，立足于活血止痛；方中三七皂苷类成分能够增加丹参水溶性成分的水溶性，对其吸收起效具有促进作用。比较含化复方丹参滴丸与含化硝酸甘油治疗心绞痛的疗效，发现两者无显著性差异。但是后者在提高冠状动脉血供的同时，却加快心率增加了氧耗；而复方丹参滴丸不仅舒张冠状动脉，增加心肌氧供，而且并不加快心率，具有双重作用。,3 抗心率失常,复方丹参有效成分具有钙离子拮抗作用，能够抑制心肌细胞复极化时钙离子的缓慢内流从而抑制心肌成纤维细胞胶原分泌与细胞增殖，同时可使主动脉阻抗和左室后负荷降低从而解除心律失常造成的循环障碍。,4 改善血液流变性和微循环,复方丹参有效成分对全血、血浆及纤维蛋白原都有极重要的改善作用，对红细胞的变形有明显的抑制作用。能够降低血液高凝、高粘滞状态。研究复方丹参滴丸对高脂血症狗血液流变学的影响，发现复方丹参滴丸能明显降低全血高切、低切粘度，改善高脂状态与微循环减少脂质沉积及血栓形成。,5 调节血脂，防止动脉粥样硬化,动脉粥样硬化的始动环节是内皮细胞损伤，中心环节是泡沫细胞形成和平滑肌细胞增生，而高血脂，特别是高胆固醇血症、高甘油三酯血症是导致动脉粥样硬化和心血管疾病的重要危险因素。研究发现，复方丹参滴丸可调节血脂代谢，减轻致动脉粥样硬化脂蛋白谱变化，延缓动脉粥样硬化改变进展，稳定粥样斑块。改善内皮细胞功能，从而降低心脏疾病的复发率、危险性和病死率。,6 减少血小板聚集，抑制血栓形成,复方丹参的有效成分丹参酮和丹参酚酸能活血化瘀、调节血脂、抑制血小板聚集，三七总皂苷能显著缩短凝血时间。因此，复方丹参能增强纤维蛋白的溶解活性，使血栓迅速溶解液化，保证血流畅通。给大鼠灌服复方丹参片溶液，并以等量蒸馏水作为对照组，以实验性血栓测定仪刺激血栓形成，观察血栓形成时间，结果发现复方丹参片能明显延长大鼠血栓形成时间，作用随剂量增加而增大。,7 抑制肿瘤生长，增强免疫力,复方丹参有效成分丹参酮类有着广泛的菲醌结构，是细胞毒作用的基础，其中菲环结构与DNA分子相结合，可调节肿瘤细胞的基因表达，诱导其凋亡；而呋喃环、醌类结构可产生自由基，引起DNA损害，抑制肿瘤细胞DNA合成。复方丹参提取物对Hep肿瘤有明显的抑制作用，可不同程度的提高小鼠碳粒廓清指数与免疫器官的重量，同时还可使小鼠血清溶血素生成值增高。,8 抗肝纤维化,复方丹参中丹参酮能改善肝小动脉痉挛所引起的肝细胞缺氧状态，促进肝细胞再生，对已形成的胶原纤维有重吸收的功能；三七能明显减轻肝细胞坏死，促进细胞修复再生及减轻肝纤维化。,9 清除氧自由基，延缓衰老,人体内氧自由基动态平衡失调时，通过脂质过氧化作用造成细胞内皮损伤。复方丹参中含有多种抗氧化有效成分，采用低温电子自旋共振(ESR)技术，发现丹参素能清除黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子和心肌线粒体产生的脂质自由基，从而达到抗氧化、延缓衰老的目的。,四 复方丹参剂型研究,（一）复方丹参方的已上市剂型 1 复方丹参片 中华人民共和国药典1977年版、1985年版、1995年版、2000年版以及2005年版均有收录。复方丹参片是采用醇提加水提的半浸膏片，其工艺既能提出丹参中的脂溶性成分，又能提出水溶性成分。复方丹参片有效成分为脂溶性的丹参酮和水溶性的丹酚酸类，包括丹参酮IIA，丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛等成分。由于其作用持久，有效成分全面而确切，价格较低等特点更适于心脑血管疾病的预防和慢性心脑血管疾病的长期治疗。但是复方丹参片崩解时间较长，不能缓解急性心绞痛。,滴丸剂是固体或液体药物与固体基质加热熔化混匀后，经适当口径的管口滴出一定剂量的液滴，在不相溶的冷凝液中收缩冷凝成球形或各种类球形的制剂，可以供内服或配制溶液使用。固体分散技术的虑应用使滴丸在提高药物尤其是难溶性药物的溶解度，溶出速度及生物利用度等方面有良好的应用前景。滴丸剂是根据中医的传统理论与现代药学新技术相结合研制而成的一种新型滴丸剂型。该剂型具有稳定性高、可以避免药物的水解、不易氧化、无粉尘污染、制剂缓释而发挥长效作用的特点。,2.复方丹参滴丸,为2000年版、2005年版中华人民共和国药典收录品种。由于其提取工艺采用水提醇沉，因此主要成分为丹参素，不含脂溶性的丹参酮类。复方丹参滴丸采用亲水基质的速效剂型，通过舌下含服，经丰富的毛细血管直接吸收入血迅速起效，克服了传统中药起效慢，药效低的不足，具有速效、高效的特点。符合剂量小、毒副作用小、速效、高效等现代药剂学的要求。滴丸减少了冰片用量并舌下含服，从而大大减少了对胃肠道的刺激。有效成分水溶性丹参素药理作用更强，三七提取物的生物利用度更高。,复方丹参片和复方丹参滴丸区别,1、复方丹参片的主要成分是由丹参、三七和冰片组成。它是采用生药直接磨粉、压片而成；而复方丹参滴丸则是在复方丹参片处方的基础上，利用现代科学技术精制而成的滴丸剂。2、复方丹参片的有效成分为丹参酮，复方丹参滴丸的有效成分为丹参素。丹参素较丹参酮水溶性更好、药理作用更强。另外，复方丹参滴丸中的三七提取物的生物利用度，比复方丹参片高出一倍。,3、复方丹参片和复方丹参滴丸均含有冰片，但复方丹参片中冰片用量偏大，对胃肠道刺激作用较强，对许多患有胃虚寒症的人不甚相宜；而复方丹参滴丸中的冰片用量相对较少，减轻了对胃肠道的刺激。4、复方丹参片为生药磨粉压片，故只能口服，由于口服药要经过漫长的消化、吸收过程，药效发挥缓慢，故不能用于缓解心绞痛，只能做冠心病的常规用药；而复方丹参滴丸可以口服，也可舌下含服，不仅可以作为冠心病的常规用药，而且可做缓解心绞痛的急救药。5、复方丹参片体积偏大；而复方丹参滴丸体积小，还不足复方丹参片的三分之一，便于携带和服用。,3. 复方丹参含片,复方丹参制剂中的新型产品，为含化剂型。复方丹参含片自口腔粘膜及舌下粘膜吸收，有效成分吸收迅速而完全，不经过肝脏首过效应而直接进入血液循环，生物利用度高。复方丹参含片中有效成分原儿茶醛和丹参素的含量远远高于同类产品。具有剂量小、含服方便、生物利用度高且无胃肠刺激等优点。,4 复方丹参气雾剂 是在复方丹参片基础上研制而成的，对冠心病心绞痛速效作用显著，吸收迅速，服用方便，可作为急救用药。 5 复方丹参胶囊 6 复方丹参颗粒,7 复方丹参口服液 具有吸收快，疗效迅速，生物利用度高等优点。8 复方丹参软胶囊 与片剂相比，复方丹参软胶囊具有吸收好，生物利用度高，药效作用更强等特点，它将处方中易于挥发的冰片包于软胶囊中，避免其挥发而使含量下降造成药效降低等缺点，使其治疗效果更为理想。复方丹参软胶囊对气滞型及瘀血型冠心病患者效果较佳。,（二）复方丹参方的在研剂型,1 复方丹参缓释片 急性心衰、急性心肌梗死等病有明显的时间性，猝死等心血管突发事件多发生在凌晨时间段。一般的心血管药物药效可维持2-6小时，睡前服用的药物在凌晨时间差不多已经代谢完毕，处于危险期的心脏恰恰得不到保护，从而使急性心衰、慢性心肌梗死或猝死等心血管发病时间多集中在这个时段。要求心血管患者在凌晨时分起身服药是不切实际的，采用缓释技术可以解决这一难题，达到延长有效浓度和治疗作用。,复方丹参缓释片最大的优点是在服用时，药物的各种有效成分在胃肠道中能按需要在预定时间内定量的释放，保持体内理想的、有治疗作用的、平稳的血药浓度。复方丹参缓释剂型可以保证四种有效成分（丹参酮IIA，丹酚酸B、人参皂苷Rg1和冰片）的均衡释放。,2. 复方丹参缓释微丸,沈阳药科大学王金辉、唐星等在对丹参水溶性酚酸类成分，三七总皂苷的化学和现代药理学研究基础上，制备得到复方丹参缓释微丸的有效部位群，其有效成分含量高达80%以上。药物制剂工艺先进，提高了该制剂的药效稳定性，改善了患者的服用方便性。,复方丹参缓释微丸率先达到每天服用2次，12小时服用一次的要求，改善了心血管患者长期药用、多次服药带来的不便，有利于避免患者忘服、漏服现象。且晚间第二次服用时，在凌晨2时左右刚好有一批微丸释放药物，对于心脑血管患者在凌晨高发病期的治疗和预防具有重要意义。,3 复方丹参浓缩丸,为薄膜包衣浓缩丸。将冰片用-环糊精包合，大大提高了冰片的稳定性，即使久置，也不易挥发损失。丸剂外层又采用先进的薄膜包衣新工艺，进一步提高了丸剂防潮、抗热稳定性。另外，浓缩丸还具有剂量小、疗效好、便于服用、易于吸收的特点，服用复方丹参浓缩丸比服用片剂、胶囊剂及颗粒剂更为方便。,4 复方丹参分散片,在现有复方丹参片的基础上改为分散片，该分散片遇水迅速崩解形成均匀的混悬液，药物溶出度高和生物利用度高，起效快，既可直接口服，又可加入水中分散后服用。尤其适合老人及吞服困难的患者服用。,5 复方丹参口腔崩解片,以丹参提取物、三七皂苷及冰片的复方药物为主药，加入辅料释放剂、崩解剂、粘合剂、矫味剂和润滑剂。应用时不需要水，仅依靠口腔内唾液很快崩解，在口腔中于1分钟内崩解，使溶散后的药物与消化道粘膜充分接触，快速吸收，应用方便，提高了生物利用度。,（三）质量控制研究,在1977-1995年版药典中，复方丹参片无定量测定标准。复方丹参制剂第一个定量指标是脂溶性成分丹参酮IIA，这主要由于丹参酮IIA易提纯，所以首先制备出了丹参酮IIA对照品，2000年版药典将其用于复方丹参片的质量控制，实际上丹参酮IIA对于心血管病的作用较缓慢，不如水溶性成分丹参素、原儿茶醛与疗效关联大，因此后来这两个指标成分被用于质量控制。随着研究的深入，进一步发现丹参酚酸类成分是药理活性更强的成分而且在药材中含量较高，所以一些提取物或制剂用丹酚酸B作为质控标准，或与丹参酮IIA共同作为质控标准。,复方丹参片中定量指标的规定,由于复方丹参制剂品种繁多，复方丹参片，作为治疗冠心病的基本中成药，广泛用于临床。该药1981年获准生产，至今共有687家企业获准生产。1985年始被中国药典收载，当时采用显色反应及某类成分在特定波长下的吸收作鉴别。,1995年版中国药典改为用丹参酮 、冰片、三七皂苷R1做对照进行TLC鉴别，鉴别专属性提高。2000年版中国药典增加了人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的TLC鉴别，还增加了丹参酮A的含量测定。2005年版中国药典在鉴别项下又新增了三七的特征显微鉴别及三七对照药材做对照的TLC鉴别，新增丹酚酸B的含量测定。至此复方丹参片中丹参的水溶性及脂溶性有效成分得到较为全面的质量控制。随着鉴别方法专属性的提高、鉴别范围的扩大、丹参定量质控方法的建立及完善，大大增强了复方丹参片质量的可控性。,中国药典经过历次修订，质量标准不断提高，药品质量也得到了提高。贵州省某药品检验所测定了2004年1月至2006年1月期间31个厂家生产的62批复方丹参片中丹酚酸B的含量，发现2005年7月1日后生产的产品，丹酚酸B的含量普遍在每1片5.0 mg以上，而2005年7月1日前生产的产品，丹酚酸B含量参差不齐且普遍偏低，含量最低的仅有每1片0.02 mg。广东省药品检验所曾经抽验10个药厂的复方丹参片共30批次，按照中国药典该品种项下检验，质量标准合格率为100 。含量测定结果每片含丹参酮A在0.27-0.34 mg，最高达0.50 mg，最低为0.25mg，丹参酮 含量可高达含量限度的1倍。,然而，由于该药生产厂家多，各生产厂家质量标准不统一，不同厂家的产品质量存在较大差别，甚至同一厂家不同批次的产品也存在较大差别。尤其在中国药典)2000年版实施后，含量测定方法由1995版的TLC改为HPLC，并规定每片复方丹参片中丹参酮A含量须大于0.2 mg，使这一问题更为突出。甚至有部分厂家将丹参酮A原料投入制剂中以调高复方丹参片中的丹参酮A含量。各地药监部门及科研工作者对不同厂家、不同批次产品的质量进行了大量研究工作。2000年第4季度国家药品监督管理局在对复方丹参片质量抽查中，有5家企业因产品质量不合格被曝光，2家被吊销生产批文。2001年第1季度的抽查中，曝光的企业有4家，吊销生产批文的有4家。,江苏省南通市药品检验所采用薄层色谱法鉴别15个生产厂家55批次复方丹参片中的丹参酮A，发现质量合格率为76.4。山东省烟台市药品检验所抽样检查发现26家药厂的55批复方丹参片中丹参酮A含量变化幅度较大，含量最高者山东天生药业有限公司021120批号的产品0.63mg，含量最低的江西桔王药业有限公司030803批号的产品0.21 mg，相差达3倍 。,对目前市售品9种不同厂家的复方丹参片中丹酚酸B的含量进行了检测，结果依次为每1片0.36，0.98，1.92，3.02，3.56，3.83，4.36，5.45，9.64 mg。对市售10个厂家的复方丹参片中丹参酮A检测发现，不同厂家含量差异显著，同一厂家不同批号的丹参酮A含量波动也较大。甚至有的厂家产品含量为零。李克庆检测22个厂家40批次复方丹参片，发现每片含丹参酮A最高者达0.86 mg，而最低者仅为0.12mg，相差7倍之多。,复方丹参滴丸于1995年获准生产，2000年版中国药典始收载，药物组成、功能、主治病症与复方丹参片相同，质量标准为每粒含丹参素不得低于0.08 mg。,五 复方丹参药代动力学的研究,应用液质联用技术，分析复方丹参滴丸的两组活性成分（水溶性丹参酚酸类成分和三七皂苷类成分）在体内代谢过程。按照人体给药剂量折算，用Beagle犬进行复方丹参滴丸的药代动力学研究，主要围绕复方丹参滴丸的两组活性成分在口服用药后的胃肠道吸收及体内药代动力学进行研究。,（一）复方丹参滴丸的药代动力学研究,在水溶性丹参酚酸类成分中，丹参素和原儿茶醛能较好的经胃肠道吸收；但丹酚酸A、B及D的吸收极差。丹酚酸A、B及D在肠道中可能部分转化成丹参素，这可能是丹参素口服生物利用度超过100%的原因。三七皂苷类成分的胃肠道吸收均较差，其中人参皂苷Rb1、Rd、Rg1、Re及三七皂苷R1的口服生物利用度分别为0.72%、0%、0.53%、0.51%和1.91%。,用健康受试者进行复方丹参滴丸的药代动力学研究，主要围绕胃肠道可吸收复方成分，针对口服给药后人体对其暴露水平、肾排泄特征及胃肠道吸收与舌下粘膜吸收的差异而展开。研究表明，经口吞服30粒丹参滴丸后，血中可测成分主要是丹参素，其达时间平均为1.3h；而其他丹参酚酸类成分及人参皂苷类成分的血药浓度极低，难以测到。给药后，尿中出现的复方丹参滴丸成分主要是丹参素，其24h的尿中累计排泄量占该成分口服剂量的27%。另外，尿中还可测到少量人参皂苷Rg1，其24h的尿中累计排泄量仅占该成分口服剂量的0.01%。经口吞服与舌下含服等剂量丹参滴丸（30粒）后，丹参素的达峰时间及口服生物利用度均相似；未见舌下含服能改善其他吸收较差的复方丹参滴丸成分的吸收。,（二）复方丹参方血清药物化学的动态研究,选用丹参/三七10/6配比的复方丹参方，观测大鼠灌服该方后，不同时间点丹参、三七的主要化学成分在大鼠体内的存在状况。预实验表明，该方给药后的大鼠血液中只可检测到丹参素、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1。因此，主要围绕这三种成分初步探讨复方丹参方的体内过程。,大鼠灌服复方丹参方后，丹参素可经胃肠道吸收入血，丹参素吸收入血较快，15分钟即可达到血药浓度峰值。大鼠灌服复方丹参方后，人参皂苷Rg1和Rb1可经胃肠道吸收入血，但体内过程有所差异。人参皂苷Rb1在1h、3h未检出，2h检出；人参皂苷Rg1在1h未检出，2h、3h可检出。,（三）丹酚酸B的体内过程研究,丹酚酸B为弱酸性化合物，在不同体液环境中的解离度不同，其在进食胃液和小肠液中较稳定，在空腹胃液和大肠液中不稳定。丹酚酸B回肠较十二指肠和空肠的吸收好，为其主要吸收部位。,六 复方丹参方的配伍配比规律研究,配伍配比是方剂的核心与灵魂，体现中医药的特色和优势，它既不是简单的药物作用在数量上的相加，也不是机械的毒副反应的抵消，而是在辨证立法基础上，以法统方，立方遣药，有序组合而成的有制之师。,基线等比增减设计方法,适用于小复方配比优化筛选的实验设计方法。A、B两种药物，在总量恒定的前提下以药典记载的配比为基线，其间A药含量以10%-30%递减，B药含量以10%-30%递增；或者B药含量以10%-30%递减， A药含量以10%-30%递增向两侧扩展，最后扩大到极点，两侧极点分别为单纯A药和单纯B药。,具体组分思路为：以中医药理论及相关专业知识为指导，明确所研制新药的功能主治，结合药物性质及主要药效组分，在总量恒定的前提下，以药典记载的剂量配比为基线，向两侧扩展，保持距离，最后扩大到极点(10/0-0/10)，中间分成若干变量组。丹参/三七的不同比例分为10/0,10/1,10/3,10/6,10/10,1/10,0/10七组。,丹参和三七的主要药理作用是趋向一致，还是靶点各异，二者是否存在最佳配比，最佳配比剂量是什么，最佳配比仅是一个点，还是一个范围。研究采用整体和细胞二个层次的模型，着眼于全成分，对丹参/三七的不同比例：10/0,10/1,10/3,10/6,10/10,1/10,0/10，进行了多效应的药效学比较研究，以探索其配伍配比的科学内涵，有效的指导临床用药和现代中药的开发。,1丹参、三七全成分的配伍配比规律研究,（1）整体水平,应用犬冠状动脉左前降支结扎法造成急性心肌缺血模型，并与血流动力学模型有机结合，着眼于全成分、整体动物、多效应指标动态观察，建立了基线等比增减设计方法，对丹参/三七的不同比例:10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10进行了多效应比较药效学研究。效应评价指标涉及到心外膜心电图心肌组织缺血区范围、心肌生化标志物、冠脉血流量、心肌耗氧量、血流动力学、一氧化氮、内皮素、自由基等。,结 果,以丹参为主的药对比例组，即10/6, 10/3, 10/l,10/0，有明显改善犬心肌缺血的作用，减轻由心外膜心电图所标测的心肌缺血程度，减少缺血区。说明在一定范围内，丹参、三七配伍后的药效优于单味药，且存在最佳比例。而以三七为主或两药持平的比例组，即0/10,1/10,10/10三组在这方面无明显作用。可推测，丹参在直接对抗心肌缺血作用上强于三七，三七的优势药效可能在其他靶点。,近年来，心肌钙蛋白的心肌特异性成为人们关注的焦点，它是诊断心肌梗死最敏感的指标，可反映微型梗死。正常情况下，人周围血液中无心肌钙蛋白，发生急性心肌梗死时，3小时后增高，并可持续7-10天。以丹参为主的药对比例组对心肌钙蛋白的增高有明显的抑制作用，反映了丹参对心血管的直接作用强于三七。这与心外膜心电图、心肌染色所反映的结果基本一致。,冠心病心绞痛是由于心脏的供氧和需氧之间的平衡失调，供不应求所致，因此增加冠脉血流量，降低心肌耗氧量或提高心肌组织对缺氧的耐受力是治疗的有效方法。在对冠脉血流量有效增加的各组中，以丹参为主的药组(10/0, 10/3, 10/6)作用较强。消心痛组在给药后30min即发挥作用，但很快减弱；而中药组(10/0, 10/3, 10/6)作用平稳而持久、稳中有升，远后效应明显。,10/6, 10/3两组可以明显改善左室收缩及舒张功能，增加心输出量及心脏指数，减少血管总外周阻力，而左室做功没有明显增加，心率、平均动脉压的波动较小。,内皮素（ET）与NO是血管内皮细胞释放的一对效应相反的活性物质。病理情况下，内皮的保护机制被破坏，二者释放失衡。冠心病、心绞痛、心肌梗死等心血管疾病发生时，缺血心肌细胞生物氧化功能发生异常，大量生成氧自由基，并扩散进入血液，氧化损伤细胞、毛细血管基底膜和生物分子，造成细胞功能障碍和毛细血管通透性增高，引起MDA含量增高。缺血心肌组织内SOD受缺血影响，催化活性减弱，被自由基氧化而失活。 MDA通过损伤内皮细胞，抑制NO活性，引起NO下降，同时体内SOD减少，使NO半衰期缩短，导致NO进一步减少， ET分泌增加，加重心肌缺血，使病情恶化。0/10组(单纯三七)既促进NO的释放、保护SOD活性，又降低ET含量、减少MDA的产生，表现出较强的生物效应。,总 结,丹参的作用靶点侧重于血管，其扩张冠脉的效应强于三七，以丹参为主的各组对血管的直接作用明显强于三七。在反映心肌缺血的心外膜心电图和反映心肌缺血范围的心肌组织染色两指标上，以丹参为主的四个药组，即10/0,10/1,10/3,10/6，可明显改善犬心肌缺血，减轻心外膜心电图所标测的心肌缺血程度；而以三七为主的比例组，即0/10,1/10两组在这方面无明显作用。同时丹参为主各组可明显降低心梗的生化标志物心肌钙蛋白，三七为主药组不能使之显著降低。说明丹参扩张冠脉、改善心肌缺血的效应明显，其主要靶点在血管。,三七的作用靶点侧重于心肌，对缺氧心肌的保护作用强于丹参。三七为主的各组主要作用在于调整内源物质的释放，抗自由基的损伤，从而间接的保护缺氧心肌。某些中药是通过对体内多种血管活性因子的调节而发挥心肌保护作用的，三七是此类中药。0/10(单纯三七)既促进NO的释放，保护SOD活性，又降低ET含量，减少MDA的产生，而丹参为主各组不能同时在上述四指标上出现效应。说明三七的主要靶点在心肌。,丹参/三七配伍与单用的效应明显不同，对心肌缺血的改善程度，在10/0,10/1,10/3,10/6效应较强的4组中，10/6和10/3的作用强于10/0组，二药之间存在协同互补作用。在对冠脉血流量有效增加的各组中，以丹参为主组(10/0,10/3,10/6)作用较强；当配比适宜时(10/3,10/6) ，配伍组效应会强于单味组；配比不当(10/10,10/1) 作用反而不及单味。显示了丹参/三七正确配伍应用的优势。,明确改善心肌缺血为主效应时，丹参三七配伍的最佳比例是10/3-10/6，在心电图、心肌组织染色、心肌钙蛋白多数指标上最佳。,（2）细胞水平,心脏微血管内皮细胞(CMEC)是心脏缺血缺氧时首先和最易受损的部位，作为中间保护屏障，其正常结构的维护和功能的完整性对心肌细胞(CM)的保护作用至关重要。体外培养CMEC模型，对丹参三七10/0, 10/1,10/3、10/6、10/10, 1/10、0/10进行了研究，其指标涉及到MTT,LDH、NO、ET等。,结果在正常培养条件下，丹参可促进增殖，三七反之，配比随着丹参量的减少和三七量的加大增殖效果减弱；对于NO和ET均有降低趋势，但无统计学意义。在缺O2损伤条件下，丹参促进CMEC增殖，三七反之，配比在10/1，10/6范围内，随三七量加大，促进CMEC增殖趋势明显。而在10/10-0